千金藤素吸收机理研究

论文摘要

本课题的研究目的是考察千金藤素的口服吸收机理，为千金藤素的口服制剂选择、处方筛选、工艺优化、质量评价及临床应用提供依据。本课题以千金藤素为模型药物，建立了大鼠原位胃、肠灌注模型，大鼠肠襻法模型及整体动物模型，系统地研究了千金藤素在大鼠体内的吸收机理。实验包括四个部分：大鼠原位灌注实验、肠襻法实验、整体动物实验以及大鼠原位灌注实验与整体动物实验的相关性评价。采用大鼠原位灌注模型初步考察了千金藤素的吸收情况。建立了千金藤素在胃肠道灌注液中的HPLC分析测定方法。在体胃、肠灌注实验结果表明，给予不同剂量千金藤素后，大鼠胃内每小时平均吸收百分数分别为5．13％、5．99％、6．01％，在大鼠胃内有一定程度的吸收。不同剂量组全肠段每小时吸收百分率分别为18．89％、15．10％、14．32％，千金藤素在大鼠小肠内也有一定程度吸收。各肠段ka值从大到小的顺序为：回肠＞空肠＞十二指肠＞结肠，小肠中部是千金藤素的最佳吸收部位。为了进一步论证原位灌注实验的结果，揭示千金藤素在大鼠体内的吸收特征，进行了肠襻法实验。建立了千金藤素在大鼠血浆中的HPLC测定方法。实验结果表明，肠襻法给予大鼠千金藤素，千金藤素的符合二室模型，吸收过程为非线性动力学过程。整体动物实验考察了静脉注射与口服灌胃给药后，千金藤素的体内药动学过程。静脉注射千金藤素溶液后，各时间点血药浓度值经DAS软件分析拟合。结果显示，千金藤素为二室模型药物。灌胃给予千金藤素后，各时间点血药浓度值经DAS2．0软件分析拟合。结果显示，千金藤素为二室模型药物。千金藤素在大鼠体内的绝对生物利用度为1．02％。口服给药后血药浓度较低，生物利用度较低。研究工作用统计学的方法评价了各模型间的相关性，结果表明大鼠原位灌注模型与整体动物模型间有一定的定量相关性，但这种相关性在0．05的检验水平不显著。在体和体内的研究方法均可以作为研究千金藤素的吸收机理、预测药物吸收规律的有效辅助手段，两种研究方法结合应用，综合评价同一药物的体内过程可增加试验结果分析的合理性。本课题通过对千金藤素口服吸收机理的考察，为千金藤素的制剂选择、处方筛选、工艺优化、质量评价及临床应用提供依据；研究工作丰富了中药提取物的生物药剂学和药动学内容。在此基础上，为千金藤素在生物药剂学和药动力学理论指导下进行制剂处方工艺筛选和质量控制提供科学依据。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 前言
• 一、大鼠原位灌注模型研究千金藤素吸收机理
• 1 仪器、试药及动物
• 1.1 主要仪器
• 1.2 主要试药
• 2 实验方法与结果
• 2.1 大鼠原位灌注模型建立
• 2.1.1 实验原理
• 2.1.1.1 原位肠灌注实验法中参数计算
• 1/2)的计算'>2.1.1.1.1 吸收速率常数（ka）、吸收半衰期(t_1/2)的计算
• 2.1.1.1.2 单位时间吸收百分率（P%）计算
• 2.1.2 实验方法
• 2.1.2.1 原位胃灌注实验
• 2.1.2.2 原位肠灌注实验
• 2.2 酚红浓度测定
• 2.2.1 样品处理与测定
• 2.2.2 专属性试验
• 2.3 灌注液中CEPHPLC方法建立
• 2.3.1 胃灌注液中CEPHPLC方法建立
• 2.3.1.1 色谱条件
• 2.3.1.2 样品处理
• 2.3.1.3 专属性试验
• 2.3.1.4 系统适应性试验
• 2.3.1.5 标准曲线制备
• 2.3.1.6 回收率试验
• 2.3.1.7 精密度试验
• 2.3.1.8 稳定性试验
• 2.3.2 肠供试液中CEP HPLC法含量测定
• 2.3.2.1 色谱条件
• 2.3.2.2 样品处理
• 2.3.2.3 专属性试验
• 2.3.2.4 系统适应性试验
• 2.3.2.5 标准曲线的制备
• 2.3.2.6 回收率试验
• 2.3.2.7 精密度试验
• 2.3.2.8 稳定性试验
• 2.4 CEP原位胃灌注实验
• 2.4.1 胃灌注液的配制
• 2.4.2 胃壁对CEP物理吸附、代谢和摄取的考察
• 2.4.3 实验方法与结果
• 2.4.4 小结
• 2.5 CEP大鼠原位小肠吸收研究
• 2.5.1 稳定性试验
• 2.5.1.1 CEP肠循环液配制
• 2.5.1.2 CEP在空白肠循环液中稳定性的实验
• 2.5.2 肠壁对CEP物理吸附、代谢和摄取的考察
• 2.5.3 小结
• 2.6 CEP不同剂量组小肠吸收研究
• 2.6.1 供试循环溶液配制
• 2.6.2 实验方法与结果
• 2.6.3 统计分析
• 2.6.4 小结
• 2.7 CEP小肠最佳吸收部位考察
• 2.7.1 供试液的配制
• 2.7.2 实验方法及结果
• 2.7.3 统计分析
• 2.7.4 小结
• 3 小结与讨论
• 3.1 关于大鼠原位灌注模型的建立
• 3.2 千金藤素供试液配置问题讨论
• 3.2.1 稳定性讨论
• 3.2.2 溶解性讨论
• 3.3 关于千金藤素胃肠道吸收机理的讨论
• 二、肠襻法研究大鼠体内药动学过程
• 1 仪器、试药及动物
• 1.1 主要仪器
• 1.2 主要试药
• 1.3 实验动物
• 2 实验方法与结果
• 2.1 血浆中CEP浓度测定
• 2.1.1 色谱条件
• 2.1.2 血浆样品处理与测定
• 2.1.3 方法专属性试验
• 2.1.4 系统适应性试验
• 2.1.5 标准曲线制备
• 2.1.6 方法回收率试验
• 2.1.7 精密度试验
• 2.1.8 室温稳定性试验
• 2.1.9 冷冻稳定性试验
• 2.2 大鼠体内药动学研究
• 2.2.1 试药配制
• 2.2.2 实验方法
• 2.2.3 实验安排及结果
• 2.2.4 动力学参数计算
• 2.2.5 统计分析
• 2.2.6 小结
• 3 小结与讨论
• 3.1 关于实验结果的讨论
• 3.2 实验结果与在体肠灌注实验结果的比较
• 3.3 动物体内吸收的研究方法
• 三、静脉注射、口服千金藤素后大鼠体内药动学研究
• 1 仪器、试药及动物
• 1.1 主要仪器
• 1.2 主要试药
• 1.3 实验动物
• 2 静脉注射实验方法与结果
• 2.1 血浆中CEP浓度测定
• 2.1.1 色谱条件
• 2.1.2 血浆样品处理与测定
• 2.1.3 方法专属性考察
• 2.1.4 系统适应性试验
• 2.1.5 标准曲线制备
• 2.1.6 方法回收率考察
• 2.1.7 精密度试验
• 2.1.8 室温稳定性试验
• 2.1.9 冷冻稳定性试验
• 2.2 尾静脉注射给药大鼠体内药动力学过程研究
• 2.2.1 试药配制
• 2.2.2 实验方法与结果
• 2.2.3 药动学参数计算
• 2.2.4 统计分析
• 2.2.5 小结
• 3 大鼠口服给药体内动力学过程研究
• 3.1 试药配制
• 3.2 实验方法与结果
• 3.3 动力学参数计算
• 3.3.1 统计分析
• 3.4 小结
• 4 结论与讨论
• 4.1 关于CEP大鼠体内药动学过程
• 4.2 血样处理方法选择
• 4.1.1 沉淀剂的选择
• 4.1.2 处理方法的调整
• 四、原位灌注模型与整体动物试验相关性研究
• 1 原位灌注试验与整体动物试验相关性的统计结果
• 1.1 相关性分析原理
• 1.2 原位灌注试验与整体试验相关性的统计结果
• 2 小结与讨论
• 讨论与结论
• 1 实验结果
• 2 关于实验过程的讨论
• 3 处理方法及统计方法的讨论
• 参考文献
• 综述
• 参考文献
• 个人简历
• 致谢