β-榄香烯诱导人胃癌BAC823细胞凋亡的实验研究及其对细胞信号转导因子P38MAPK的影响

论文题目: β-榄香烯诱导人胃癌BAC823细胞凋亡的实验研究及其对细胞信号转导因子P38MAPK的影响

论文类型: 硕士论文

论文专业: 中药学

作者: 王小晓

导师: 瞿延晖

关键词: 榄香烯,人胃癌细胞,细胞凋亡

文献来源: 湖南中医药大学

发表年度: 2005

论文摘要: 目的:1.探讨不同浓度β-榄香烯体外作用时对人胃癌细胞凋亡的影响。2.初步探讨β-榄香烯在诱导肿瘤细胞凋亡时对P38MAPK的影响,从而推测P38MAPK通路在β-榄香烯诱导肿瘤细胞凋亡过程中的调控作用。方法:采用人胃癌BAC823细胞株进行体外传代培养。整个实验过程分三批完成,每批细胞按空白对照组和药物处理组随机分组,其中药物处理组依药物浓度的不同再分为0.01mg/ml,0.02mg/ml,0.04mg/ml,0.08mg/ml,0.10mg/ml及0.16mg/ml处理组,作用时间为24h。1.第一批细胞采用MTT法检测β-榄香烯对癌细胞的增殖抑制作用。2.第二批细胞采用流式细胞光度分析术（FCM）检测细胞凋亡率及细胞周期时相分布,同时进行细胞的形态学观察。3.第三批细胞采用链霉亲和素-生物素-过氧化物酶技术（SABC）检测P38MAPK的磷酸化水平。结果:1.MTT法检测结果显示,药物浓度和细胞增殖抑制率间具有正相直线相关关系,（P＜0.01）体外作用24h时β-榄香烯对人胃癌细胞BAC823的IC50为0.078mg/ml。2.FCM检测及细胞形态学观察结果显示β-榄香烯可阻滞BAC823细胞于S期并使细胞凋亡,但细胞凋亡率与药物浓度并不成直线相关关系。作用时间为24h时其诱导人胃癌BAC823细胞发生凋亡的最佳浓度是在0.04～0.08mg/ml之间,超过此浓度则细胞坏死增多细胞凋亡率下降。3.SABC的检测结果显示与空白对照组比较,β-榄香烯可使P38MAPK的磷酸化水平提高,且随药物浓度的增加,P-P38MAPK的表达亦增强。（P＜0.01）结论:1.β-榄香烯对肿瘤细胞具有较强的增殖抑制作用,且随药物浓度的增加此抑制作用增强。2.β-榄香烯可诱导肿瘤细胞凋亡,且在一定浓度范围内,随药物浓度的增加细胞凋亡率升高,如作用浓度继续增大,药物的细胞毒作用增强,可使细胞坏死增多、细胞凋亡率下降。3.β-榄香烯可激活P38MAPK通路,而且此通路也很可能参与了β-榄香烯阻滞细胞周期诱导肿瘤细胞凋亡的过程。

论文目录:

中文摘要

英文摘要

前言

材料与方法

1.药物与主要试剂、仪器

1.1 药物

1.2 主要试剂及配置方法

1.3 主要仪器

1.4 其它器材

2.实验方法

2.1 细胞株

2.2 细胞培养

2.3 分组

3.指标检测

3.1 人胃癌BAC823细胞增殖抑制率的检测

3.2 人胃癌BAC823细胞调亡的形态学观察

3.3 人胃癌BAC823细胞凋亡率及细胞阻滞周期的检测

3.4 人胃癌BAC823细胞P-P38MAPK表达的检测

4.统计方法

结果与分析

1.β-榄香烯对BAC823细胞的增殖抑制作用

2.β-榄香烯对BAC823细胞凋亡的影响

2.1 细胞形态学观察结果

2.2 FCM检测结果

3.β-榄香烯对BAC823细胞P38MAPK磷酸化的影响

讨论

1.细胞凋亡及其在肿瘤发生、发展及治疗中的作用

1.1 细胞凋亡相关研究现状

1.2 细胞凋亡在肿瘤发生、发展及治疗中的作用

2.β-榄香烯的抗瘤作用机理

3.β-榄香烯诱导肿瘤细胞凋亡作用的讨论

3.1 β-榄香烯诱导肿瘤细胞凋亡的作用

3.2 β-榄香烯诱导肿瘤细胞凋亡作用机制的研究进展

4.p38MAPK通路与β-榄香烯诱导肿瘤细胞凋亡作用机制的关联性讨论

4.1 p38MAPK通路及其在细胞凋亡过程中的调控作用

4.1.1 MAPK信号转导通路及其生物学意义

4.1.2 p38MAPK通路参与调控细胞凋亡过程的研究现状

4.2 β-榄香烯在诱导肿瘤细胞凋亡过程对P38MAPK通路的影响

结论

致谢

参考文献

附图

发布时间: 2009-10-21

参考文献

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