本文主要研究内容
作者李亚博（2019）在《毛果杨PtrHox11基因耐盐功能分析》一文中研究指出：HD-Zip是植物转录因子家族中的重要成员,广泛参与植物生.长发育、非生.物胁迫和激素信号转导等过程。为了探究/HD-Zip家族成员之一PtrHoxll如何在毛果杨中行使功能,本研究对PtrHoxll基因的功能和调控机制进行了初步探究。从毛果杨中克隆获得PtrHoxll基因序列全长,该基因全长1152bp,多序列比对显示毛果杨PtrHoxll转录因子与其他物种HD-Zip转录因子同源性较高。酵母双杂交实验表明,PtrHoxll具有转录激活活性,转录激活区域在1-96个氨基酸之间。亚细胞定位实验结果显示PtrHoxll基因定位于细胞核中,具有明显的转录因子特性。进一步通过对不同胁迫条件下PtrHoxll基因在毛果杨根、茎、叶中的表达模式分析发现,PtrHoxll基因在根茎叶中的表达都有不同程度的改变,表明该基因可能参与多种非生物胁迫响应。尤其是盐胁迫下,该基因在毛果杨根茎叶中都有较高表达量。为进一步了解PtrHoxll基因是否具有耐盐功能,构建了PtrHoxl 基因过表达载体(pROKII-PtrHoxll)、抑制表达载体(pFGC5941-PtrHoxll),将其与空pROKII载体瞬时转化到毛果杨中,分别获得过表达(OE)、抑制表达(RNAi)及对照(CON)三种植株。分析比较了三种转基因毛果杨中NaCl胁迫前后NBT和E vans Blue染色情况；测量了 POD、SOD酶活性；测定了 MDA、HO02、叶绿素和脯氨酸含量以及相对电导率等生理指标以快速鉴定PtrHoxll基因的耐盐功能。结果显示,三种转基因植株中,过表达毛果杨植株体内POD和SOD酶活性最高,H202、MDA含量最低,相对电导率最低,细胞膜受到的损害程度最小,完整性最好;而抑制表达体内POD和SOD活性最低,H202和MDA含量最高,相对电导率最高,细胞膜损伤最严重。表明过表达PtrHoxll基因可能会提高转基因植株的耐盐能力。利用农杆菌介导途径获得pROKII-PtrHoxll稳定转化株系。比较野生型和转基因毛果杨的生长指标；观察盐胁迫下过表达PtrHoxll基因和野生型毛果杨生长状况和气孔差异:制作石蜡切片,观察转基因和野生型毛果杨次生壁发育情况。结果显示,转基因毛果杨株高增加、叶片面积变大,根长变短但数量增加,其失水率低于野生型毛果杨,这种情况的出现可能与过农达植株光介产物积累量增加有关。盐肋迫条件下,与野生型相比,过表达植株的生长状况明显优于对照(WT),气孔开合度显著降低,表明毛果杨可能通过PtrHoxll基因的过量表达减少气孔的开合度,进而减少水分的损失,提高耐盐能力。石蜡切片结果显示,过表达PtrHoxll基因植株木质化程度高于野生型,PtrHoxll基因可能参与调节毛果杨次生壁的发育。为了进一步了解PtrHox-ll基因的作用机制,分析其调控的下游基因和结合的顺式作用元件。利用TF-Centered YlH技术(以转录因子为中心的酵母单杂交技术)研究了PtrHoxl 转录因子识别的顺式作用元件,并通过酵母单杂交方法进行验证。结果显示,毛果杨PtrHoxll基因可以特异性识别顺式作用元件Y1“TAGATAC”,表明该基因可能通过与Y1结合,从而调控下游基因的表达。
Abstract
HD-Zipshi zhi wu zhuai lu yin zi jia zu zhong de chong yao cheng yuan ,an fan can yu zhi wu sheng .chang fa yo 、fei sheng .wu xie pai he ji su xin hao zhuai dao deng guo cheng 。wei le tan jiu /HD-Zipjia zu cheng yuan zhi yi PtrHoxllru he zai mao guo yang zhong hang shi gong neng ,ben yan jiu dui PtrHoxllji yin de gong neng he diao kong ji zhi jin hang le chu bu tan jiu 。cong mao guo yang zhong ke long huo de PtrHoxllji yin xu lie quan chang ,gai ji yin quan chang 1152bp,duo xu lie bi dui xian shi mao guo yang PtrHoxllzhuai lu yin zi yu ji ta wu chong HD-Zipzhuai lu yin zi tong yuan xing jiao gao 。jiao mu shuang za jiao shi yan biao ming ,PtrHoxllju you zhuai lu ji huo huo xing ,zhuai lu ji huo ou yu zai 1-96ge an ji suan zhi jian 。ya xi bao ding wei shi yan jie guo xian shi PtrHoxllji yin ding wei yu xi bao he zhong ,ju you ming xian de zhuai lu yin zi te xing 。jin yi bu tong guo dui bu tong xie pai tiao jian xia PtrHoxllji yin zai mao guo yang gen 、jing 、xie zhong de biao da mo shi fen xi fa xian ,PtrHoxllji yin zai gen jing xie zhong de biao da dou you bu tong cheng du de gai bian ,biao ming gai ji yin ke neng can yu duo chong fei sheng wu xie pai xiang ying 。you ji shi yan xie pai xia ,gai ji yin zai mao guo yang gen jing xie zhong dou you jiao gao biao da liang 。wei jin yi bu le jie PtrHoxllji yin shi fou ju you nai yan gong neng ,gou jian le PtrHoxl ji yin guo biao da zai ti (pROKII-PtrHoxll)、yi zhi biao da zai ti (pFGC5941-PtrHoxll),jiang ji yu kong pROKIIzai ti shun shi zhuai hua dao mao guo yang zhong ,fen bie huo de guo biao da (OE)、yi zhi biao da (RNAi)ji dui zhao (CON)san chong zhi zhu 。fen xi bi jiao le san chong zhuai ji yin mao guo yang zhong NaClxie pai qian hou NBThe E vans Blueran se qing kuang ；ce liang le POD、SODmei huo xing ；ce ding le MDA、HO02、xie lu su he fu an suan han liang yi ji xiang dui dian dao lv deng sheng li zhi biao yi kuai su jian ding PtrHoxllji yin de nai yan gong neng 。jie guo xian shi ,san chong zhuai ji yin zhi zhu zhong ,guo biao da mao guo yang zhi zhu ti nei PODhe SODmei huo xing zui gao ,H202、MDAhan liang zui di ,xiang dui dian dao lv zui di ,xi bao mo shou dao de sun hai cheng du zui xiao ,wan zheng xing zui hao ;er yi zhi biao da ti nei PODhe SODhuo xing zui di ,H202he MDAhan liang zui gao ,xiang dui dian dao lv zui gao ,xi bao mo sun shang zui yan chong 。biao ming guo biao da PtrHoxllji yin ke neng hui di gao zhuai ji yin zhi zhu de nai yan neng li 。li yong nong gan jun jie dao tu jing huo de pROKII-PtrHoxllwen ding zhuai hua zhu ji 。bi jiao ye sheng xing he zhuai ji yin mao guo yang de sheng chang zhi biao ；guan cha yan xie pai xia guo biao da PtrHoxllji yin he ye sheng xing mao guo yang sheng chang zhuang kuang he qi kong cha yi :zhi zuo dan la qie pian ,guan cha zhuai ji yin he ye sheng xing mao guo yang ci sheng bi fa yo qing kuang 。jie guo xian shi ,zhuai ji yin mao guo yang zhu gao zeng jia 、xie pian mian ji bian da ,gen chang bian duan dan shu liang zeng jia ,ji shi shui lv di yu ye sheng xing mao guo yang ,zhe chong qing kuang de chu xian ke neng yu guo nong da zhi zhu guang jie chan wu ji lei liang zeng jia you guan 。yan le pai tiao jian xia ,yu ye sheng xing xiang bi ,guo biao da zhi zhu de sheng chang zhuang kuang ming xian you yu dui zhao (WT),qi kong kai ge du xian zhe jiang di ,biao ming mao guo yang ke neng tong guo PtrHoxllji yin de guo liang biao da jian shao qi kong de kai ge du ,jin er jian shao shui fen de sun shi ,di gao nai yan neng li 。dan la qie pian jie guo xian shi ,guo biao da PtrHoxllji yin zhi zhu mu zhi hua cheng du gao yu ye sheng xing ,PtrHoxllji yin ke neng can yu diao jie mao guo yang ci sheng bi de fa yo 。wei le jin yi bu le jie PtrHox-llji yin de zuo yong ji zhi ,fen xi ji diao kong de xia you ji yin he jie ge de shun shi zuo yong yuan jian 。li yong TF-Centered YlHji shu (yi zhuai lu yin zi wei zhong xin de jiao mu chan za jiao ji shu )yan jiu le PtrHoxl zhuai lu yin zi shi bie de shun shi zuo yong yuan jian ,bing tong guo jiao mu chan za jiao fang fa jin hang yan zheng 。jie guo xian shi ,mao guo yang PtrHoxllji yin ke yi te yi xing shi bie shun shi zuo yong yuan jian Y1“TAGATAC”,biao ming gai ji yin ke neng tong guo yu Y1jie ge ,cong er diao kong xia you ji yin de biao da 。
论文参考文献
论文详细介绍
论文作者分别是来自东北林业大学的李亚博，发表于刊物东北林业大学2019-11-18论文，是一篇关于毛果杨论文,盐胁迫论文,东北林业大学2019-11-18论文的文章。本文可供学术参考使用，各位学者可以免费参考阅读下载，文章观点不代表本站观点，资料来自东北林业大学2019-11-18论文网站，若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权，请联系我们删除。
标签：毛果杨论文; 盐胁迫论文; 东北林业大学2019-11-18论文;