正常成年大鼠呼吸节律产生中枢pre-B（?）tzinger complex的磷酸化ERK1/2神经元表达

论文摘要

作为一个位于延髓腹外侧的特定形态和功能区域,pre-B（?）tzinger复合体（pre-B（?）tC）被认为是新生和成年大鼠呼吸节律产生的部位。而细胞外信号调节激酶（ERKs）则被当作细胞生长和分化的重要调控因子,近来更是作为与神经元的突触可塑性及记忆功能密切相关的调控子引起了越来越多人的关注。我们在研究中发现,成年大鼠延髓腹侧存在着一群磷酸化细胞外信号调节激酶（phospho-extracellular signal regulated kinases,pERK）免疫反应神经元。为了证实这一群pERK免疫反应神经元与pre-B（?）tC的NK1R免疫反应神经元的相关性,我们采用了免疫荧光和免疫金-银标记的方法,力求明确两者之间的定位关系。结果:pERK1/2阳性产物主要分布于中小型神经元的胞体以及突起,在pre-B（?）tC中约有19.7%的pERK1/2阳性神经元表达NK1R;一些体积较小的、纺锤形的神经元也有明显的双标,而这一类神经元往往被认为是呼吸节律产生的神经元。电镜结果显示,pERK1/2的金颗粒主要分布于pre-B（?）tC神经元的胞体和树突,与粗面内质网以及核糖体存在较为密切的定位关系,线粒体则罕见阳性标记;染色质也有金颗粒的分布,核仁则罕见。总而言之,pERK1/2阳性产物在NK1R

论文目录

• 缩略语表
• 中文摘要
• 英文摘要
• 前言和文献回顾
• 1.呼吸中枢神经元的分布
• 2.脑干呼吸节律产生中枢—pre-B（o|¨）tzinger complex
• 2.1 pre-B（o|¨）tC神经元的神经生物学特性
• 2.1.1 呼吸神经元的类型
• 2.1.2 神经元的投射
• 2.1.3 调节pre-B（o|¨）tC内神经元活动的递质或调质
• 2.1.4 pre-B（o|¨）tC的特异性标记
• 2.2 pre-B（o|¨）tC的呼吸节律产生机制
• 2.2.1 神经元网络学说
• 2.2.2 起搏细胞学说
• 3.pre-B（o|¨）tC的信号通路研究
• 3.1 研究现状
• 3.2 pre-B（o|¨）tC与ERK信号通路
• 3.2.1 ERK信号转导通路
• 3.2.2 pre-B（o|¨）tC的ERK能神经元
• 正文
• Ⅰ.包埋前ABC法和纳米金-银法双重标记技术的应用
• 1.引言
• 2.实验材料
• 3.实验方法
• 4.实验结果
• 5.讨论
• 5.1 免疫染色方法的分类和优缺点
• 5.1.1 包埋前染色法
• 5.1.2 包埋后染色法
• 5.1.3 速冻冷冻置换法
• 5.2.免疫标记技术的应用与发展
• 5.2.1.免疫电镜PAP法／ABC法
• 5.2.2 免疫电镜胶体金标记法
• 5.2.3 纳米金标记法
• 5.3 包埋前免疫电镜双重标记技术的选择
• 小结
• Ⅱ：正常成年大鼠呼吸节律产生中枢pre-B（o|¨）tzinger complex的磷酸化ERK1／2神经元表达
• 1.引言
• 2.实验材料
• 3.实验方法
• 3.1 免疫组织化学染色
• 3.2 免疫荧光双重标记
• 3.3 免疫电镜双重标记
• 4.实验结果
• 4.1 免疫组化染色结果
• 4.2 免疫荧光双标染色结果
• 4.3 包埋前免疫电镜双标记结果
• 4.4 细胞采集计数统计分析结果
• 5.讨论
• 5.1 ERK免疫阳性pre-B（o|¨）tC神经元的功能
• 5.2 神经元与ERK信号激活
• 5.3 Pre-B（o|¨）tC的ERK信号转导机制
• 5.4 pERK1／2在pre-B（o|¨）tC神经元的亚细胞定位
• 小结
• 附图
• 参考文献
• 个人简历和研究成果
• 致谢