柴胡即型凝胶鼻腔喷雾剂的研制

论文摘要

柴胡（Radix Bupleuri）为伞形科柴胡属植物的根或全草,临床用于治疗上呼吸道感染、肺炎、流感等多种发热症,是一疗效较好的解表退热药。即型凝胶（insitu gel）是指以溶液状态制备和给药,使用后因给药部位的生理环境改变而发生相转变,形成凝胶状半固体的制剂。由于其兼备溶液剂与凝胶剂的优点,在药物载体研究领域有广阔的应用前景。本文将柴胡制备成具有环境敏感特性的鼻用即型凝胶制剂,并对其处方组成、制备工艺、鼻腔刺激性、药效学等方面进行了较为全面的研究和考察。本文第一部分选择泊洛沙姆407（Poloxamer407,P407）作为温敏型即型凝胶剂的凝胶材料。评价了不同浓度的P407溶液成凝性质与温度的关系,并且通过加入PEG4000来调节P407的胶凝温度。结果表明20%P407,6%PEG4000溶液在30℃下呈现反相凝胶的性质,略低于鼻腔内温度,适合鼻腔给药。流变学结果表明,P407溶液的粘度随剪切速率的增大呈明显下降趋势,为假塑性流体特征;溶蚀实验表明,凝胶在体内的溶蚀受接触面积、纤毛运动频率、鼻腔中酶的含量以及是否处于病理状态等条件的影响;为了考察P407凝胶基质的安全性,采用蟾蜍上颚粘膜纤毛毒性考察方法,结果显示,凝胶基质对纤毛影响较小,纤毛持续运动时间与生理盐水组相近。第二部分制备了温敏型柴胡即型凝胶鼻腔喷雾剂,并对其质量进行评价。采用水蒸汽蒸馏技术对柴胡挥发油进行提取浓缩;以澄明度与纤毛毒性为评价指标,采用正交实验筛选了复合增溶剂的组成及对挥发油的增溶作用,结果表明10%Pharmasolve,2%Tween-80对挥发油增溶效果显著,并且对鼻纤毛的毒性较小;建立了紫外分光光度法测定样品中挥发油含量,通过体外释放实验表明,即型凝胶制剂释药缓慢,药物随着凝胶的溶蚀而释放,达到持续释药的目的;以挥发油中正己酸的含量为评价指标,建立气相色谱法,对制剂的质量进行评价;通过长期实验表明,制剂稳定性良好。第三部分考察了适合鼻腔给药的pH敏感即型凝胶基质,并制备了pH敏感型柴胡即型凝胶鼻腔喷雾剂。采用Carbopol 940作为pH敏感即型凝胶材料,HPMC E50调节凝胶强度,结果发现,制剂pH达到鼻腔内环境pH时,粘度显著升高;对鼻腔的缓冲能力进行考察,结果发现0.05mol/L的磷酸盐缓冲溶液与鼻腔内缓冲能力相当;对凝胶基质持水能力、流变学考察发现,制剂适合鼻腔给药。第四部分通过建立松节油致家兔发热模型,评价了两种即型凝胶制剂的药效,结果表明溶液剂组给药后5h可达到最佳退热效果,但其退热持续时间仅为6h左右。两即型凝胶剂组与溶液剂组相比,前5h药效作用相近,但持续时间可延长至24h。说明即型凝胶剂的确能延长药物在家兔鼻腔中的滞留时间,药效持续时间明显长于普通溶液剂;建立家兔鼻炎模型,考察鼻腔病理状态下药效,结果发现,病理状态下的退热效果低于正常状态;通过组织学切片及纤毛毒性实验对制剂的安全性进行评价,结果表明给予即型凝胶制剂后,鼻腔组织未见明显红肿,充血等现象,纤毛运动时间为生理盐水组的80%以上,说明制剂安全性良好。第五部分建立了家兔脑脊液连续采集法,采用放射免疫法检测脑脊液中cAMP浓度。结果发现,脑脊液中cAMP浓度和大肠杆菌内毒素（ET）致热家兔体温升高呈正相关（r=0.9435,P＜0.05）,给予ET家兔温敏型即型凝胶剂6h后,脑脊液中cAMP含量显著低于溶液喷雾剂组,证实温敏型柴胡即型凝胶鼻腔喷雾剂在鼻腔中滞留时间比溶液喷雾剂长,能够更加有效地降低脑内cAMP浓度,发挥更好的中枢退热作用。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 前言
• 第一部分 温敏型即型凝胶基质的性质及评价
• 1 试剂与仪器
• 1.1 试剂
• 1.2 仪器
• 1.3 实验动物
• 2 方法与结果
• 2.1 人工鼻液的制备
• 2.2 即型凝胶基质的选择
• 2.3 凝胶持水能力的测定
• 2.4 凝胶流变学性质考察
• 2.5 胶凝温度的调节
• 2.6 凝胶的溶蚀实验
• 2.7 凝胶基质的安全性评价
• 3 讨论
• 4 小结
• 第二部分 温敏型柴胡即型凝胶鼻腔喷雾剂的制备及质量评价
• 1 试剂与仪器
• 1.1 试剂
• 1.2 仪器
• 2 方法与结果
• 2.1 柴胡药材的外观鉴定
• 2.2 挥发油的提取浓缩
• 2.3 柴胡制剂剂量的确定
• 2.4 温敏型柴胡即型凝胶鼻腔喷雾剂的处方设计
• 2.5 释药性能考察
• 2.6 温敏型柴胡即型凝胶鼻腔喷雾剂的质量评价
• 2.7 初步稳定性实验
• 3 讨论
• 4 小结
• 第三部分 pH敏感型柴胡即型凝胶鼻腔喷雾剂的制备及质量评价
• 1 试剂与仪器
• 1.1 试剂
• 1.2 仪器
• 1.3 实验动物
• 2 方法与结果
• 2.1 鼻粘液pH及缓冲能力考察
• 2.2 即型凝胶基质的选择
• 2.3 离子强度对Carbopol 940凝胶的影响
• 2.4 凝胶持水能力的测定
• 2.5 凝胶流变学性质考察
• 3 pH敏感型柴胡即型凝胶鼻腔喷雾剂的制备及质量评价
• 3.1 pH敏感型即型凝胶处方
• 3.2 制备工艺
• 3.3 释药性能考察
• 3.4 pH敏感型柴胡即型凝胶鼻腔喷雾剂的质量评价
• 4 讨论
• 5 小节
• 第四部分 柴胡即型凝胶鼻腔喷雾剂的药效及毒性实验
• 1 试剂与仪器
• 1.1 试剂
• 1.2 仪器
• 1.3 实验动物
• 2 方法与结果
• 2.1 药物溶液配制
• 2.2 模型的建立
• 2.3 动物分组及给药方案
• 2.4 评价指标
• 2.5 统计学分析
• 2.6 实验结果
• 3 病理状态下的药效学实验
• 3.1 鼻炎模型建立
• 3.2 动物分组及给药方案
• 3.3 实验结果
• 4. 毒性评价
• 4.1 局部刺激性实验
• 4.2 对蟾蜍上颚粘膜纤毛运动的影响
• 5 三种柴胡即型凝胶鼻腔喷雾剂比较
• 6 讨论
• 7 小结
• 第五部分 柴胡对发热家兔脑脊液cAMP水平的影响
• 1 试剂与仪器
• 1.1 试剂
• 1.2 仪器
• 1.3 实验动物
• 2 方法与结果
• 2.1 药物溶液的配制
• 2.2 大肠杆菌内毒素致家兔发热模型的建立
• 2.3 动物分组及给药方案
• 2.4 家兔连续采集脑脊液法
• 2.5 脑脊液样品处理
• 2.6 脑脊液样品的cAMP测定
• 2.7 统计学分析
• 2.8 方法学考察
• 2.9 实验结果及分析
• 3 讨论
• 4 小结
• 全文总结
• 参考文献
• 综述
• 攻读硕士学位期间发表论文情况
• 致谢