应用基于上转换发光技术的免疫层析法检测霍乱弧菌

论文摘要

目的利用上转换发光技术（Up-Converting Phosphor Technology, UPT）与免疫层析技术（immunochromatographic assay, ICA）相结合的技术平台,研制开发基于上转换发光材料（Up-Converting Phosphor, UCP）为标记物的免疫层析试纸,实现对霍乱弧菌分型基础上的高灵敏度快速地现场检测,为UPT-ICA在多种生物分析中的广泛应用奠定基础。方法制备的免疫层析试纸所采用的标记物为400nm大小的UCP颗粒,反应模式为双抗体夹心法,使用的检测仪器为UPT生物传感器,扫描免疫层析试纸并检测其上经免疫反应结合的UCP发光信号,计算得出在一定范围内搜索到的检测带信号（VT）与质控带信号（VC）信号的比值（VT/VC）,实现对标本中的霍乱弧菌O1群与O139群全菌进行定性和定量检测。结果检测霍乱弧菌的UPT-ICA试纸可区分O1群与O139群霍乱弧菌,并具有较高的特异性,良好的灵敏度,与平板计数有较好的一致性。O1群与O139群霍乱弧菌双重检测中O1群霍乱弧菌的灵敏度为1.69×104CFU/ml,其线性范围105 CFU/ml～108 CFU/ml,0139群霍乱弧菌的灵敏度为1.24×104CFU/ml,其线性范围为105 CFU/ml～108 CFU/ml,批内和批间误差均＜15%。结论UPT-ICA系统可区分O1群与O139群霍乱弧菌,并能对其进行快速特异地定性、定量检测,在霍乱的现场监测及疫情处理中具有广阔的应用前景。

论文目录

• 目录
• 中文摘要
• ABSTRACT
• 前言
• 第一部分 UPT-ICA技术平台简介
• 1.UCP颗粒的制备
• 2.UCP颗粒的表面修饰与活化
• 3.UPT-ICA检测试纸条的研制
• 4.UPT生物传感器
• 第二部分 UPT-ICA快速单重定量检测O1群与O139群霍乱弧菌
• 1.材料
• 2.方法
• 3.结果
• 第三部分 UPT-ICA快速双重定量检测O1群与O139群霍乱弧菌
• 1.材料
• 2.方法
• 3.结果
• 第四部分 UPT-ICA快速双重检测O1群与O139群霍乱弧菌现场评价
• 1.材料
• 2.方法
• 3.结果
• 研究总结
• 参考文献
• 附录
• 综述
• 致谢