用蛋白质组学方法探索前列腺癌分子生物标记物

论文摘要

目的检测α-甲基酰基辅酶A消旋酶（α-methylacyl-CoAracemase,AMACR）在前列腺组织中的表达,探索前列腺癌诊断的新方法。方法前列腺针刺标本108个,用AMACR抗体作免疫组化染色。同时,随机抽取其中的24例病例,每个病例抽取1个针刺标本,用Western blot方法检测AMACR在前列腺癌中的表达,与病理诊断相比较。结果用免疫组化染色的方法检测AMACR在前列腺癌中的表达,与病理诊断结果相比较,在61例良性标本中,阴性59例,假阳性2例,符合率为96.7%。在44例腺癌中,阳性41例,漏诊3例,符合率为93.2%,总符合率为92.6%。前列腺小细胞癌1例,表达阳性,转移癌1例,表达阴性,高级别前列腺上皮内瘤（high grade prostatic intraepithelialneoplasia,HPIN）1例,表达为弱阳性。用Western blot方法检测,与病理诊断结果相比较,符合率为87.5%。在14例良性标本中,阴性14例,假阳性为0,符合率100%。10例癌症标本中,阳性7例,漏诊3例,符合率70%。Westernblot结果可见,免疫杂交条带清晰,阴性与阳性的区别明确。用免疫组化法检测AMACR在前列腺癌中的表达,可以显示微小癌灶。结论AMACR是前列腺癌诊断有用的新指标,具有广阔的应用前景。用AMACR结合Western blot,对于前列腺癌的诊断,有一定的临床意义,值得进一步研究。目前前列腺癌（PCa）的主要检测手段是测定血清前列腺特异性抗原（PSA）的浓度,但PCa最终的诊断结果是由前列腺穿刺活检（PNBX）标本的指标所决定的。为了确定PNBX标本的蛋白质组学特性,寻找新的PCa生物标记,我们对PCa病人及前列腺增生（BPH）病人的PNBX标本进行了蛋白质组学的比较研究。二维电泳（2-DE）结果显示,在PCa和BPH两个群体之间约有52个蛋白的表达量发生了较为明显的变化。通过基质辅助激光解吸电离飞行质谱与质谱（MALDI-TOF-MS/MS）连用的方法,我们对差异性显著的点进行了鉴定,发现差异最显著的两组蛋白分别是雄激素受体（AR）调控元件FLNA（7-15）和FKBP4蛋白以及线粒体β脂肪酸氧化酶DCI和ECHS1。另外,PCa患者的样品中过氧化物酶的一个亚型表达失调,热休克蛋白HSP27和HSP70.1存在不同的翻译后修饰亚型。通过免疫印迹实验,确定了两类组织中FLNA（7-15）、FKBP4和PRDX4蛋白的表达差异。结果表明:对于绘制PNBX标本较为完整的蛋白表达谱这一问题,蛋白质组学的研究方法是非常有用的;通过分析蛋白的表达差异情况,可能发现PCa诊断和治疗的新的分子标记。

论文目录

• 名词缩写
• 第一部分 免疫印迹法检测前列腺穿刺活检标本中的AMACR
• 摘要
• ABSTRACT
• 前言
• 材料与方法
• 结果
• 讨论
• 参考文献
• 综述
• 参考文献
• 第二部分 前列腺穿刺活检标本的蛋白质组学分析
• 摘要
• ABSTRACT
• 前言
• 材料与方法
• 结果
• 讨论
• 参考文献
• 致谢