论文摘要
本试验以桃砧木GF677（Prunus. amygdalus×Prunus.persica）为材料,首先通过茎段培养获得组培无菌苗,其次通过对基本培养基类型、激素种类和浓度配比、碳源和暗培养时间等一系列因素的研究,初步建立了桃砧木GF677叶片离体再生和愈伤组织诱导、保存体系。主要研究结果如下：1、6月下旬进行GF677茎段培养,腋芽萌发率可达90.90%,且生长状况良好。GF677试管苗适宜的增殖培养基为LP基本培养基+6-BA 0.75 mg/L+IBA 0.3 mg/L+GA3 0.5 mg/L,添加蔗糖30.0 g/L,琼脂6.8 g/L,每28 d左右继代一次。2、GF677试管苗适宜的生根诱导培养基为MS基本培养基+IBA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L+PG 120.0 mg/L,添加蔗糖20.0g/L,琼脂6.8 g/L。培养30 d生根率可达100%,平均每棵植株生根10.72条,平均根长3.72 cm。3、GF677叶片再生适宜的培养基配方为LP基本培养基+6-BA4.0 mg/L+2,4-D 0.2 mg/L+AgNO3 0.5 mg/L,添加蔗糖20.0 g/L,琼脂6.0 g/L。叶片沿垂直主脉方向横切三刀,近轴端接触再生培养基,暗培养21d后转移至光培养,再生率达13.33%。4、采用预处理的方式获得的GF677预培养叶片较佳的再生培养基配方为SH基本培养基+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.3 mg/L+AgNO3 0.5 mg/L,添加蔗糖20.0 g/L,琼脂6.0 g/L。暗培养21 d后转移至光培养,再生率为9.93%。5、以GF677试管苗叶片为外植体,愈伤组织诱导较佳的培养基配方为LP基本培养基+TDZ 1.0 mg/L+6-BA 0.6 mg/L+2,4-D 0.2 mg/L+AgNO3 0.5 mg/L,添加山梨醇20.0g/L,琼脂6.0g/L。选取继代时间为28 d左右的试管苗幼嫩叶片,暗培养21d后转移至光培养。6、GF677愈伤组织保存的较佳的培养基配方为LP基本培养基+6-BA 0.5 mg/L+ 2,4-D 0.5 mg/L+CH 0.2 g/L,添加蔗糖30.0 g/L,琼脂6.0 g/L。选取继代时间为21 d左右的愈伤组织暗培养保存。
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摘要Abstract缩略词表1. 前言1.1 问题的提出1.2 桃离体培养和遗传转化研究1.2.1 茎尖和茎段培养1.2.2 胚培养1.2.3 叶片培养1.2.4 原生质体培养1.2.5 遗传转化1.2.6 人工种子1.3 愈伤组织的诱导与再生1.3.1 影响愈伤组织诱导的因素1.3.2 愈伤组织再生不定芽1.4 本研究的目的和意义2 材料与方法2.1 试验材料2.2 试验方法2.2.1 GF677茎段培养2.2.2 基本培养基对GF677增殖培养的影响2.2.3 激素对GF677生根培养的影响2.2.4 GF677叶片植株再生2.2.5 GF677预培养叶片再生2.2.6 GF677叶片愈伤组织诱导2.2.7 GF677叶片愈伤组织保存2.3 培养条件2.4 试验数据统计方法2.4.1 GF677生根诱导2.4.2 GF677叶片植株再生2.4.3 GF677叶片愈伤组织诱导与保存3 结果与分析3.1 GF677茎段培养3.2 基本培养基对GF677增殖培养的影响3.3 激素对GF677生根培养的影响3.4 6-BA和2,4-D对GF677叶片植株再生的影响3.5 GF677预培养叶片再生3.5.1 激素对GF677预培养叶片再生的影响3.5.2 外源添加物对GF677预培养叶片再生的影响3.5.3 碳源对GF677预培养叶片再生的影响3.6 GF677叶片愈伤组织诱导3.6.1 激素对GF677叶片愈伤组织诱导的影响3.6.2 基本培养基对GF677叶片愈伤组织诱导的影响3对GF677叶片愈伤组织诱导的影响'>3.6.3 AgNO3对GF677叶片愈伤组织诱导的影响3.6.4 暗培养时间对GF677叶片愈伤组织诱导的影响3.6.5 碳源对GF677叶片愈伤组织诱导的影响3.6.6 柠檬酸对GF677叶片愈伤组织诱导的影响3.7 GF677愈伤组织的保存3.7.1 基本培养基、蔗糖、激素和水解酪蛋白对GF677愈伤组织保存的影响3.7.2 暗培养时间对GF677愈伤组织保存的影响3.8 GF677愈伤组织植株再生4 讨论4.1 激素、基本培养基和硝酸银等对愈伤组织诱导和培养的影响4.2 GF677叶片再生率较低原因探讨5 小结参考文献图版和图版说明致谢附录Ⅰ附录Ⅱ 课题资助情况
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