论文摘要
目的：IL-21是新近发现的Ⅰ类细胞因子。它可以通过调节机体的免疫力来对某些肿瘤细胞产生杀伤作用。目前已成为肿瘤基因治疗中一个新的候选目的基因。把IL-21基因转染到鼠结肠癌细胞中构建重组细胞，将该细胞注射给裸鼠，结果发现肿瘤细胞生长缓慢，提示IL-21可以影响肿瘤细胞的生长。因此本研究拟用同位素Co60照射方法给予已成功转染IL-21的Colon 26细胞致死剂量的照射使其失去致瘤性，制备成仍保留有抗肿瘤活性的转基因瘤苗。通过与未照射亲株细胞的对比，观察其生物学性状及抗肿瘤效应的差异。以期为今后结肠癌的基因治疗提供理论依据。 方法：将Colon 26／IL-21细胞给予50Gy Co60同位素照射后制备成瘤苗；在光镜下观察照射前后Colon 26／IL-21细胞形态学的改变；采用细胞计数法、MTT法测定出经50GyCo60照射后Colon 26／IL-21细胞瘤苗的生长情况并比较照射前后此细胞株的生长活力和细胞增殖的变化，并且在照射后的不同时间点采用RT-PCR的方法检测IL-21基因的转录情况、比较其在不同的时间点量的变化；采用流式细胞分析方法检测经50Gy Co60照射后Colon 26／IL-21细胞瘤苗的凋亡率、细胞周期改变、增殖活力情况；采用ELISA法测定Colon26／IL-21细胞、经50Gy Co60照射后Colon 26／IL-21细胞瘤苗、经50Gy Co60照射后Colon 26细胞与BALB／c小鼠脾细胞共培养其上清液中分泌的IFN-γ水平变化；将制备好的Colon
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