论文摘要
脑血管病是导致人类死亡的常见疾病之一,其中缺血性中风的病死率和致残率高,严重威胁人类健康,影响患者生活质量。但当前对于该疾病的治疗仍无突破性进展,特别是对中风恢复期的治疗仍然是临床上棘手问题之一。本课题组认为,中风属于“络病”范畴,其核心病机为“毒损脑络”。解毒通络复方正是以这一创新性病机理论假说为指导,在结合缺血性中风现代病理生理学和中药生物效应以及国内外最新研究成果的基础上,研制出的由中药栀子、丹参、黄芪、天麻的有效组分配伍而成的中药新配方。基于此,本实验旨在研究缺血性脑损伤后突触再生的机制,以及解毒通络复方对其的影响,探讨中医药在解毒通络、调和营卫、凉血解毒、和血通络等综合功效下,有效地实现对脑缺血炎症级联反应病理过程的阻断作用,改善大脑微环境,诱导神经突触的结构和功能再建,发挥其对神经元保护作用的机制,为研究中医药治疗缺血性脑血管病的作用途径与靶点提供有意义的思路。目的：本研究从突触结构以及突触生长微环境变化两方面来研究缺血性脑损伤后突触再生的机制及解毒通络复方对其的影响。1验证解毒通络复方对大鼠缺血性脑损伤后神经功能及形态的影响2观察解毒通络复方对大鼠缺血性脑损伤后突触结构的影响3观察解毒通络复方对大鼠缺血性脑损伤后突触生长微环境中的活性因子的影响方法：1.应用步态分析和神经功能功能评分观察神经功能恢复的情况。2.应用HE染色法光镜下观察脑组织一般形态。3.应用镀银染色、透射电镜的方法来观察神经突触一般和超微结构的变化。4.应用免疫组织化学法观察突触素、肌动蛋白的表达,来揭示大鼠脑缺血损伤后突触再生的情况。5.应用酶联免疫（ELISA）法和免疫组织化学法观察突触生长微环境中生物活性因子脑源性神经生长因子（BDNF）、碱性成纤维细胞生长因子（BFGF）和血管内皮生长因子（VEGF）的含量和表达变化。结果：1.在步态分析结果显示,解毒通络复方组与模型组相比明显增大,有显著的差异。神经功能功能评分结果显示,解毒通络复方组与模型组相比的评分明显降低,具有明显差异。以上结果初步验证了：解毒通络复方对缺血后受损后神经功能的恢复起到了一定的促进作用。2.HE染色光镜下观察结果：可见大鼠缺血性脑损伤4周和8周时,皮层顶叶区神经元大量丢失,皮层区神经元和星形胶质细胞出现明显病理变化,给予解毒通络复方后梗死灶面积与模型组相比明显减小。神经元和星形胶质细胞损伤程度均有所减轻。3.镀银染色观察结果：正常组神经元形态结构完整,分布密集,树突数量多,轴突长。各个突触间连接紧密。可见轴突-树突式突触、轴突-胞体式突触等突触类型。模型组神经元坏死严重,数量明显减少。残存神经元突触数量少。与模型组相比,解毒通络复方组神经元数量增多,形态结构基本完整,突触数量增多,有见部分突触间相互连接。电镜观察结果：正常组神经元突触较密集,结构清晰,可见突触前膜、突触后膜、突触间隙以及突触前部囊泡等。突触后致密区染色深,密度大。模型组神经元突触数量明显减少,突触前、后膜结构模糊不清,突触后致密区密度低。与模型组相比,解毒通络复方组神经元突触数量增加,可见新生的穿孔突触,突触前膜、突触后膜以及突触前囊泡清晰可见,突触后致密区密度大。4.用免疫组化法观察大鼠局灶性脑缺血性损伤后脑组织皮质区突触素SYN的表达,结果显示：模型4周组SYN的表达与正常组相比明显降低,有显著性差异（P<0.01）。解毒通络复方4周组与模型组相比明显增高,有显著性差异（P<0.001）。模型8周组SYN的表达与正常组相比有明显降低,具有显著性差异（P>0.001）。解毒通络复方8周组与模型组相比SYN的表达呈升高趋势,有显著性差异（P<0.05）。免疫组化法观察大鼠局灶性脑缺血性损伤后脑组织皮质区肌动蛋白ACTIN的表达,结果显示：模型4周组ACTIN的表达与正常组相比略有降低。解毒通络复方4周组与模型组相比有升高趋势。模型8周组ACTIN的表达与正常组相比有明显降低,具有极显著性差异（P<0.001）。解毒通络复方8周组与模型组相比显著增高,有极显著性差异（P<0.001）。初步验证了：解毒通络复方在对大鼠脑缺血性损伤后神经元和突触的再生方面有一定的促进作用。5.通过酶联免疫（ELISA）法和免疫组织化学法观察突触生长微环境中生物活性因子脑源性神经生长因子（BDNF）、碱性成纤维细胞生长因子（BFGF）和血管内皮生长因子（VEGF）的含量和表达变化。结果显示：用ELISA法检测大鼠局灶性脑缺血性损伤后各组血清和患侧（左侧）脑匀浆中BDNF、VEGF、BFGF含量1) BDNF模型4周组组与正常组相比降低。解毒通络复方8周组与模型组有明显升高趋势,但无显著性差异。,模型8周组与正常组相比明显降低,有显著性差异（P<0.05）。解毒通络复方8周组与模型组相比明显增高。有显著性差异（P<0.05）.2) BFGF模型4周组与正常组相比明显增高,有极显著性差异（P<0.001）。解毒通络复方4周组与模型组相比明显降低。有极显著性差异（P<0.001）。模型8周组与正常组相比明显增高,有极显著性差异（P<0.001）。解毒通络复方8周组与模型组相比明显降低。有极显著性差异（P<0.001）。3) VEGF模型4周组与正常组相比明显增高,有显著性差异（P<0.01）。解毒通络复方4周组与模型组相比明显降低,有显著性差异（血清中P<0.01）、（脑匀浆中P<0.05）。模型8周组与正常组相比明显增高,有极显著性差异（血清中P<0.001）、（脑匀浆中P<0.05）。解毒通络复方8周组与模型组相比明显降低,有极显著性差异（血清中P<0.01）、（脑匀浆中P<0.001）。免疫组化结果与ELISA结果基本呈一致性。初步验证了：解毒通络复方可能是通过调节突触生长微环境中的活性因子的变化来促进突触再生,进而达到神经保护和神经功能恢复的目的。结论：1.大鼠脑缺血性损伤后神经元明显受损,解毒通络复方对缺血后损伤神经功能的恢复起到了一定的促进作用。2解毒通络复方在对大鼠脑缺血性损伤后神经元和突触的再生方面有一定的促进作用。3.解毒通络复方可能是通过调节突触生长微环境中的活性因子的变化来促进突触再生,进而达到神经保护和神经功能恢复的目的。
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- [1].解毒通络生津方治疗原发性干燥综合征的临床观察[J]. 上海中医药大学学报 2016(03)
- [2].朴春丽运用解毒通络调瘿法治疗亚急性甲状腺炎经验[J]. 中医药临床杂志 2020(05)
- [3].解毒通络浸膏干预对实验性糖尿病大鼠心肌保护作用研究[J]. 亚太传统医药 2017(13)
- [4].解毒通络保肾汤治疗糖尿病肾病临床观察[J]. 实用中医药杂志 2014(08)
- [5].解毒通络导邪法治疗糖尿病肾病的临床研究[J]. 糖尿病新世界 2014(16)
- [6].解毒通络生津法治疗原发性干燥综合征的临床研究[J]. 中国中医基础医学杂志 2013(01)
- [7].解毒通络生津法对干燥综合征自发性模型小鼠唾腺泪腺的影响[J]. 上海中医药大学学报 2010(02)
- [8].凉血解毒通络中药治疗早期带状疱疹[J]. 中国实验方剂学杂志 2010(11)
- [9].正交设计法优选解毒通络颗粒提取工艺[J]. 中国实验方剂学杂志 2012(09)
- [10].解毒通络保肾散对实验性糖尿病大鼠肾脏功能和结构的影响[J]. 中国实用医药 2009(20)
- [11].解毒通络保肾散对晚期糖基化终末产物肾毒性影响的实验研究[J]. 长春中医药大学学报 2009(04)
- [12].南征教授解毒通络导邪法治疗慢性肾衰竭[J]. 长春中医药大学学报 2016(05)
- [13].活血解毒通络中药治疗糖尿病足33例疗效观察及护理[J]. 齐鲁护理杂志 2011(27)
- [14].解毒通络益肾方治疗糖尿病肾病的临床研究[J]. 中西医结合研究 2019(06)
- [15].解毒通络祛湿法治疗活动期类风湿性关节炎的临床研究[J]. 中国中医基础医学杂志 2008(11)
- [16].解毒通络调肝方对脂肪细胞内质网应激和炎症的影响[J]. 北京中医药大学学报 2018(12)
- [17].解毒通络调肝方对2型糖尿病大鼠肝组织中肌醇依赖酶1/c-Jun氨基末端激酶通路相关蛋白表达的影响[J]. 中国老年学杂志 2018(21)
- [18].解毒通络益肾浓缩丸提取工艺的优化[J]. 吉林中医药 2020(06)
- [19].解毒通络胶囊对中风后抑郁大鼠模型益气解郁功效研究[J]. 世界科学技术-中医药现代化 2015(07)
- [20].解毒通络调肝方对2型糖尿病大鼠体重及血糖的影响[J]. 中国社区医师 2015(26)
- [21].解毒通络生津法对干燥综合征大鼠免疫功能影响的初步研究[J]. 浙江中医杂志 2011(11)
- [22].生脉解毒通络胶囊干预糖尿病大鼠心肌纤维化作用的实验研究[J]. 吉林中医药 2009(03)
- [23].生脉解毒通络胶囊对实验性糖尿病大鼠心肌MCP-1基因表达的影响及其作用机制[J]. 北京中医药大学学报 2008(05)
- [24].解毒通络注射液对缺血再灌注大鼠脑水肿的防治作用[J]. 中国中药杂志 2014(06)
- [25].生脉解毒通络胶囊对实验性糖尿病大鼠心肌超微结构的保护作用[J]. 中国老年学杂志 2008(20)
- [26].解毒通络生津方治疗原发性干燥综合征血液系统损害的临床研究[J]. 风湿病与关节炎 2016(05)
- [27].温阳解毒通络中药外敷缓解癌痛阴证的临床观察[J]. 中华中医药杂志 2014(12)
- [28].益肾解毒通络胶囊对早期糖尿病肾病患者CTGF的影响[J]. 中医研究 2008(10)
- [29].南征教授应用解毒通络益肾导邪法治疗消渴肾衰[J]. 吉林中医药 2018(01)
- [30].解毒通络益肾导邪法治疗消渴肾功能衰竭[J]. 长春中医药大学学报 2018(06)