紫甘薯叶活性物质提取及黄酮护肝作用研究

论文摘要

紫甘薯是旋花科草本植物,因富含花青素、薯肉紫红而闻名,含有多种具有生物活性的化学物质,紫甘薯叶中蛋白质、黄酮、多糖含量较高,活性多样,具有良好的应用前景。（1）进行系统组分预实验,测定样品中主要营养素的含量,确定提取路线：首先热水浸提蛋白质,过滤得滤渣;其次用乙醇溶液提取滤渣中的黄酮,过滤得滤渣；最后用水提取滤渣中的多糖。（2）通过单因素实验和中心组合实验得出蛋白质提取的最佳条件：液固比70mL/g,超声功率390W,时间21min,温度20℃,提取1次,得率为3.97%。（3）通过单因素实验和中心组合实验得出黄酮提取的最佳条件：乙醇浓度85%,液固比51mL/g,超声功率410W,时间20min,温度33℃,提取1次,得率为3.19%。采用AB-8大孔树脂纯化黄酮的最优工艺条件为：原液浓度0.9mg/mL,原液流速2BV/h,原液pH=4.0,淋洗剂为pH4.0的蒸馏水,洗脱剂为70%乙醇,洗脱流速为1BV/h,洗脱剂用量为3BV,纯化后黄酮的纯度可达72.3%。通过HPLC-MS和HPLC分析,判断紫甘薯叶黄酮水解样中可能含有芦丁、槲皮素、山奈酚、木犀草索和异鼠李素这五种黄酮类物质。（4）通过单因素实验和中心组合实验得出多糖提取的最佳条件：液固比80mL/g,功率395W,时间30min,温度69℃,提取1次,得率为3.66%。比较了活性炭和大孔吸附树脂脱色的效果,得到脱色的最佳工艺条件：OU-1树脂脱色,溶液pH=4.0,常温。（5）通过动物实验可知,紫甘薯叶总黄酮能够降低CCl4致慢性肝损伤小鼠的肝脏指数;降低小鼠血清中谷丙转氨酶和谷草转氨酶的活性,升高血清中白蛋白和总蛋白的含量；升高小鼠肝匀浆中超氧化物歧化酶的活性,降低肝匀浆中丙二醛的含量。每日摄入50mg/mL的黄酮溶液即能显著保护慢性肝损伤小鼠的肝脏。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 1 前言
• 1.1 紫甘薯简介
• 1.2 甘薯叶活性物质的化学成分
• 1.2.1 蛋白质
• 1.2.2 多糖类化合物
• 1.2.3 黄酮类化合物
• 1.2.4 维生素和矿物质
• 1.2.5 类胡萝卜素
• 1.2.6 其它物质
• 1.3 植物类化合物主要提取方法
• 1.3.1 热水浸提法
• 1.3.2 碱提酸沉法
• 1.3.3 有机溶剂法
• 1.3.4 酶法
• 1.3.5 超声波辅助法
• 1.3.6 微波辅助法
• 1.4 蛋白质的沉淀及含量测定
• 1.4.1 蛋白质的沉淀
• 1.4.2 蛋白质的含量测定
• 1.5 黄酮类化合物的研究概况
• 1.5.1 黄酮类化合物的结构和分类
• 1.5.2 黄酮类化合物的生物活性
• 1.5.3 黄酮类化合物的分离纯化
• 1.5.4 黄酮类化合物的分析检测
• 1.6 多糖的研究概况
• 1.6.1 多糖的生物活性
• 1.6.2 多糖的分离纯化
• 1.6.3 多糖的含量测定
• 1.7 本实验的研究目的、意义及主要内容
• 1.7.1 研究的目的及意义
• 1.7.2 研究的主要内容
• 2 材料与方法
• 2.1 实验材料
• 2.2 主要仪器
• 2.3 主要试剂
• 2.4 样品预处理
• 2.5 系统组分预实验
• 2.5.1 样品提取液的制备
• 2.5.2 各种成分的定性检测
• 2.5.3 营养素的测定
• 2.6 实验工艺流程图
• 2.7 PrPSPL的提取工艺研究
• 2.7.1 定量分析方法
• 2.7.2 绘制标准曲线
• 2.7.3 样品PrPSPL含量的测定
• 2.7.4 PrPSPL提取的单因素实验
• 2.7.5 响应面分析实验优化PrPSPL提取工艺
• 2.7.6 重现性实验
• 2.7.7 稳定性实验
• 2.7.8 精密度实验
• 2.7.9 加标回收实验
• 2.8 PrPSPL的沉淀方法及纯度
• 2.8.1 IE 法
• 2.8.2 盐析法
• 2.8.3 IE 法沉淀PrPSPL后,溶液中FPSPL和PPSPL的分离
• 2.8.4 PrPSPL的纯度
• 2.9 FPSPL 的提取工艺研究
• 2.9.1 定量分析方法
• 2.9.2 绘制标准曲线
• 2.9.3 样品FPSPL含量的测定
• 2.9.4 FPSPL提取的单因素实验
• 2.9.5 响应面分析实验优化FPSPL提取工艺
• 2.9.6 重现性实验
• 2.9.7 稳定性实验
• 2.9.8 精密度实验
• 2.9.9 加标回收实验
• 2.10 FPSPL化合物的纯化工艺及构成研究
• 2.10.1 大孔吸附树脂的静态筛选
• 2.10.2 AB-8大孔吸附树脂对FPSPL的动态吸附实验
• 2.10.3 AB-8大孔吸附树脂对FPSPL的动态洗脱实验
• 2.10.4 AB-8大孔吸附树脂的预处理与再生
• 2.10.5 FPSPL的纯度
• 2.10.6 FPSPL的构成研究
• 2.11 PPSPL的提取工艺研究
• 2.11.1 定量分析方法
• 2.11.2 绘制标准曲线
• 2.11.3 样品PPSPL含量的测定
• 2.11.4 PPSPL提取的单因素实验
• 2.11.5 响应面分析实验优化PPSPL的提取工艺
• 2.11.6 重现性实验
• 2.11.7 稳定性实验
• 2.11.8 精密度实验
• 2.11.9 加标回收实验
• 2.12 PPSPL化合物的分离纯化
• 2.12.1 分离纯化工艺流程
• 2.12.2 PPSPL的除蛋白质
• 2.12.3 PPSPL的脱色
• 2.12.4 PPSPL的沉淀
• 2.12.5 PPSPL的除小分子杂质
• 2.12.6 PPSPL的纯度
• 4致小鼠慢性肝损伤的保护作用'>2.13 FPSPL对CCl₄致小鼠慢性肝损伤的保护作用
• 2.13.1 药物配制
• 2.13.2 实验动物分组与建模
• 2.13.3 药物处理
• 2.13.4 饮食
• 2.13.5 体重
• 2.13.6 指标采集与检测
• 2.13.7 数据处理及分析
• 3 结果与讨论
• 3.1 系统组分预实验
• 3.1.1 各种成分的定性检测
• 3.1.2 营养素的测定
• 3.2 PrPSPL的提取工艺研究
• 3.2.1 绘制蛋白质标准曲线
• 3.2.2 PrPSPL提取的单因素实验
• 3.2.3 响应面分析实验优化PrPSPL提取工艺
• 3.2.4 重现性实验
• 3.2.5 稳定性实验
• 3.2.6 精密度实验
• 3.2.7 加标回收实验
• 3.3 PrPSPL的沉淀方法及纯度
• 3.3.1 IE 法
• 3.3.2 盐析法
• 3.3.3 IE法沉淀PrPSPL后,溶液中FPSPL和PPSPL的分离
• 3.3.4 PrPSPL的纯度
• 3.4 FPSPL的提取工艺研究
• 3.4.1 绘制芦丁标准曲线
• 3.4.2 FPSPL提取的单因素实验
• 3.4.3 响应面分析实验优化FPSPL提取工艺
• 3.4.4 重现性实验
• 3.4.5 稳定性实验
• 3.4.6 精密度实验
• 3.4.7 加标回收实验
• 3.5 FPSPL化合物的纯化工艺及构成研究
• 3.5.1 大孔吸附树脂的选择
• 3.5.2 AB-8大孔吸附树脂对FPSPL的动态吸附实验
• 3.5.3 AB-8大孔吸附树脂对FPSPL的动态洗脱实验
• 3.5.4 FPSPL的纯度
• 3.5.5 FPSPL的构成研究
• 3.6 PPSPL的提取工艺研究
• 3.6.1 绘制葡萄糖标准曲线
• 3.6.2 PPSPL提取的单因素实验
• 3.6.3 响应面分析实验优化PPSPL提取工艺
• 3.6.4 重现性实验
• 3.6.5 稳定性实验
• 3.6.6 精密度实验
• 3.6.7 加标回收实验
• 3.7 PPSPL的纯化
• 3.7.1 PPSPL的除蛋白质
• 3.7.2 PPSPL的脱色
• 3.7.3 PPSPL的沉淀
• 3.7.4 PPSPL的透析
• 3.7.5 PPSPL的纯度
• 4致小鼠慢性肝损伤的保护作用'>3.8 FPSPL对CCl₄致小鼠慢性肝损伤的保护作用
• 3.8.1 实验小鼠生长状况
• 3.8.2 FPSPL对小鼠肝脏指数的影响
• 3.8.3 FPSPL对小鼠血清ALT与AST活性的影响
• 3.8.4 FPSPL对小鼠血清ALB与TP含量的影响
• 3.8.5 FPSPL对小鼠肝组织匀浆SOD活性和MDA含量的影响
• 3.8.6 讨论
• 4 结论
• 5 展望
• 6 参考文献
• 7 攻读硕士期间论文发表情况
• 8 致谢