进食和去势对大鼠空肠、胰腺促性腺激素释放激素及其受体表达影响的研究

论文摘要

研究表明促性腺激素释放激素（GnRH）类似物应用于前列腺癌患者行去势治疗时可导致患者出现糖代谢紊乱;我们先前的研究显示在与葡萄糖代谢密切相关的消化系统广泛存在GnRH及其受体,进食以及去势是否会影响肠道和胰腺合成分泌GnRH,后者是否会以自分泌或旁分泌的方式作用于肠道和胰腺GnRH受体（GnRH-R）,并通过影响、运动功能或调节其它肠道激素如:胰高血糖素、胰高血糖素样多肽-1（GLP-1）等的分泌而对葡萄糖代谢产生影响,这些问题的探讨有利于深入理解肠胰系统GnRH在糖代谢中的作用。第一部分手术去势和皮下注射GnRH类似物对大鼠空肠、胰腺GnRH及其受体表达的免疫组织化学定位目的:了解手术去势和皮下注射GnRH类似物12周对雄性SD大鼠空肠及胰腺GnRH及其受体免疫组织化学定位的影响,为进一步研究GnRH类似物在临床应用中出现的葡萄糖代谢紊乱的机制奠定基础。方法:采用免疫组织化学方法观察了手术去势和皮下注射GnRH类似物亮丙瑞林（100ug/Kg）12周后大鼠在灌葡萄糖（2 g/Kg）后3 h时GnRH及其受体蛋白的免疫组织化学定位。结果:1.免疫组织化学结果显示手术去势大鼠空肠、胰腺GnRH及其受体分布与正常大鼠相同。2.免疫组织化学结果显示皮下注射GnRH类似物组大鼠空肠、胰腺GnRH及其受体分布与正常大鼠相同。结论:手术去势和皮下注射GnRH类似物12周对大鼠空肠、胰腺GnRH及其受体分布可能无影响。第二部分灌服葡萄糖溶液后大鼠空肠和胰腺GnRH及其受体mRNA的表达目的:通过观察灌服葡萄糖溶液后不同时间点SD大鼠空肠和胰腺GnRH及其受体mRNA表达的变化,以期了解肠胰系统GnRH与糖代谢之间的关系。方法:采用实时荧光定量PCR方法,观察了SD大鼠灌服葡萄糖（2 g/Kg）0 min,15min,30min时空肠和胰腺的GnRH及其受体mRNA的表达。结果:1.与空腹组相比,灌服葡萄糖15min组和30min组大鼠空肠GnRH mRNA相对表达量降低（P<0.05）,而GnRH受体mRNA表达量在三组间无差异。2.与空腹组相比,灌服葡萄糖后15min组大鼠胰腺GnRH mRNA表达量降低（P<0.05）,灌服葡萄糖后30min时胰腺GnRH mRNA表达量与空腹组比较未见差异,同时GnRH受体在三组间无差异。结论:本研究首次对SD大鼠在灌葡萄糖（2g/Kg）后不同时间点的GnRH及其受体mRNA在肠道和胰腺表达的差异进行了比较,发现灌服葡萄糖早期大鼠空肠和胰腺GnRH mRNA相对表达量降低,说明空肠和胰腺的GnRH可能与葡萄糖代谢有关,其相关机制有待进一步研究。第三部分手术去势对大鼠空肠、胰腺GnRH及其受体mRNA表达的影响目的:了解手术去势12周后雄性SD大鼠空肠及胰腺GnRH及其受体表达的变化,为进一步研究GnRH类似物在临床应用中出现葡萄糖代谢紊乱的机制奠定基础。方法:采用实时荧光定量PCR方法,观察了手术去势12周对大鼠空肠和胰腺GnRH及其受体mRNA在灌服葡萄糖（2 g/Kg）3h时表达的影响。结果:去势大鼠空肠和胰腺GnRH、GnRH受体mRNA的相对表达量与对照组相比未见差异。结论:手术去势对大鼠灌服葡萄糖（2 g/Kg）3 h时GnRH及其受体mRNA在空肠、胰腺的表达无影响。第四部分皮下注射GnRH类似物对大鼠空肠、胰腺GnRH及其受体mRNA表达的影响目的:探讨皮下注射GnRH类似物亮丙瑞林（100ug/Kg）12周后大鼠空肠、胰腺GnRH及其受体、胰高血糖素原（PG）和GLP-1受体mRNA表达的变化,为深入研究GnRH类似物在临床应用中出现的葡萄糖代谢紊乱的机制奠定基础。方法:采用实时荧光定量PCR方法,研究了皮下注射GnRH类似物亮丙瑞林（100ug/Kg）12周后大鼠空肠及胰腺GnRH及其受体、胰高血糖素原和GLP-1受体mRNA在灌服葡萄糖（2 g/Kg）3 h时的表达差异。结果:1.与皮下注射生理盐水组大鼠相比较,皮下注射GnRH组在灌服葡萄糖（2g/Kg）前空腹血糖升高（P<0.05）,其余各时间点血糖相比较均未见差异,同时皮下注射GnRH类似物组的胰岛素水平在灌葡萄糖（2g/Kg）0h和0.5h时显著升高（P<0.05）,其余各时间点胰岛素水平未见差异。2.空肠和胰腺GnRH及其受体、胰高血糖素原（PG）和GLP-1受体mRNA表达量在两组间无差异。3.包括GnRH类似物注射组和对照组在内的所有大鼠的空肠GnRH mRNA表达量与胰高血糖素原mRNA的表达量呈正相关（r=0.959, P<0.01）。结论:皮下注射GnRH类似物12周使大鼠空腹血糖和胰岛素升高以及灌糖后早期胰岛素分泌增加,结合大鼠空肠GnRH mRNA表达量与胰高血糖素原mRNA的表达量呈正相关,提示GnRH类似物影响糖代谢的机制可能与肠胰系统的GnRH有关,其作用机制有待进一步研究。小结:本实验显示,灌服葡萄糖早期大鼠空肠和胰腺GnRH mRNA相对表达量下降;皮下注射GnRH12周使大鼠空腹血糖升高,同时使大鼠空腹和早期胰岛素分泌增加,但手术去势大鼠无此改变。结合皮下注射GnRH大鼠和正常大鼠中空肠GnRH mRNA表达量与胰高血糖素原mRNA的表达量呈正相关的证据,提示肠胰系统的GnRH可能与糖代谢有关,同时临床报道的GnRH类似物影响糖代谢的机制也可能与其有关,其作用机制有待进一步研究。

论文目录

• 缩略语表
• 中文摘要
• 英文摘要
• 前言
• 文献回顾
• 一、促性腺激素释放激素及其受体
• 二、GnRH类似物与糖代谢的关系
• 三、肠道与糖代谢的关系
• 三、去势对糖代谢的影响
• 正文
• 第一部分 手术去势和皮下注射GnRH类似物对大鼠空肠、胰腺GnRH及其受体免疫组织化学研究
• 1 材料
• 2 方法
• 3 结果
• 4 讨论
• 第二部分 灌服葡萄糖溶液对大鼠空肠、胰腺GnRH及其受体mRNA相对表达量的影响
• 1 材料
• 2 方法
• 3 结果
• 4 讨论
• 第三部分 手术去势对大鼠空肠、胰腺GnRH及其受体mRNA表达的影响
• 1 材料
• 2 方法
• 3 结果
• 4 讨论
• 第四部分 皮下注射GnRH类似物对大鼠胰腺、肠道GnRH及其受体mRNA表达的影响
• 1 材料
• 2 方法
• 3 结果
• 4 讨论
• 小结
• 参考文献
• 附录
• 个人简历和研究成果
• 致谢