论文摘要
为了研究半胱胺对手术山羊外周血T淋巴细胞转化及其抗氧化作用的影响,我们进行了如下试验:一、半胱胺对手术山羊外周血T淋巴细胞转化的影响试验一:日粮营养和半胱胺盐酸盐对手术后山羊外周血T淋巴细胞转化的影响采用12头本地青年山羊进行了3期试验:1)术前期:根据体重将山羊分成高精料组和低精料组(每组各6只),分囤饲养。两组山羊自由采食粗料和饮水;在此基础上高精料组每只山羊添加精料300 g/d,低精料组每只山羊添加精料50g/d,饲喂10天。2)瘤胃手术期:根据体重将高精料组分为A组(n=3)和B组(n=3),低精料组分为C组(n=3)和D组(n=3),施行瘤胃瘘管安装手术,术后恢复14天。饲喂方式同术前期,但术后第1天起,A组、C组另在精料中拌入包被半胱胺盐酸盐CT2000(45mg/kg.BW.d,含半胱胺成分30%);3)十二指肠手术期:瘤胃手术后第14天进行十二指肠瘘管安装手术,饲喂方式同于瘤胃手术期,试验于十二指肠手术后第8天结束;分别于精料期第8天,瘤胃瘘管手术后第4、8天和第14天,十二指肠瘘管手术后第1、2、3、4天和第8天,采血做T淋巴细胞转化试验。结果显示,增加日粮营养显著提高山羊T淋巴细胞转化率(P<0.05)。与手术前相比,瘤胃手术后第4天时,A组和B组的T淋巴细胞转化率均显著下降(P<0.05),术后第8天时开始回升,但B组T淋巴细胞转化率仍低于术前水平(P<0.05),而A组T淋巴细胞转化率与术前相比,没有显著差异(p=0.12).十二指肠瘘管手术后,各组T淋巴细胞转化率均显著下降(p<0.05);术后第1、2天,各组的T淋巴细胞转化率没有差异;术后第3天起出现组间差异:A、B、C三组相比,A组在所测定的3,4,8天三个时间点T淋巴细胞转化率显著高于其它两组(P<0.05);而B组和C组在术后的五个时间点均没有统计性差异,D组T淋巴细胞转化率显著低于其它各组(P<0.05)。研究表明,提高日粮营养可促进山羊T淋巴细胞转化;而半胱胺盐酸盐可以阻止由手术造成的T淋巴细胞转化能力下降,缓解了手术对细胞免疫功能的抑制,并且在高精料营养条件下能更好的缓解手术对T淋巴细胞转化率的抑制作用。试验二:半胱胺影响山羊外周血T淋巴细胞转化的体外研究采用3只成年山羊新鲜肝素抗凝血,周密度梯度离心法分离淋巴细胞,进行细胞培养。试验组经不同浓度的半胱胺(0.25 mmol/L,0.5mmol/L,1.0mmol/L,2.0mmol/L,4.0 mmol/L)处理,培养72h后收集细胞,用液体闪烁计数器检测cpm,计算T淋巴细胞转化率。结果显示,与对照组相比,0.25 mmol/L浓度半胱胺对T淋巴细胞转化率没有影响,从0.5 mmol/L至1.0mmol/L随半胱胺用量增加,各组T淋巴细胞转化率显著升高(p<0.05)。2.0 mmol/L和4.0 mmol/L组与对照组相比,T淋巴细胞转化率显著降低(p<0.05).结果表明,半胱胺对外周血T淋巴细胞转化有直接刺激作用且呈剂量效应,低剂量促进T淋巴细胞转化,高剂量抑制T淋巴细胞转化。试验三:半胱胺盐酸盐和牛磺酸对手术后山羊外周血T淋巴细胞转化的影响选用7头健康、体重接近的本地山羊,按常规手术安装永久性十二指肠瘘管,分圈饲养,自由采食羊草和饮水,每天每头羊饲喂200g精料,十二指肠手术第7天后进行4期自身对照试验:随机分为A组(n=4)和B组(n=3),1)对照期:A、B两组饲喂同前;2)试验期Ⅰ:A组在精料中拌入包被的半胱胺盐酸盐CT2000(45mg/kg.BW.d,含半胱胺成分30%),B组在精料中拌入牛磺酸(40mg/kg.BW.d),每日饲喂两次;3)恢复期:A、B两组饲喂方式同于对照期;4)试验期Ⅱ:A组在精料中拌入牛磺酸;B组在精料中拌入包被的半胱胺盐酸盐CT2000;每期饲喂14天。分别于每期第12天,采血做T淋巴细胞转化试验。结果显示,对照期两组T淋巴细胞转化率相比差异不显著(p=0.12),试验期Ⅰ,T淋巴细胞转化率与对照期相比,两组均显著升高(p<0.05);恢复期两组相比差异不显著(p=0.68);试验期Ⅱ,T淋巴细胞转化率与恢复期相比,两组均显著升高(p<0.05)。结果表明,手术创伤引起机体细胞免疫功能的抑制,添加半胱胺盐酸盐和牛磺酸都能促进手术后外周血T淋巴细胞的转化,缓解手术对T淋巴细胞转化能力的抑制。二、半胱胺盐酸盐对手术后山羊抗氧化能力的影响6头本地青年山羊,根据体重分成:对照组(n=3)和试验组(n=3),分圈饲养。试验分为2个期:1)术前精料期:第1天到第10天,两组山羊自由采食相料和饮水;两组分别在粗料的基础上添加精料(300 g/d);2)十二指肠手术期:术前精料期结束后即进行十二指肠瘘管安装手术,对照组饲喂方式同于术前精料期,试验组在精料中拌入包被半胱胺盐酸盐CT2000(45mg/kg.BW.d,含半胱胺成分30%),饲喂持续14天。分别于精料期第8天,术后第1天和第3天采血,术后第14天屠宰采肝脏,测定抗氧化指标。结果显示,术后第1天、第3天时,试验组和对照组血清中的MDA含量均显著上升(P<0.05),SOD活力和GSH-Px活力均显著下降(P<0.05);组间相比,试验组和对照组的MDA含量、SOD活力没有差异,但GSH-Px活力下降幅度显著低于对照组(P<0.05)。试验组和对照组肝脏中MDA含量、SOD活力和GSH-Px活力未见显著差异。结果表明,手术后机体的氧化/抗氧化系统平衡受到破坏,抗氧化能力减弱;在本试验条件下半胱胺盐酸盐未能缓解手术造成抗氧化能力的损害。
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