论文摘要
目的:研究嗅鞘细胞（Olfactory ensheathing Cells,OECs）移植联合应用大剂量甲基强的松龙对急性脊髓损伤大鼠神经功能恢复及Nogo-A表达的影响。并对其相关机制进行探讨。方法:采用改良Nash法分离、原代纯化培养大鼠嗅球嗅鞘细胞;雌性SD大鼠126只,随机分成空白对照组（normal组,n=6）、假手术组（sham组,n=24）、损伤对照组（Spinal Cord Injury ,SCI组n=24）、嗅鞘细胞移植组（OECs组,n=24）、甲基强的松龙注射组（MP组,n=24）以及联合干预组（OECs+MP组,n=24）共6组;参照改良Allen’s打击法,建立急性挫伤型大鼠脊髓损伤模型,OECs组、OECs+MP组于脊髓损伤后即刻进行嗅鞘细胞原位移植,所注射的嗅鞘细胞在移植前进行DAPI标记;MP组则经尾静脉注射大剂量甲基强的松龙,持续24小时;OECs+MP组在嗅鞘细胞移植的同期经尾静脉注射与MP组同等剂量的甲基强的松龙,术后1d、3d、7d、14d,参照BBB法进行各组神经功能检测,之后处死动物取材,荧光显微镜下观察嗅鞘细胞的存活情况,并行免疫组织化学法及半定量RT-PCR法检测Nogo-A表达的变化。结果:OECs组、OECs+MP组不同时间点脊髓损伤区周边白质均观察到DAPI染色的阳性细胞;SCI + OECs组和SCI + MP组在7d、14d BBB神经功能评分要优于损伤对照组（P<0.05）,但低于SCI + OECs+MP组（P<0.05）;SCI + OECs组和SCI + MP组之间的神经功能评分在各个时间点差异均无显著性（P>0.1）;SCI后1d、3d,各组间神经功能行为学评分无显著性差异（P>0.05）;免疫组化和RT-PCR法显示:SCI后3d、7d、14d, SCI + OECs组和SCI + MP组Nogo-A的表达量与SCI组相比,均呈明显下调（P<0.01）;但其下调Nogo-A效应低于SCI + OECs+MP组（P<0.01）。结论:⑴嗅鞘细胞移植联合应用大剂量甲基强的松龙可明显改善大鼠急性脊髓损伤后神经功能恢复,其机制部分与下调Nogo-A表达有关;⑵嗅鞘细胞移植与甲基强的松龙联合应用在促进SCI后神经功能恢复方面要优于单独使用OECs或MP,这提示二者之间可能存在协同效应。
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