蜕皮甾酮乳膏对家兔创面愈合作用的影响

论文摘要

研究背景:创伤愈合是组织修复的复杂生物学过程,通常认为是由进入伤口的成纤维细胞增殖、分化和合成分泌、细胞外基质的纤维化、新生血管长入伤口的血管化和表皮细胞增生覆盖创面的再上皮化等综合作用的结果。创伤愈合大致可分为三个阶段:①炎症反应溶解、清除坏死组织和渗出物;②结缔组织细胞和血管内皮细胞游动、增殖、形成肉芽组织;③新生结缔组织基质沉积和新生组织改建。创伤愈合过程中适度的炎症反应对机体有益,可产生抗感染免疫保护作用,过度炎症反应则可产生对机体有害的病理变化。成纤维细胞是肉芽组织的主要组成部分,在损伤的刺激下,伤口局部未分化的间充质细胞分化或静止的纤维细胞转化为成纤维细胞,在生长因子等其它趋化因子的作用下进入创口并分裂增殖。成纤维细胞可合成分泌胶原、细胞外基质成分,合成和分泌金属蛋白酶及其抑制剂,降解细胞外基质,并参与组织重建。丰富的毛细血管能充实肉芽组织且改善创面微循环,为组织修复提供所必须的氧及丰富的营养物质,从而有利于伤口愈合。这三个阶段相辅相成,互相联系,每一阶段均受到机体的精细调节。创伤愈合一直是是临床上重点难点之一,高龄、营养差、感染、局部血液循环差等导致延迟愈合、不愈合,延迟住院时间,增加患者经济、身心负担。近年来,随着分子生物学在临床应用的进展,许多细胞生长因子作为药物可以加速组织的修复和逆转不良修复状态,但仍受到很大限制,主要担心生长因子的应用会导致增生性瘫痕、胆脂瘤及细胞恶变。在组织工程中,修复效果较好的是组织工程复合皮,但组织工程皮肤在形态与功能方面与正常皮肤仍有较大差异。干细胞技术的研究虽然取得了一些成绩,但目前仍处于初级阶段,在应用于临床之前,有大量问题需要解决。目前许多中草药具有抗感染,减少创面渗出,加速上皮、血管生长,以及减轻瘫痕组织增生等作用,但仍需进行更深入的研究和实践,开发符合国际标准和要求的促愈高效药物。如何加快创伤愈合成为现今临床研究的热点之一。蜕皮甾酮（ecdysterone,EDS）在动物体内又称β-蜕皮激素,是一种昆虫变态激素,它能刺激昆虫真皮细胞分裂,产生新的表皮,导致昆虫变态,调节昆虫新陈代谢。对高等动物蜕皮甾酮能影响糖代谢,促进脂类代谢,免疫调节,影响中枢神经系统。近年来文献报道蜕皮甾酮在心肌梗死急性期刺激心肌分泌产生血管内皮生长因子,促进缺血区血管生成、侧支循环建立、毛细血管密度增加,发挥心肌保护作用,还能促进创伤愈合。植物化学研究表明,蜕皮甾酮在植物界的分布非常广泛。本课题研究将蜕皮甾酮制成乳膏制剂后对家兔创面愈合作用的疗效观察,为蜕皮甾酮乳膏在临床创伤的应用及研制新的制剂类型提供依据。目的:观察蜕皮甾酮乳膏对家兔背部创面愈合率及创面毛细血管生成的影响。方法:1.取单硬脂酸甘油酯35g、硬脂酸140g、白凡士70g、氮酮20ml、羟苯乙酯1g水浴加热至90℃,使熔融,做成油相;另取纯化水580ml、硼砂4g、十二烷基硫酸钠4g、三乙醇胺15ml、甘油160ml、尿囊素3g水浴加热至90℃,做成水相。将油相混合液缓缓加入水相混合液中,制成乳膏基质。取一定量基质边搅拌边加入溶解于甲醇的蜕皮甾酮溶液调配成25g·kg-1蜕皮甾酮乳膏。2.将24只家兔制备成创伤模型（每只均有3个创面）,分别采用25g·kg-1蜕皮甾酮乳膏、乳膏基质、云南白药创可贴治疗。其中12只家兔背部36个创面分别于处理后4d、8d、12d通过创面愈合率评价治疗效果。其余12家兔分别于处理后4d、8d、12d在创面不同位置新生组织取材,常规HE染色和CD34免疫组化染色,通过常规光镜观察及毛细血管密度评价治疗效果。结果:1.创面基本观察术后4d,3组创面均红肿、渗液,但无明显感染,蜕皮甾酮乳膏组红肿、渗液较轻,各组肉芽组织增生不明显。术后8d,蜕皮甾酮乳膏组与云南白药组创面湿润无感染,创口表面及皮下组织收缩明显,肉芽组织增生明显,而基质对照组仍明显红肿渗液,创面的收缩及肉芽组织增生与蜕皮甾酮组、云南白药组相比明显较差。术后12d,蜕皮甾酮乳膏组与云南白药组创面干燥,表面结痂,已近于完全愈合,而基质对照组部分创面仍有渗出,创面愈合明显较蜕皮甾酮乳膏组与云南白药组差。2.愈合率比较术后4d,3组愈合率比较无显著差异（P>0.05）。术后8d、12d,蜕皮甾酮乳膏组、云南白药组的创面愈合率均高于空白乳膏基质对照组（P<0.05）,蜕皮甾酮乳膏组与云南白药组无显著差异（P>0.05）。3.常规HE染色观察术后4d,3组伤口均以渗出和充血为主,肉芽组织增生较少,术后8d,基质对照组毛细血管、上皮细胞增生不明显。蜕皮甾酮乳膏组见大量毛细血管、增生的成纤维细胞,胶原开始形成,上皮细胞少许增生,云南白药组同样见大量毛细血管、增生的成纤维细胞,也见少许的炎细胞浸润。术后后12d,基质对照组仅少许肉芽组织形成,上皮细胞少量增生。蜕皮甾酮乳膏组及云南白药组有较多肉芽组织形成,胶原形成明显,上皮细胞及成纤维细胞增生明显。4.毛细血管密度比较术后4d,3组创面毛细血管密度比较无显著差异（P>0.05）。术后8d、12d,蜕皮甾酮乳膏组、云南白药组的毛细血管密度均高于基质对照组（P<0.05）,蜕皮甾酮乳膏组与云南白药组无显著差异（P>0.05）。结论:蜕皮甾酮乳膏对家兔背部创面愈合率及创面毛细血管生成有明显的促进作用。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 前言
• 蜕皮甾酮乳膏对家兔创面愈合作用的影响
• 材料与方法
• 结果
• 结论
• 讨论
• 参考文献
• 文献综述
• 攻读学位期间成果
• 致谢
• 附 统计学审稿证明