番茄/茄子离体嫁接接合部组织分化变异的研究

番茄/茄子离体嫁接接合部组织分化变异的研究

论文摘要

本试验以番茄(Solanum melongena L.)、茄子(Lycopercicon esculentum Mill)为供试材料,运用组织培养、细胞悬浮培养的手段,对番茄、茄子离体嫁接体系,砧穗接合部组织的诱导、分化展开初步研究,目的在于初步探讨嫁接的接合部组织所发生的变异及其再生植物的遗传多样性。试验结果如下:(1)为初步建立有利于离体嫁接的试验体系,对离体嫁接砧穗的组合、外源激素进行研究,结果表明:番茄、茄子离体嫁接最适合的砧穗组合是以番茄为砧木,茄子为接穗,其嫁接成活率高达96%、接穗生长量也高达1.43cm,且茎尖生长迅速;选用外源激素组合为6-BA 0.1mg/L+KT 0.1mg/L+IBA 0.05mg/L的MS培养基时,嫁接成活率最高,达93.3%。(2)探索了基本培养基对嫁接接合部组织培养的成活、生长和分化的影响。结果表明:MS和B5基本培养基均能使嫁接接合部组织的成活率高、褐变率低,并且生长情况好,两者之间的差异不显著,可以选用这两种基本培养基作为嫁接接合部组织的诱导分化培养基。(3)研究了培养基中添加不同组合的激素对嫁接接合部组织的分化的影响。结果表明:在MS培养基中,以2.0mg/L 6-BA+0.5mg/L IAA+0.05mg/L NAA和3.0mg/L6-BA+0.05mg/L NAA的MS培养基中分化率最高,为60%,显著高于其它激素组合,并且能诱导较多不定芽分化;在B5培养基中,激素组合为0.5mg/L 6-BA+0.5mg/L IAA和2.0mg/L 6-BA+0.2mg/L IAA的培养基中,嫁接接合部组织分化率最高,达60%以上,显著高于其它激素组合,也能诱导较多不定芽产生。(4)探索了不同取材时期及继代培养间隔时间对嫁接接合部组织的影响。结果表明:在离体嫁接7~10d后,取下接合部的愈伤组织成活率、褐变率及生长情况都明显优于10d以后的;而嫁接接合部组织的继代时间间隔在20d左右时,成活率最高,褐变率最低。(5)初步研究了嫁接接合部组织细胞悬浮培养技术体系,用细胞悬浮培养的手段,初步研究了番茄/茄子嫁接接合部愈伤组织的诱导,制备细胞悬浮液,再进行器官发生和植株再生。(6)探索了嫁接接合部组织再生植株的变异性,观察到具有番茄和茄子双亲多种性状组合的变异类型,包括具有茄子性状的芽、番茄性状的芽、兼有番茄和茄子双亲性状的芽以及不具有番茄和茄子双亲性状的芽,说明嫁接接合部组织可作为遗传变异的来源。

论文目录

  • 摘要
  • Abstract
  • 1 文献综述
  • 1.1 嫁接及其研究概况
  • 1.1.1 嫁接的概念及历史
  • 1.1.2 嫁接的研究概况
  • 1.1.2.1 嫁接的愈合发育过程
  • 1.1.2.2 嫁接亲和性机制
  • 1.2 嫁接杂交及其应用
  • 1.2.1 嫁接杂种存在的真实性讨论
  • 1.2.2 嫁接杂种的类型
  • 1.2.3 嫁接杂交机理的探讨
  • 1.2.4 嫁接杂交的应用
  • 1.2.4.1 嫁接嵌合体的应用
  • 1.2.4.2 蒙导杂种的应用
  • 1.2.5 嫁接杂交方法的优点和缺点
  • 1.2.5.1 优点
  • 1.2.5.2 缺点
  • 1.3 离体嫁接的概念及应用现状
  • 1.3.1 器官嫁接
  • 1.3.2 组织嫁接
  • 1.3.3 细胞嫁接
  • 2 目的与意义
  • 3 材料与方法
  • 3.1 番茄和茄子的离体嫁接
  • 3.1.1 试验材料
  • 3.1.2 试验方法
  • 3.2 番茄/茄子嫁接接合部组织的分化及变异检测
  • 3.2.1 试验材料
  • 3.2.2 试验方法
  • 3.3 嫁接接合部组织的悬浮培养
  • 3.3.1 试验材料
  • 3.3.2 试验设计与方法
  • 3.4 培养条件
  • 3.5 试验结果观察与数据统计分析方法
  • 4 结果与分析
  • 4.1 番茄和茄子的离体嫁接
  • 4.1.1 不同砧穗组合对嫁接成活率和接穗生长的影响
  • 4.1.2 嫁接培养基的不同激素配比对嫁接成活率的影响
  • 4.2 番茄/茄子嫁接接合部组织的分化及变异检测
  • 4.2.1 基本培养基和激素组合的影响
  • 4.2.2 取材时期和继代培养时间间隔的影响
  • 4.2.3 嫁接接合部组织再生植株的变异检测
  • 4.3 嫁接接合部组织的悬浮培养
  • 4.3.1 愈伤组织的诱导
  • 4.3.2 细胞悬浮培养物的制备
  • 4.3.2 细胞悬浮物的诱导分化
  • 5 讨论
  • 5.1 茄子和番茄的离体嫁接
  • 5.1.1 不同砧穗组合的影响
  • 5.1.2 嫁接培养基的不同激素配比的影响
  • 5.2 番茄/茄子嫁接接合部组织的分化
  • 5.2.1 基本培养基
  • 5.2.2 植物生长调节剂
  • 5.2.3 取材时期和继代培养时间间隔的影响
  • 5.2.4 嫁接接合部组织再生植株的变异检测
  • 5.3 嫁接接合部组织的细胞悬浮培养
  • 6 问题与下一步工作建议
  • 参考文献:
  • 图版说明(Explanation of plate):
  • 致谢
  • 攻读硕士学位期间发表的学术论文
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