非凝聚态Aβ25-35对新生大鼠海马CA3区锥体神经元钾离子通道影响的膜片钳研究

论文摘要

[目的] Alzheimer’s病（AD）是影响记忆和认知功能的进行性退行性神经病变,是痴呆最常见的原因。β淀粉样蛋白（Ap）增加是AD中枢病因性过程,凝聚态Aβ具有明确的神经毒性作用,但有人提出,非凝聚态Aβ可能也具有神经毒性作用。 本论文研究了非凝聚态Aβ25-35对新生大鼠海马CA3区锥体神经元瞬时外向钾电流IA和延迟整流钾电流IK的影响,探讨电压门控性钾通道在AD发病机制中的作用,从而为应用钾通道调节剂预防和治疗AD提供理论依据。 [方法] 采用酶解和机械分离相结合的方法,急性分离新生大鼠海马CA3区锥体神经元细胞。运用膜片钳技术,记录锥体神经元全细胞跨膜总电流、全细胞内向电流、全细胞外向电流、全细胞IA和IK电流,并分别对IA和IK时间过程、电压—电流关系和动力学特性等正常电生理学特征进行分析。然后用单管加药装置,采用急性细胞外加药的方法,分别记录加入不同浓度非凝聚态Aβ25-35对IA和IK各项电生理指标的影响,所有结果均用相应计算机软件进行分析。 [结果] 1.分离得到的单个海马锥体神经元,胞体呈锥形或三角形,有较长的突起,细胞表面光洁,有较强的光晕,立体感强,贴壁良好,可存活4～6h。

论文目录

• 英文缩写
• 中文摘要
• 英文摘要
• 1.概论
• 1.1 Alzheimer's病
• 1.2 β淀粉样蛋白（β-AmyloidProtein，Aβ）
• 1.3 离子通道
• 1.4 海马与学习记忆
• 1.5 本论文的研究意义及主要工作
• 2.离子通道电流记录技术及原理
• 2.1 细胞膜片的等效电路
• 2.2 电压钳原理
• 2.3 膜片钳技术
• 2.4 全细胞膜片钳记录的基本程序
• 3.材料与方法
• 3.1 材料和设备
• 3.2 方法和步骤
• 4.结果与分析
• 4.1 海马CA3区锥体神经元细胞形态观察
• 4.2 新生大鼠海马CA3区锥体神经元电生理特性
• 4.3 非凝聚态Aβ25-35对大鼠海马CA3区锥体神经元钾离子通道的影响
• A的影响'>4.3.1 非凝聚态Aβ25-35对大鼠海马CA3区锥体神经元I_A的影响
• K的影响'>4.3.2 非凝聚态Aβ25-35对大鼠海马CA3区锥体神经元I_K的影响
• 5.讨论
• 5.1 新生大鼠海马CA3区锥体神经元的急性分离
• 5.2 膜片钳记录过程中可能遇到的问题
• 5.3 新生大鼠海马CA3区锥体神经元电压门控性钾通道的特性
• 5.4 非凝聚态Aβ25-35对新生大鼠海马CA3区锥体神经元钾通道的影响
• 6.结论
• 参考文献
• 致谢
• 攻读硕士学位期间发表的论文