IL-6对肥大细胞蛋白酶激活受体表达和细胞因子分泌的影响

论文摘要

目的:本实验以肥大细胞表面蛋白酶激活受体（PARs）表达,IL-4及IL-13分泌和IL-6诱导肥大细胞P815释放IL-4和IL-13潜在的信号通路为对象,就IL-6在过敏及炎症性疾病中的作用机制予以研究。方法:肥大细胞激发后,收集各时间点的细胞和上清。细胞处理后采用流式细胞术和实时定量PCR的方法在蛋白水平和mRNA水平检测PAR-1,PAR-2,PAR-3和PAR-4表达情况;用细胞激发信号ELISA方法检测信号转导通路蛋白Akt,ERK,p38和STAT3磷酸化情况;上清用ELISA方法检测IL-4和IL-13。结果:IL-6上调PAR-1,PAR-3,PAR-4 mRNA在肥大细胞P815上的表达;IL-6促进肥大细胞P815分泌IL-4和IL-13;IL-6下调PAR-1,PAR-3,PAR-4蛋白在肥大细胞P815上的表达。应用PD98059,U0126和LY294002可以阻断IL-6引起的肥大细胞IL-4分泌;LY294002和U0126可以阻断IL-6引起的肥大细胞IL-13分泌;PD98059,U0126和LY294002抑制IL-6引起的ERK和Akt磷酸化。结论:IL-6能够调节肥大细胞PARs表达并刺激肥大细胞分泌IL-4和IL-13并可能借此参与过敏及炎症反应。其诱导肥大细胞P815分泌IL-4和IL-13可能是通过Akt和ERK信号通路实现的。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 英文缩略语
• 第1章 前言
• 1.1 肥大细胞
• 1.2 蛋白酶激活受体
• 1.3 白细胞介素-6
• 1.4 白细胞介素-4
• 1.5 白细胞介素-13
• 1.6 立题依据
• 第2章 材料与方法
• 2.1 主要试剂和仪器
• 2.1.1 材料与主要试剂
• 2.1.2 主要仪器
• 2.2 实验方法
• 2.2.1 肥大细胞培养与激发
• 2.2.2 检测信号转导通路实验
• 2.2.3 酶联免疫吸附试验（enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA）检测 IL-4 和 IL-13 水平
• 2.2.4 实时定量聚合酶链式反应
• 2.2.5 流式细胞术分析
• 2.2.6 信号转导通路分析
• 2.3 统计学方法
• 第3章 结果
• 3.1 IL-6 对P815 细胞PARs 基因表达的调节作用
• 3.1.1 IL-6 对PAR-1 基因表达的调节作用
• 3.1.2 IL-6 对PAR-2 基因表达的调节作用
• 3.1.3 IL-6 对PAR-3 基因表达的调节作用
• 3.1.4 IL-6 对PAR-4 基因表达的调节作用
• 3.2 IL-6 对肥大细胞 PARs 蛋白表达的调节作用
• 3.2.1 IL-6 对PAR-1 蛋白表达的调节作用
• 3.2.2 IL-6 对PAR-2 蛋白表达的调节作用
• 3.2.3 IL-6 对PAR-3 蛋白表达的调节作用
• 3.2.4 IL-6 对PAR-4 蛋白表达的调节作用
• 3.3 IL-6 对肥大细胞分泌细胞因子的影响
• 3.3.1 IL-6 对P815 细胞IL-4 分泌的影响
• 3.3.2 IL-6 对P815 细胞IL-13 分泌的影响
• 3.4 PD98059, U0126, SB203580, LY294002 和 AG490 对 IL-6 引起的 P815 细胞 IL-4 分泌的影响
• 3.5 PD98059, U0126, SB203580, LY294002 和 AG490 对 IL-6 引起的 P815 细胞 IL-13 分泌的影响
• 3.6 PD98059, U0124,U0126, SB203580, LY294002 和 AG490 对IL-6 引起的ERK,p38,Akt和STAT3磷酸化的影响
• 3.6.1 PD98059 和 U0126 抑制 IL-6 引起的 ERK 磷酸化
• 3.6.2 LY294002 抑制 IL-6 引起的 Akt 磷酸化
• 3.6.3 SB203580 和 AG490 未能抑制 IL-6 引起的 p38 和 STAT3 磷酸化
• 第4章 讨论
• 4.1 IL-6对P815细胞PARs表达的调节作用
• 4.2 IL-6 对肥大细胞分泌细胞因子的影响及可能的信号通路
• 4.3 总结
• 第5章 结论
• 参考文献
• 综述
• 致谢
• 在读期间发表论文
• 简介