论文摘要
本试验主要围绕丽格海棠外植体灭菌、外植体的选择、不定芽诱导、丛生芽增殖、试管苗生根等几方面进行,集中研究不同灭菌方法的选择、不同外植体的选择、不同基本培养基类型、不同激素配比和用量的选择、琼脂浓度、糖浓度的选择等多方面相关问题。试验中的培养基方案均采用正交设计,数据采用SPSS软件分析。本文意图通过上述试验,全面研究丽格海棠组培快繁各阶段的主要影响因素和最佳培养基配方,筛选出最优技术参数组合,建立丽格海棠最优再生体系,进一步扩大丽格海棠外植体选择范围,提高丛生芽增殖系数,进而提高丽格海棠商业化生产效率,为丽格海棠专业化育苗提供技术支持。研究结果表明:1.丽格海棠外植体最佳的灭菌方法是:丽格海棠外植体最佳的灭菌方法是:丽格海棠茎段→洗衣粉上清液浸10min并用软刷刷去表面污垢→自来水冲洗30min→超净台上70%酒精速浸8s→无菌水冲洗2次→0.1%升汞浸7min→无菌水冲洗6次→无菌滤纸吸干水→接种。功率达55.56%。2.丽格海棠不定芽诱导的最适宜培养基是B5+BA2.0mg/L+NAA0.5 mg/L+食糖30 g/L+琼脂8g/L,PH调至5.8。3.丽格海棠启动阶段最佳外植体为花梗,其次为叶片,最佳生长素为NAA,最佳基本培养基为1/2MS。4丽格海棠丛生芽继代增殖培养初期最适宜培养基配方是MS+BA1.0mg/L+NAA0.1 mg/L+食糖30g/L+琼脂8g/L,PH调至5.8。5.影响丽格海棠生根的主要因素有:基本培养基,生长素IBA、NAA。在丽格海棠试管苗生根培养初期为了获得更多的生根苗,选用培养基1/2MS+IBA0.1mg/L+食糖30g/L+琼脂8g/L,PH调至5.8。在培养后期,可以考虑改用即MS+IBA0.1 mg/L+NAA0.1mg/L+食糖30g/L+琼脂8g/L作为培养基以促进根的伸长与生长,为下一步的移栽创造条件。糖用量对丽格海棠试管苗生根有着显著影响,当糖浓度为10g/L时,试管苗生根率最低根生长不良,当糖浓度为20g/L和30g/L时试管苗的生根率差别不大,从降低成本方面考虑,在培养基中添加糖20g/。同时本试验还发现,当培养基中添加4g/L、6g/L、8g/L的琼脂时,试管苗生根率差别不大,因此,从降低成本上考虑,在培养基中添加4g/L的琼脂。