水稻稻瘟病抗源的筛选与评价研究

论文摘要

由Magnaporthe grisea（Hebert）Barr引起的稻瘟病是世界性水稻病害,对世界粮食产量有着重要影响。实践证明,选育和种植抗病品种是控制该病害最经济有效的措施。开展稻瘟病持久抗源抗性特征的分析研究,将为持久抗病品种的选育提供依据,从而获得稳定持久的抗瘟性品种。本文对四川省农科院植保所保存的抗源材料的主要农艺性状进行调查,对其中重要抗源进行田间抗病性、抗谱测定,并利用分子标记技术对其进行遗传背景分析,为稻瘟病抗源的改造与利用及抗病育种提供参考。其结果如下:1从770份水稻抗源材料中选出80份抗性较好的抗源材料进行田间数据统计和室内拷种。并对这80份抗源的叶瘟、颈瘟病级调查结果结合农艺性状进行相关性分析。结果可见叶瘟、颈瘟病级与这六个农艺性状的相关性均不显著,相关系数均较低。这说明不能单单靠农艺性状来判断材料的抗病性强弱。2在不同生态区对选出的20份材料进行抗性调查,据结果可以看出20份抗源材料抗性差异不大,其中R710和R707的叶瘟、颈瘟发病相对于其它材料较轻,是抗性较好的抗源材料。3通过抗病频率测定,发现抗瘟丝苗1号、IR60937-40-3-1-3（89）的抗病频率达到了100%,91947-3的抗病频率达到94.87%,抗菌较宽。四川省农科院植保所于1982年育成的抗源姊妹系,谷梅1号、谷梅2号、谷梅3号、谷梅4号、谷梅5号的抗菌谱分别为92.31%、89.74%、84.62%、94.87%、89.74%。相关性分析得到叶、颈瘟与抗谱的均呈负相关,即叶、颈瘟病级越高抗菌谱越窄,叶、颈瘟病级越低抗菌谱越宽。4利用5对RGA引物,分别对20份抗源材料和17单基因系材料进行PCR扩增。聚类分析表明,在0.72的遗传相似水平,可以将其划分为6个宗谱,其中第Ⅲ宗谱为优势宗谱,有6份材料,所占比例为30.00%。通过单基因材料电泳图谱的分析,可看到在引物RGA2的图谱的600bp、150bp、400bp、320bp位上有特异性条带出现;引物RGA1电泳图上300bp左右有特异性带,将这5个特意带回收,重新扩增,从电泳图上可看到清晰条带。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第一章 文献综述
• 1.国内外抗病资源研究现状
• 1.1 持久抗病性概念与抗瘟性分类
• 1.2 抗源的发掘、筛选与利用研究进展
• 1.2.1 抗源的发掘
• 1.2.2 抗源的筛选与利用
• 1.3 水稻品种中的抗稻瘟病基因
• 2.抗瘟基因分子标记研究进展
• 2.1 遗传标记的定义及类型
• 2.1.1 遗传标记的定义
• 2.1.2 类型及特征
• 2.2 分子标记的种类、原理及方法
• 2.2.1 分子标记的种类
• 2.2.2 常见分子标记技术
• 2.3 稻瘟病抗病基因的定位与克隆
• 2.3.1 稻瘟病抗性基因的定位
• 2.3.2 稻瘟病抗病基因的克隆
• 3 抗病基因同源序列分析
• 第二章 抗源材料的筛选
• 1 材料与方法
• 1.1 供试材料
• 1.2 试验地点
• 1.3 试验设置
• 1.3.1 抗源材料的农艺性状及拷种
• 1.3.2 稻瘟病抗性鉴定病圃设置及鉴定方法
• 2 结果与分析
• 2.1 田间抗性及农艺性状调查结果
• 2.2 室内拷种结果
• 2.3 抗源叶瘟颈瘟调查结果分析
• 第三章 不同生态区的抗性调查
• 1 材料与方法
• 1.1 供试材料
• 1.2 试验地点
• 1.3 田间小区设置
• 1.3.1 稻瘟病抗性鉴定病圃设置及鉴定方法
• 1.4 稻瘟病调查
• 1.5 稻瘟病标样的采集
• 1.6 稻瘟病菌株分离培养
• 2 结果与分析
• 2.1 不同生态区叶瘟颈瘟抗性调查结果
• 3 结论
• 第四章 抗源材料的抗谱测定
• 1.材料与方法
• 1.1 供试材料
• 1.1.1 供试菌株
• 1.1.2 供试材料
• 1.2 方法
• 1.2.1 产孢培养
• 1.2.2 抗谱测定
• 2.结果与分析
• 2.1 供试材料抗病频率
• 2.2 抗菌谱与叶瘟颈瘟的相互关系
• 第五章 不同抗性水稻材料抗性遗传背景分析
• 1 材料与方法
• 1.1 供试材料
• 1.1.1 供试品种
• 1.1.2 供试试剂
• 1.1.3 所用仪器
• 1.1.4 供试引物
• 1.2 方法
• 1.2.1 水稻叶片的采集
• 1.2.2 叶片DNA的提取
• 1.2.3 DNA浓度及纯度检测
• 1.2.4 PCR扩增
• 1.2.5 聚丙酰胺凝胶电泳
• 1.2.6 多态性片段的回收、重扩增
• 1.2.7 数据处理
• 2 结果与分析
• 2.1 水稻DNA浓度及纯度检测
• 2.2 供试材料对RGA体系PCR扩增产物的丙烯酰胺凝胶电泳结果
• 2.2.1 20份抗源材料的电泳结果
• 2.2.2 17份单基因材料的电泳结果
• 2.3 RGA相似性聚类
• 2.4 多态性片段的回收、重扩增结果
• 2.5 抗病基因多态性与抗病鉴定结果的相互关系
• 3 结论
• 第六章 讨论
• 1 抗源材料田间抗性及农艺形状测定
• 1.1 农艺性状调查
• 1.2 田间抗性鉴定
• 2 抗源材料的抗谱测定
• 3 不同抗性水稻材料抗性遗传背景分析
• 4 进一步要开展的工作
• 4.1 进行抗源的选择利用
• 4.2 在分子水平上鉴定抗病资源
• 参考文献
• 致谢
• 攻读学位期间发表的学术论文目录
• 附录