骨髓增殖性疾病中JAK2V617F突变与细胞因子受体表达的相关性研究

论文摘要

目的:BCR/ABL阴性的慢性骨髓增殖性疾病（cMPDs）主要包括真性红细胞增多症（PV）、原发性血小板增多症（ET）和原发性骨髓纤维化（IMF）。近期,在约90%的PV及一部分ET和IMF患者中发现了高致病性的获得性JAK2V617F点突变。JAK2是一种组成性酪氨酸激酶,能激活JAK-STAT信号传导途径。这一发现对揭示BCR/ABL阴性的MPD的发病机制有重要意义。而引起PV等cMPDs的主要点突变JAK2V617F需与I型细胞因子受体联合表达才能发挥其组成性激活活性。脱离I型细胞因子受体,JAK2V617F不能充分发挥其生物活性。本研究旨在探讨促红细胞生成素受体（EPOR）、粒细胞集落刺激因子受体（G-CSFR）、血小板生成素受体（C-MPL）在cMPDs中的表达情况,进一步探讨BCR/ABL阴性的cMPDs的分子生物学发病机制,期望为JAK2V617F阳性的cMPDs患者提供更为特异的靶向治疗药物奠定理论基础。方法:实验对象包括44例BCR/ABL阴性的慢性骨髓增殖性疾病（16例PV、14例ET、14例IMF）患者、11例慢性粒细胞白血病（CML）患者、20名健康志愿者作为正常对照（NC）。本研究应用定量逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）技术检测JAK2V617F突变,根据JAK2V617F突变检测结果将研究对象分为⑴NC组、⑵CML组、（3） JAK2V617F- cMPDs治疗组、（4） JAK2V617F+ cMPDs治疗组、（5） JAK2V617F- cMPDs初治组和（6） JAK2V617F+ cMPDs初治组。应用荧光定量PCR方法检测各实验组促红细胞生成素受体（EPOR） mRNA、粒细胞集落刺激因子受体（G-CSFR） mRNA、血小板生成素受体（C-MPL） mRNA表达情况。结果:1应用定量逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）技术检测JAK2V617F突变情况,结果显示在44例BCR/ABL阴性的cMPDs中有26例存在JAK2V617F点突变（阳性率为59.1%）,其中包括9/16例PV患者（阳性率56.25%）、10/14例ET患者（阳性率71.43%）、7/14例IMF患者（阳性率50.0%）。而11例CML患者和20名健康志愿者无一例存在JAK2V617F突变。2应用荧光定量PCR方法检测各实验组EPOR mRNA、G-CSFR mRNA、C-MPL mRNA表达水平。EPOR mRNA、G-CSFR mRNA、C-MPL mRNA在各组的表达情况:2.1 EPOR mRNAEPOR mRNA的相对表达水平各组资料经正态性检验和方差齐性检验,符合正态分布,方差不齐。经单因素方差分析F=1063.8,P=0.000,各组间EPOR mRNA相对表达水平不完全相同,进一步两两组间比较用t’检验。所有cMPDs患者与正常对照组相比P值均<0.05。JAK2突变阳性的cMPDs患者治疗前、后或JAK2突变阴性的cMPDs患者治疗前、后相比P值均<0.05,JAK2突变阴性与突变阳性的cMPDs初治患者相比P>0.05,JAK2突变阴性cMPDs初治组与突变阳性cMPDs的初治组相比P>0.05。2.2 G-CSFR mRNAG-CSFR mRNA的相对表达水平各组资料经正态性检验和方差齐性检验,符合正态分布,且方差齐。经单因素方差分析F=280.813, P=0.000,各组间G-CSFR相对表达水平不完全相同,进一步两两组间比较用LSD-t检验。JAK2突变阳性或突变阴性初治组与CML组相比P均>0.05,与正常对照组、JAK2突变阴性治疗组和JAK2突变阳性治疗组相比P均<0.05。2.3 C-MPL mRNAC-MPL mRNA的相对表达水平各组资料经正态性检验和方差齐性检验,符合正态分布,且方差齐。经单因素方差分析F=41.272, P=0.000,各组间C-MPL mRNA相对表达水平不完全相同,进一步两两组间比较用LSD-t检验。JAK2突变阳性初治组、JAK2突变阴性初治组和正常对照组相比P均>0.05。cMPDs治疗后与治疗前相比P<0.05。结论:1 JAK2V617F突变参与了cMPDs的发病,而不是单纯出现的无功能突变。2 JAK2V617F突变可能与预后相关,但具体关系有待于大宗病例随访、观察、统计。3Ⅰ型同型细胞因子受体与JAK2V617F共同参与了cMPDs的发病。4Ⅰ型同型细胞因子受体在多种造血系统肿瘤疾病中高表达,以不同形式参与了不同疾病的发病,但对cMPDs的发病并非决定因素。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 前言
• 材料与方法
• 结果
• 附图
• 附表
• 讨论
• 结论
• 参考文献
• 综述 骨髓增殖性疾病中JAK2V617F 突变与细胞因子受体表达的相关性研究
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