γ辐照及模拟微重力效应对PC12等细胞损伤的研究

论文摘要

为了分析空间环境对哺乳动物细胞的损伤效应,本研究以永生化淋巴细胞、大鼠终末分化PC12细胞及外周血淋巴细胞为实验材料,通过γ60Co-射线辐照模拟空间辐射效应,利用回转器模拟空间持续存在的微重力效应,对永生化淋巴细胞及大鼠终末分化PC12细胞的微核率、微核细胞率、大鼠终末分化PC12细胞的有丝分裂指数及HPRT基因突变频率、外周血淋巴细胞的染色体脆性位点表达率进行了分析。经γ60Co-射线辐照及模拟微重力效应处理后,有丝分裂指数、微核率及微核细胞率均随着γ60Co-射线辐照剂量的增加而升高,显示较好的剂量效应关系,且大鼠终末分化PC12细胞的γ60Co-射线辐照复合模拟微重力效应组的微核率及微核细胞率、有丝分裂指数、HPRT基因突变频率均低于γ60 Co-射线辐照组,而永生化淋巴细胞的γ60Co-射线辐照模拟微重力效应组的微核率及微核细胞率高于γ60Co-射线辐照组。模拟微重力效应72小时后的人外周血淋巴细胞染色体脆性位点表达率明显高于地面对照组,显示较好的关系。结果表明γ60Co-射线辐照及模拟微重力效应均能造成哺乳动物细胞的损伤,使哺乳动物细胞增殖阻滞,染色体不稳定性增加。同时提示不同细胞系对模拟微重力效应的敏感程度不同,其机制还有待进一步研究。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第1章 绪论
• 1.1 空间环境对哺乳动物细胞的影响
• 1.1.1 空间辐射对哺乳动物细胞的影响
• 1.1.2 空间微重力对哺乳动物细胞的影响
• 1.2 微核检测技术及应用
• 1.2.1 微核检测技术
• 1.2.2 微核检测技术的应用
• 1.3 HPRT基因突变检测及研究进展
• 1.3.1 HPRT基因突变检测方法
• 1.3.2 HPRT基因突变研究进展
• 1.4 染色体脆性位点检测及应用
• 1.4.1 染色体脆性位点的分类
• 1.4.2 染色体脆性位点与疾病相关性研究
• 1.5 课题研究的目的及意义
• 1.5.1 研究的目的
• 1.5.2 研究的意义
• 1.6 课题研究的内容
• 第2章 实验材料和方法
• 2.1 实验材料
• 2.1.1 细胞系
• 2.1.2 主要试剂
• 2.1.3 常用缓冲液及其他溶液
• 2.1.4 哺乳动物细胞培养
• 2.1.5 主要仪器设备
• 2.1.6 主要软件
• 2.2 实验方法
• 2.2.1 实验材料的处理
• 2.2.2 细胞计数及细胞生长曲线的绘制
• 2.2.3 有丝分裂指数检测
• 2.2.4 微核检测
• 2.2.5 HPRT基因突变频率检测
• 2.2.6 染色体脆性位点表达率检测
• 2.3 本章小结
• 第3章 辐照及模拟微重力效应对细胞增殖的影响
• 3.1 PC12 细胞的生长曲线
• 3.2 PC12 细胞有丝分裂指数的检测
• 3.3 讨论
• 3.4 本章小结
• 第4章辐照及模拟微重力效应对PC12等细胞的损伤效应
• 4.1 辐照及模拟微重力效应对永生化淋巴细胞微核的影响
• 4.1.1 辐照及模拟微重力效应下微核的形态观察
• 4.1.2 累加辐照及模拟微重力效应下的微核率及微核细胞率
• 4.2 辐照及模拟微重力效应对PC12 细胞微核的影响
• 4.2.1 辐照及模拟微重力效应下微核的形态学观察
• 4.2.2 累加辐照及模拟微重力效应下的微核率及微核细胞率
• 4.2.3 单次辐照及模拟微重力效应下的微核率与微核细胞率
• 4.3 辐照及模拟微重力效应对PC12 细胞HPRT基因突变频率的影响
• 4.3.1 辐照及模拟微重力效应下的多核与双核形态学观察
• 4.3.2 辐照及模拟微重力效应下的HPRT基因突变频率
• 4.4 讨论
• 4.5 本章小结
• 第5章模拟微重力效应对染色体脆性位点表达率的影响
• 5.1 实验条件的优化
• 5.1.1 外周血淋巴细胞的培养及染色体标本的制备
• 5.1.2 秋水仙素使用浓度及作用时间的优化
• 5.1.3 低渗时间的优化
• 5.2 模拟微重力效应后染色体脆性位点的表达
• 5.3 讨论
• 5.4 本章小结
• 结论
• 参考文献
• 攻读学位期间发表的学术论文
• 致谢