论文摘要
目的: 从组蛋白乙酰化水平来研究二烯丙基二硫(diallyl disulfide, DADS)体内外诱导人急性髓性白血病HL-60细胞的分化,揭示DADS诱导HL-60细胞分化的分子机制,寻找治疗白血病的新途径。 方法: 1.DADS体外诱导HL-60细胞分化及对组蛋白乙酰化水平的影响:通过细胞形态观察、硝基蓝四氮唑(NBT)还原反应鉴定细胞分化:Western blot检测组蛋白H3、H4乙酰化水平及p21WAF1的表达。 2.白血病动物模型的建立与鉴定:SCID小鼠右下腹分别注入5×106个HL-60细胞,应用染色体核形分析及形态学观察等方法检测SCID小鼠外周血、肝、脾及骨髓中的白血病细胞。 3.DADS体内诱导SCID小鼠腹腔移植HL-60细胞分化及对组蛋白乙酰化水平的影响:分别收集DADS处理(A组)与未处理(B组)的HL-60细胞,以5×106个细胞注射到SCID小鼠腹腔,观察SCID小鼠成瘤情况。将B组成瘤SCID小鼠又随机分为3组,设空白对照组,SB阳性对照组,DADS处理组。处死后,检测用药前后瘤体积的变化,计算抑瘤率;HE染色观察用药前后HL-60细胞的形态改变:诱导分化率计算(油镜记数200个细胞);流式细胞仪检测移植瘤组织细胞的周期分布:毒性观察;Western blot检测瘤组织的组蛋白H3、H4
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