发酵猪血菌株A32的筛选、鉴定及其产酶条件研究

论文摘要

目前我国饲料行业中饲料资源愈显不足，其中蛋白饲料资源缺乏的问题尤为突出。而我国作为生猪屠宰大国，大量的猪血蛋白资源由于其适口性不佳、较难消化和营养效价偏低等问题被严重浪费。为了充分开发利用猪血蛋白资源，大量生产优质饲料，本研究从自然条件下分离得到了降解猪血蛋白能力强的菌株，对其进行了鉴定和产酶条件研究，为发酵猪血生产猪血多肽奠定基础。主要结果如下： 首先从农村个体屠宰场取土壤，培养分离土壤中微生物，采用划线平板法选取单菌落在以猪血为唯一氮源的平板培养基上进行初筛，在干酪素培养基上进行复筛，并用菌株发酵猪血粉，最终确定菌株A32具有高效的猪血粉发酵能力，利用A32对猪血发酵，使其蛋白质含量下降了28.7％，氨基酸态氮含量上升了4.20倍，可溶性蛋白质含量上升了60％。 确定了A32为目的菌株后，采用形态学鉴定与16S rDNA鉴定相结合的手段，确定A32为枯草芽孢杆菌。 最后通过单因素试验以及正交试验确定了A32优化培养基研究了培养时间、摇瓶转速、接种量、温度对产酶的影响，获得优化培养基组成为：豆粕粉2％、玉米粉3％、0.4mmol／L Mn2+、Na2HPO4·12H2O 0.4％、KH2PO40.03％、Na2CO3 0.01％、pH 7.2；优化产酶条件为：培养时间48h、接种量3％、培养，摇瓶转速190r／min。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 缩写词表
• 第一章 文献综述及前言
• 1 猪血的利用现状
• 1.1 猪血的化学成分
• 1.2 猪血的利用方式
• 2 微生物蛋白酶的研究
• 2.1 微生物酶的优势
• 2.2 蛋白酶的来源
• 2.3 微生物蛋白酶
• 3 前言
• 3.1 研究的目的意义
• 3.2 研究内容
• 3.3 技术路线
• 第二章 发酵猪血优良菌株的筛选
• 1 材料与方法
• 1.1 菌株来源
• 1.2 培养基
• 1.3 主要仪器
• 1.4 主要试剂
• 1.5 试验方法
• 2 结果与分析
• 2.1 菌种的分离
• 2.2 菌种的初筛
• 2.3 菌株产蛋白酶活力
• 2.4 发酵猪血粉能力
• 3 结论
• 第三章 发酵猪血优良菌株 A32的鉴定
• 1 材料与方法
• 1.1 菌种来源
• 1.2 主要仪器
• 1.3 主要试剂
• 1.4 培养基
• 1.5 细菌形态特征鉴定
• 1.6 16S rDNA的鉴定
• 2 结果与分析
• 2.1 细菌形态特征
• 2.2 16S rDNA的 PCR扩增结果
• 2.3 序列分析
• 3 小结
• 第四章 A32产蛋白酶条件的优化
• 1 材料与方法
• 1.1 菌种
• 1.2 培养基
• 1.3 主要仪器
• 1.4 主要试剂
• 1.5 方法
• 2 结果与分析
• 32产酶的影响'>2.1 不同碳源对A₃₂产酶的影响
• 2.2 不同氮源对 A32产酶的影响
• 2.3 温度对A32产酶的影响
• 2.4 起始pH值对A32酶活力的影响
• 2.5 接种量对A32产酶的影响
• 2.6 摇瓶转速对 A32产酶的影响
• 2.7 培养时间对产酶的影响
• 2.8 不同金属离子对 A32产酶的影响
• 2.9 培养时间、温度、接种量正交试验结果
• 3 讨论与小结
• 3.1 关于碳和氮源对A32产酶的影响
• 3.2 关于温度、起始pH值和接种量对产酶的影响
• 3.3 关于金属离子对产酶的影响
• 3.4 小结
• 参考文献
• 致谢
• 作者简介
• 附录 A32测序报告单