MTHFR基因多态性与急性淋巴白血病患者甲氨蝶呤化疗临床意义的研究

论文摘要

本文探讨了亚甲基四氢叶酸还原酶(（Methylenetetrahydrofolate reductase, MTHFR）基因多态性对急性淋巴细胞白血病（Acute lymphoblastic leukenia, ALL）患者大剂量甲氨蝶呤（HD-MTX）化疗疗效、血药浓度以及不良反应相关性的影响。第一部分为建立高效液相色谱法（RP-HPLC）测定人血浆MTX浓度的方法。血浆样品用6%高氯酸沉淀蛋白后,取上清液进行分析。色谱柱为：SinoChrom ODS-BP C18（4.6×200mm,5μm）；柱温为35℃；检测波长为303nm；流动相为乙腈-0.16mol·L-1乙酸钠水溶液（12：88）；流速lmL-min-1。在此色谱条件下,甲氨蝶呤浓度在0.05～100μg·mL-1呈良好的线性关系（r=0.9994）,回收率为75%以上,日内、日间RSD均<5%,检测限为0.01μg·mL-1。本方法简单,快速,灵敏,专属性强,适用于甲氨蝶呤血药浓度监测及其药物动力学研究。第二部分监测了急性淋巴细胞白血病（ALL）患者甲氨蝶呤的血药浓度并记录患者不良反应情况。监测21例ALL患者给药后Oh,24h,48h,72甲氨蝶呤血药浓度,并观察患者不良反应程度。结果显示,不同患者同一时间点血药浓度差异很大,患者不良反应主要表现为呕吐、口腔炎、腹泻、肝功能损伤、肾功能损伤以及骨髓抑制,且不良反应程度个体性差异很大。提示有必要进行血药浓度监测,避免经验用药造成严重的不良反应。第三部分研究了急性淋巴白血病（ALL）患者的亚甲基四氢叶酸还原酶基因多态性。抽取21例ALL患者外周血提取基因组DNA,采用PCR-PRLP技术对MTHFR C677T和A1298C两个多态位点进行基因分型,分析基因型和ALL患者HD-MTX化疗毒副反应的关系。结果表明ALL患者HD-MTX化疗后产生的毒副反应差异和MTHFR基因多态性密切相关。MTHFR 677TT基因型和1298AA基因型发生毒副反应的危险性显著增高。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 前言
• 第一章 高效液相色谱法测定人血浆甲氨蝶呤的浓度
• 1.1 实验材料
• 1.2 测定甲氨蝶呤血药浓度高效色谱法的建立
• 1.3 讨论
• 第二章 急性淋巴细胞白血病患者甲氨蝶呤的血药浓度监测以及不良反应
• 2.1 临床资料
• 2.2 甲氨蝶呤（MTX）血药浓度测定
• 2.3 急性淋巴白血病（ALL）患者化疗前后血液学指标及不良反应观察
• 2.4 结果
• 2.5 讨论
• 第三章 急性淋巴白血病（ALL）患者的亚甲基四氢叶酸还原酶基因多态性
• 3.1 实验材料
• 3.2 方法
• 3.3 结果
• 3.4 讨论
• 结论
• 参考文献
• 综述
• 参考文献
• 个人简介
• 致谢