论文摘要
热应激是影响鸡生产性能的重要应激因子，提高鸡的耐热性能是热带地区和我国南方地区育种目标之一。本研究以体重相近（1.65±0.13kg）的Anak40混合家系母鸡（n=55）为试验材料，61-65日龄置于24-28℃、RH50%的环境进行预饲，66日龄室温快速提升至（35±1）℃，并以此时作为热应激起始（0h）。0、6、18、30、42、54和66h时测定每只母鸡的直肠温度。66h时快速升温至（41±1）℃，记录每只母鸡热死亡时间（HSST）和热致死温度（LRT）。各时间点直肠温度和热致死温度与起始直肠温度的差值分别记为△Tn（△T6、△T18、△T30、△T42、△T54、△T66）和△TT。结果表明，HSST与△T18和△TT均呈显著负相关（r△△T18=-0.277，r△TT=-0.314；P<0.05），而与T30、△T42和△T54均呈极显著负相关（r△T30=-0.362，r△T42=-0.385，r△T54=-0.559；P<0.01）。同时，△T18较小（平均数-1/2标准差）的母鸡的HSST（256.0±208.4min）显著（P<0.05）高于大于△T18较大（平均数+1/2标准差）的母鸡（123.7±78.3min）。因此，△T18作为鸡耐热力的评价指标是可行的。从60日龄的Anak40同胞家系中随机选择12只母鸡，分为三组（G1，G2，G3），每组4只，同一鸡舍饲养，环境温度（25±1）℃。G1组作为对照组，G2组为（35±1）℃热应激24h，G3组为热应激24h后恢复至对照组温度并持续24h。分别取肝脏组织，提取12个样本的RNA并进行芯片杂交，获得12张44K的安捷伦全基因组表达谱芯片。结果表明，有235条基因表达发生2倍以上变化。对这些基因进行基因本体（geneontology）信息生理功能（biological process）分类，共分为16类。其中14条基因与DNA代谢有关（DNA metabolic process，6； DNA replication，5； transcription,DNA-dependent，3），8条基因与刺激应答相关（response to monosaccharide stimulus，2；response to glucose stimulus，2；response to carbohydrate stimulus，2；response tohexose stimulus，2），7条基因与代谢相关（monosaccharide metabolic process，4；fattyacid metabolic process，3），5条基因与生物合成相关（RNA biosynthetic process，3；regulation of receptor biosynthetic process，2），6条修正基因（histone modification，3；covalent chromatin modification，3），其他基因9条（chromosome organization，5；histoneH3acetylation，2；organelle fusion，2）。去掉重复基因，共有16条。KEGG Pathway分析可将差异表达基因分为4类：Galactose metabolism、Glycolysis/Gluconeogenesis、Pyruvate metabolism、Glycerolipid metabolism，共8条基因。HSP基因家族中，只有HSP60表达量发生2倍以上的表达（2.35，P<0.05）。综上，本研究获得一个鸡耐热性的评价指标，锁定鸡耐热性相关的候选基因23条，为进一步研究热应激遗传机制及分子标记奠定基础。