导读:本文包含了靶向性基因表达论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:金黄色葡萄球菌肠毒素A,表皮生长因子,超抗原,靶向治疗
靶向性基因表达论文文献综述
谢洋,彭韶平,廖志莹,刘家峰,刘雪梅[1]（2014）在《靶向性超抗原EGF-SEA融合基因的构建及表达》一文中研究指出目的:构建金黄色葡萄球菌肠毒素A(SEA)和表皮生长因子(EGF)表达载体。方法:利用PCR及RT-PCR技术分别克隆出SEA基因及EGF基因片断,以经过改良优化的桥式PCR将2个基因融合,再转入表达载体pET-44,经诱导剂诱导后分泌SEA-EGF融合蛋白。结果:所得SEA、EGF基因测序结果示与GENEBANK中公布的标准序列一致,且成功融合SEA-EGF基因并成功导入表达载体。结论:该研究成功构建了SEA-EGF表达载体,为进一步研究SEA-EGF融合蛋白抗头颈肿瘤靶向免疫治疗奠定了基础。(本文来源于《临床耳鼻咽喉头颈外科杂志》期刊2014年09期）
范羽,侯梅,李璐,许峰,尤嘉琮[2]（2013）在《人端粒酶催化亚单位启动子调控nm23-H1基因靶向性表达抑制肺癌转移的实验研究》一文中研究指出背景和目的:肺癌既是全世界发病率和死亡率增长最快,也是对人类健康和生命威胁最大的恶性肿瘤,亦是临床治疗疗效最差的恶性肿瘤。肺癌的侵袭和转移是导致肺癌病人治疗失败和死亡的首要原因。现有的研究表明,肺癌侵袭和转移是一个受多基因调控,极其复杂的过程,在这个过程中,某些基因起正向调控作用,而另一些则起负向调控作用,两者之间维持平衡。许多研究已经证明,肿瘤转移抑制因子nm23-H1在肺癌中的低表达水平与肺癌的高转移潜能和不良的临床预后有关(如生存率、淋巴结转移和远处转移等),稳定转染(本文来源于《第13届全国肺癌学术大会论文汇编》期刊2013-08-08）
李玮[3]（2013）在《GFAP及hTERT双启动子靶向性表达hNIS基因引导放射性碘治疗胶质瘤》一文中研究指出研究目的放射性碘治疗甲状腺癌是临床常用方法。非甲状腺来源肿瘤通过转染hNIS基因也能摄取碘,端粒酶(human telomerase reverse transcriptase, hTERT)和神经胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)启动子都是肿瘤特异性启动子,对于靶向性治疗胶质瘤有潜在的研究价值。方法先扩增GFAP、hTERT启动子等基因,并保存于相应质粒中。并测定各启动子的启动效率,然后构建了hTERT启动子引导腺病毒早起蛋白(early region1A, E1A)基因同时GFAP启动子引导钠碘转运体(human sodium iodide symporter, hNIS)基因的条件复制腺病毒。胶质瘤细胞被腺病毒转染后,利用病毒空斑形成实验检测条件复制腺病毒的复制能力。进行Western blots实验,1251内流及外流实验并进行1311细胞克隆实验,来评估细胞摄碘情况。最后,在细胞实验的基础上,构建胶质瘤荷瘤裸鼠模型,进行动物体内放射性碘治疗实验。结果成功扩增了相应基因并保存。实验证明GFAP启动子启动效率能达到SV40启动子的60%左右,hTERT启动子启动效率能达到SV40启动子的43%左右。成功构建了条件复制腺病毒Ad-Tp-E1A-Gp-NIS,并感染胶质瘤细胞。Western blot实验显示43、70、49、120、70、110kDa的条带,分别对应着β-acting、GFAP、 hTERT、hNIS和hTPO蛋白。病毒复制实验证明了Ad-Tp-E1A-Gp-NIS的有效性,hTERT启动子能成功的限制腺病毒在肿瘤细胞内的复制。摄1251实验证明GFAP启动子能成功引导hNIS基因表达并摄取碘。细胞克隆实验中显示感染Ad-Tp-E1A-Gp-NIS后肿瘤细胞能成功的被1311杀死。成功构建了U87荷瘤裸鼠模型了,感染Ad-Tp-E1A-Gp-NIS并进行放射性碘治疗后裸鼠生存周期延长,肿瘤生长被抑制,核素显像显示荷瘤裸鼠肿瘤部位能靶向性摄取放射性核素。结论实验证明感染条件复制腺病毒Ad-Tp-E1A-Gp-NIS后,细胞实验及动物实验均证明,胶质瘤细胞系表现出肿瘤特异性的碘摄取,并引导针对胶质瘤的放射性碘治疗。(本文来源于《天津医科大学》期刊2013-05-01）
温银田,张丙芳,叶菁,吴雅岚,王净[4]（2010）在《人肝癌靶向性CD80基因表达重组腺病毒载体的构建及鉴定》一文中研究指出目的:构建人肝癌靶向性CD80基因重组腺病毒载体。方法:首先,从人基因组DNA中克隆AFP增强子、启动子,利用腺病毒穿梭质粒pShuttle和pShutte-CMV,采用AFP增强子替换CMV启动子,构建含有AFP启动子和增强子的穿梭质粒,命名为pShuttle-AFP。将人CD80基因克隆到pShuttle-AFP的AFP增强子和启动子之后,构建pShuttle-AFP-CD80质粒。再将其与腺病毒骨架质粒pAdEasy-1共转化E.coliBJ5183,利用同源重组构建腺病毒质粒pAd-AFP-CD80。以获得的重组子转染AD293细胞后制备重组腺病毒,并对重组的病毒进行鉴定和病毒滴度测定。结果:测序结果与Genebank中公布的AFP启动子、核心增强子和CD80基因序列相符。双酶切结果与预期结果相符。PacI酶切结果与目的结果一致。穿梭质粒pShutte-AFP-CD80和腺病毒质粒pAd-AFP-CD80经酶切和PCR鉴定均获得期望大小的目的片段。结论:成功的构建了人肝癌靶向性pAd-AFP-CD80腺病毒载体,为CD80基因在肝癌靶向性治疗的研究奠定了基础。(本文来源于《现代生物医学进展》期刊2010年04期）
郑湘榕,张珊珊,杨于嘉,王霞,钟乐[5]（2008）在《HRE.ppET-1调控血管内皮生长因子基因在内皮细胞的靶向性表达》一文中研究指出试图探讨缺氧反应元件(hypoxia-responsive element,HRE)增强人前内皮素原-1基因(human preproendothelin-1,ppET-1)启动子在缺氧条件下靶向调控血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)基因在内皮细胞中的表达,以提高基因治疗的效果.构建真核表达载体pEGFP-HRE.ppET-1,pcDNA3.1-VEGF+Pa(VA),pcDNA3.1-ppET-1+VEGF+Pa(PVA),pcDNA3.1-HRE.ppET-1+VEGF+Pa(HPVA),脂质体转染离体培养的脐静脉内皮细胞(HUVEC)和肝细胞,荧光显微镜下观察GFP表达,验证HRE.ppET-1调控元件在内皮细胞中的特异性.培养基中加入100μmol/L的氯化钴模拟细胞体外缺氧环境.载体转染后,RT-PCR和Western blot半定量分别检测各载体VEGFmRNA和蛋白水平在常氧及缺氧条件下的表达差异.应用Elisa定量检测细胞上清VEGF蛋白的表达量,分析各载体的表达水平.使用MTT实验检测细胞增殖率.GFP的表达显示HRE.ppET-1调控元件在内皮细胞中可有效转录外源基因,在非内皮细胞中表达极弱.RT-PCR,Western Blot及Elisa的检测结果均表明缺氧条件下HPVA组以及PVA组中,VEGF的表达均较常氧条件下增强(P<0.05).MTT实验检测显示HPVA转染的缺氧条件下的HUVEC增殖率超过其常氧未转染对照组.结果显示,HRE.ppET-1调控元件具有内皮细胞表达特异性,并能在缺氧条件下显着提高VEGF的表达,刺激内皮细胞的增殖,为进一步开展内皮细胞的靶向基因治疗研究奠定良好基础.(本文来源于《中国科学(C辑:生命科学)》期刊2008年09期）
王艳萍,唐小军,周清华,车国卫,陈小禾[6]（2008）在《人端粒酶催化亚单位启动子调控自杀基因HSV-TK靶向性表达治疗肺癌的体内外实验研究》一文中研究指出目的研究人类单纯疱疹病毒的胸苷激酶(HSV-TK)/更昔洛韦(GCV)治疗系统在人端粒酶催化亚单位(hTERT)启动子的调控下对肺癌细胞A549的体外靶向性增殖抑制作用和对裸鼠体内A549移植瘤的治疗效果。方法1用已构建的hTERT启动子和SV40启动子调控的TK基因表达质粒pGL3-hTp-TK和pGL3-SV40-TK转染端粒酶阳性的人肺腺癌细胞A549及端粒酶阴性的人胚肺细胞MRC-5,RT-PCR方法检测转染细胞中TK基因的表达情况;2MTT法检测GCV对上述转染细胞体外增殖的抑制作用;并应用流式细胞仪检测GCV对上述转染细胞凋亡的影响;3将A549细胞接种于裸鼠皮下,研究pGL3-hTp-TK/GCV和pGL3-SV40-TK/GCV对移植瘤的体内生长抑制作用。结果1转染pGL3-SV40-TK的A549和MRC-5细胞均有TK mRNA表达,转染pGL3-hTp-TK的A549细胞也有TK mRNA表达,但MRC-5细胞无TK mRNA表达;2GCV对转染pGL3-SV40-TK的A549、MRC-5细胞和转染pGL3-hTp-TK的A549细胞的体外增殖均有明显抑制作用,对转染pGL3-hTp-TK的MRC-5细胞无明显抑制作用;转染pGL3-SV40-TK和pGL3-hTp-TK的A549细胞经GCV处理后细胞凋亡指数(分别为21.58%和23.19%)均显着高于转染pGL3-hTp的A549细胞及空白对照,转染pGL3-SV40-TK的MRC-5细胞凋亡指数(9.35%)显着高于对照组,而转染pGL3-hTp-TK的MRC-5细胞凋亡指数(0.88%)无明显升高;3pGL3-SV40-TK/GCV和pGL3-hTp-TK/GCV治疗系统对裸鼠A549移植瘤的生长具有明显抑制作用,抑瘤率分别为46.7%和40.5%,均显着高于各阴性对照组(分别为9.7%,14.3%,7.0%和8.0%)。结论hTERT启动子可以调控HSV-TK基因在肺癌细胞中靶向性表达,HSV-TK/GCV治疗系统在hTERT启动子调控下对肺癌细胞A549的体外增殖和裸鼠体内的移植瘤生长均有明显的抑制作用。(本文来源于《四川大学学报(医学版)》期刊2008年05期）
毛丽伟,王卫东,李德志,陈正堂[7]（2007）在《放射控导正反馈基因环路对肺癌wt-p53基因靶向性表达的研究》一文中研究指出目的构建pE_6R_4/p53/GFP重组质粒并检测其在人非小细胞肺癌H1299(p53—/—)细胞的辐射诱导表达。方法用嵌合型增强子E_6R_4取代pci-neo质粒的CMV增强子,将wt-p53cDNA全长序列、IRES_2-EGFP报告基因片段构建于嵌合型增强子E_6R_4下游,获得pE_6R_4/p53/GFP重组质粒,采用脂质体法将重组质粒转染人非小细胞肺癌H1299(p53—/—)细胞;采用RT-PCR方法鉴定wt-p53基因整合情况;Western-blot方法检测不同辐射剂量8mVX线照射后,被转染细胞中wt-p53蛋白表达水平和持续时间。结果酶切和测序鉴定pE_6R_4/p53/GFP重组质粒构建正确;不同剂量8mVX线照射后,4Gy照射剂量时wt- p53基因表达最强,且持续时间延长。结论成功将辐射反应元件和正反馈基因环路技术相结合,实现了wt-p53基因的表达调控,为进一步研究非小细胞肺癌的放射-基因联合治疗奠定了基础。(本文来源于《重庆医学》期刊2007年19期）
司少艳,隋延仿,胡沛臻,张秀敏,葛伟[8]（2006）在《肝癌靶向性SEA-CD80基因共表达重组腺病毒载体的构建及表达鉴定》一文中研究指出目的:构建肝癌靶向性葡萄球菌肠毒素A(SEA)和CD80基因共表达重组腺病毒载体。方法:首先利用现有的腺病毒穿梭质粒pShuttle和pShuttleCMV,构建新的不带CMV增强子/启动子而带有polyA加尾信号穿梭质粒,命名为pShuttle2。将AFP增强子、启动子、SEA及CD80基因分别从已构建的pKSEP载体和pMD18TBIS载体上,分别亚克隆至pShuttle2中,再与腺病毒骨架质粒pAdEasy1共转化E.coliBJ5183。以获得的重组子转染HEK293细胞后制备重组腺病毒,然后感染高表达AFP的肝癌细胞系Hepa16和不表达AFP的黑色素瘤细胞系B16、成纤维细胞系NIH3T3。采用间接免疫荧光法,激光共聚焦显微镜观察和流式细胞术检测SEA和CD80在细胞膜表面的表达。采用3H掺入法检测膜表达的SEA诱导淋巴细胞增殖的活性。结果:以制备的重组腺病毒感染肿瘤细胞后,SEA和CD80能够靶向性地共表达在高表达AFP的Hepa16细胞膜上,而在不表达AFP的B16、NIH3T3细胞膜上不表达。结论:成功地构建肝癌靶向性SEA和CD80基因共表达重组腺病毒载体,为进一步研究SEA和CD80在肝癌靶向基因治疗中的联合应用及其抗肿瘤免疫机制奠定了基础。(本文来源于《细胞与分子免疫学杂志》期刊2006年05期）
符伟军,史立新,洪宝发,王晓雄,朱晓应[9]（2006）在《hTERT启动子调控的p53基因膀胱癌细胞靶向性表达载体构建及意义》一文中研究指出目的:构建人端粒酶逆转录酶基因(hTERT)启动子调控的含有治疗基因的质粒,探讨在膀胱癌细胞株中特异性靶向转录表达及其潜在的临床意义。方法:将hTERT起始转录区上游的启动子序列克隆到含有绿色荧光蛋白(GFP)基因及含野生型p53基因的质粒上,分别构建成质粒phTERT-GFP及phTERT-p53。脂质体转染法瞬时转染膀胱癌细胞株T24,应用荧光显微镜、噻唑蓝(MTT)法等方法观察在转染细胞中的差异性表达及膀胱癌细胞生长的靶向性抑制作用。结果:在端粒酶阳性的膀胱细胞中观察到hTERT启动子调控的绿色荧光蛋白的靶向性稳定表达,转染hTERT启动子调控的野生型p53基因靶向性抑制膀胱癌细胞生长,但对端粒酶阴性的正常细胞无明显影响(P<0.05)。结论:成功构建的hTERT启动子调控表达的野生型p53基因和GFP基因可在膀胱癌细胞T24中靶向性表达,hTERT启动子调控表达p53基因可靶向性抑制膀胱癌细胞生长。(本文来源于《军医进修学院学报》期刊2006年04期）
王萍玲,胡丽娜,孙袁,梁雪雯[10]（2006）在《靶向性发夹状RNA对卵巢癌SKOV3细胞H-ras基因表达的影响》一文中研究指出目的运用构建的小发夹状RNA重组质粒pshRNA/H-ras,研究其对卵巢癌SK-OV3细胞株内源H-ras基因的抑制作用。方法应用基因克隆技术,设计含21bp H-ras基因编码序列片段及中间以4~5个bp间隔的反向重复序列,克隆至转录载体pTZU6+1上并行序列分析。转染重组质粒pshRNA/H-ras至SKOV3细胞中,分别采用RT-PCR、Western blot检测细胞内H-rasmRNA和蛋白表达的变化。结果成功构建发夹状RNA载体,经DNA序列鉴定为正确的目的序列。RT-PCR和Western blot结果表明,重组质粒pshRNA/H-ras1和pshRNA/H-ras2均能在基因转录水平和蛋白表达水平上明显抑制SKOV3细胞内源H-ras蛋白的表达,抑制率达67%以上。结论重组质粒pshRNA/H-ras可显着抑制SKOV3细胞内源H-ras基因mRNA的转录和相应蛋白质的表达,为进一步研究H-ras基因在卵巢癌细胞异常增殖中的作用打下基础。(本文来源于《贵州医药》期刊2006年07期）
靶向性基因表达论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
背景和目的:肺癌既是全世界发病率和死亡率增长最快,也是对人类健康和生命威胁最大的恶性肿瘤,亦是临床治疗疗效最差的恶性肿瘤。肺癌的侵袭和转移是导致肺癌病人治疗失败和死亡的首要原因。现有的研究表明,肺癌侵袭和转移是一个受多基因调控,极其复杂的过程,在这个过程中,某些基因起正向调控作用,而另一些则起负向调控作用,两者之间维持平衡。许多研究已经证明,肿瘤转移抑制因子nm23-H1在肺癌中的低表达水平与肺癌的高转移潜能和不良的临床预后有关(如生存率、淋巴结转移和远处转移等),稳定转染
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
靶向性基因表达论文参考文献
[1].谢洋,彭韶平,廖志莹,刘家峰,刘雪梅.靶向性超抗原EGF-SEA融合基因的构建及表达[J].临床耳鼻咽喉头颈外科杂志.2014
[2].范羽,侯梅,李璐,许峰,尤嘉琮.人端粒酶催化亚单位启动子调控nm23-H1基因靶向性表达抑制肺癌转移的实验研究[C].第13届全国肺癌学术大会论文汇编.2013
[3].李玮.GFAP及hTERT双启动子靶向性表达hNIS基因引导放射性碘治疗胶质瘤[D].天津医科大学.2013
[4].温银田,张丙芳,叶菁,吴雅岚,王净.人肝癌靶向性CD80基因表达重组腺病毒载体的构建及鉴定[J].现代生物医学进展.2010
[5].郑湘榕,张珊珊,杨于嘉,王霞,钟乐.HRE.ppET-1调控血管内皮生长因子基因在内皮细胞的靶向性表达[J].中国科学(C辑:生命科学).2008
[6].王艳萍,唐小军,周清华,车国卫,陈小禾.人端粒酶催化亚单位启动子调控自杀基因HSV-TK靶向性表达治疗肺癌的体内外实验研究[J].四川大学学报(医学版).2008
[7].毛丽伟,王卫东,李德志,陈正堂.放射控导正反馈基因环路对肺癌wt-p53基因靶向性表达的研究[J].重庆医学.2007
[8].司少艳,隋延仿,胡沛臻,张秀敏,葛伟.肝癌靶向性SEA-CD80基因共表达重组腺病毒载体的构建及表达鉴定[J].细胞与分子免疫学杂志.2006
[9].符伟军,史立新,洪宝发,王晓雄,朱晓应.hTERT启动子调控的p53基因膀胱癌细胞靶向性表达载体构建及意义[J].军医进修学院学报.2006
[10].王萍玲,胡丽娜,孙袁,梁雪雯.靶向性发夹状RNA对卵巢癌SKOV3细胞H-ras基因表达的影响[J].贵州医药.2006
标签：金黄色葡萄球菌肠毒素A; 表皮生长因子; 超抗原; 靶向治疗;