温胆汤改良方含药脑脊液对Alzheimer病细胞模型作用的实验研究

论文摘要

本文从中医经典古籍入手，对历代重要医籍有关痴呆的文献进行了整理研究，从病名沿革、病因病机和防治方药等方面梳理其学术发展脉络，并重点阐述了老年性痴呆与痰邪致病之间的关系，提出了“以肾虚为主的五脏虚衰是老年性痴呆发生的内在机理，痰邪致病是老年性痴呆发病的关键所在”的痴呆发病观，并由此提出了补肾填精，化痰开窍的痴呆治疗法则。同时论述了以治痰良方温胆汤为基础的温胆汤改良方补肾填精，益髓充脑，祛痰化浊，开窍益智的作用原理。研究内容： 本课题初步探讨在可溶性Aβ25-35片断诱导的NG108-15细胞建立的AD模型，运用脑脊液药理学的方法，观察温胆汤改良方含药脑脊液及含药血清对AD细胞模型凋亡及凋亡相关蛋白bc1-2、bax表达的影响。进一步分析温胆汤改良方对老年性痴呆的可能作用机理。 方法： 以预先“老化”处理的5μmol／L的Aβ25-35片断诱导NG108-15细胞建立AD细胞模趔，实验分空白组、模型组、空白脑脊液组、含药脑脊液组、空白血清组、含药血清组。以温胆汤改良方含药脑脊液和含药血清分别作用于各组NG108-15细胞，倒置相差显微镜下观察细胞形态及其生长状况并摄片：MTT法检测细胞活性：流式细胞术检测细胞凋亡：SABC免疫组化检测凋亡相关蛋白bc1-2、bax的表达。 结果： 1．对细胞形态的影响 细胞在无Ap25-35的空白组生长背景清晰，细胞增长良好。在AB蛋白片断神经毒性作用下，其余各组细胞生长背景不良，可见若干死亡细胞和细胞碎片漂浮，NG108-15细胞数目明显减少，多积聚成簇状，大部分神经元胞体缩小，胞浆较暗淡，有斑点，有较多细胞脱壁漂浮现象，有突起伸出的神经细胞明显减少。与空白组比较，其余各组有突起细胞比率减少（19＜0.05）：含药血清组和含药脑脊液组与模型组比较，细胞突起率均增加，其差异有显著性（p＜0.05）。 2．对细胞活性的影响 MTT法检测细胞存活率，与空白组比较，模型组、空白血清组及空白脑脊液组OD值降低（0＜0.05）；含药血清组和含药脑脊液组OD值高于模型组（17＜0.05）；含药脑脊液组比较于含药血清组，其OD值有升高趋势，但无统计学意义（0＞0.05）。 3．对细胞凋亡的影响 与空白组比较，有Aβ25-35作用的各组，其细胞凋亡率均升高，其中除含药脑脊液组外，其余各组有极显著性升高（p＜0.01）；与模型组比较，含药脑脊液和含药血清组细胞凋亡率均减少（p＜0.01），且含药脑脊液组神经元凋亡率小于含药血清组（p＜0.05）。 4．对凋亡相关基因Bc1-2、Bax蛋白表达的影响 与空白组比较，有Aβ25-35作用的各组Bc1-2表达下降，而Bax的表达升高（p＜0.05）；与模型组比较，各血清组和脑脊液组神经元Bc1-2阳性表达数无显著

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 英文缩略词表
• 前言
• 材料和方法
• 结果
• 讨论
• 1 关于AB片断诱导的AD细胞模型
• 2 关于脑脊液药理学和血清药理学
• 3 温胆汤改良方对AD细胞模型凋亡的影响
• 4 温胆汤改良方对AD细胞模型bc1-2、bax蛋白表达的调节作用
• 5 从温胆汤及温胆汤改良方的临床应用探讨老年性痴呆与痰邪的关系
• 参考文献
• 综述
• 致谢
• 附图 1
• 附图 2
• 附图 3