复方替米考星纳米乳的制备及其药效学研究

论文摘要

本研究将替米考星（TMS）和乳酸甲氧苄啶（TMPL）配伍,以纳米乳为载体,通过伪三元相图筛选并优化处方,制备了复方替米考星纳米乳（TMS-TMPL-NE）。并对其稳定性、安全性、及有效性进行了考察,为TMS-TMPL-NE在兽医临床上的应用提供理论依据。1. TMS-TMPL-NE分析方法的建立利用紫外-可见分光光度计,分别建立了纳米乳中TMS和TMPL含量检测的分析方法。结果显示:TMS和TMPL的标准曲线分别在5～50μg·mL-1和1～30μg·mL-1浓度范围内线性关系良好;平均回收率为（99.18±1.89）%和（99.68±2.23）%,相对标准偏差（RSD）为1.91%和2.24%;日内精密度（RSD）为0.62%和0.65%,日间精密度（RSD）为1.32%和1.42%。建立的TMS-TMPL-NE分析方法回收率、重复性和精密度均满足要求,可为其制备及稳定性考察提供专属性好的含量测定方法。2. TMS-TMPL-NE的制备及其质量评价采用伪三元相图,对纳米乳形成的因素进行考察,初步筛选出制备TMS-TMPL-NE的处方;利用Kirby-Baueer试验,筛选出TMS和TMPL两药之间最佳配比,确定制备TMS-TMPL-NE最终处方;采用离心法和染色法,鉴别其结构类型;利用透射电镜和激光粒度分析仪,考察其形态和粒径分布;通过强光照射试验、加速试验和长期试验测定其稳定性。TMS-TMPL-NE的最终处方为:w（吐温80） =24.93%,w（无水乙醇/PG）=16.62%,w（磷酸）=1.5%,w（IPM）=4.57%,w（TMS）=5.98%,w（TMPL）=0.66%,w（蒸馏水）=45.74%;制备的TMS-TMPL-NE为水包油（O/W）型纳米乳;棕黄色,透明均一;透射电镜下乳滴呈球形,分布均匀,平均粒径为12.4 nm,多分散系数为0.051;制剂稳定性良好,有效期为20个月。结果表明制备的TMS-TMPL-NE质量稳定,达到了临床用药要求。3. TMS-TMPL-NE的安全性评价通过急性毒性试验和皮肤刺激性试验,对TMS-TMPL-NE进行安全性评价。结果显示:TMS-TMPL-NE的半数致死量（LD50）为2346 mg.kg-1,LD50的95%可信限为:2270～2425 mg.kg-1,属于低毒级药物;TMS-TMPL-NE对完整皮肤和破损皮肤均无明显刺激性。表明TMS-TMPL-NE口服给药比较安全、乳房灌注给药刺激性小。4. TMS-TMPL-NE体外联合抑菌效应研究为了检测复方替米考星的体外联合抑菌效应,通过单药最小抑菌浓度（MIC）测定、联合药敏试验和Kirby-Baueer,研究TMS-TMPL-NE对3种临床菌株的体外联合抑菌效应。TMS和TMPL联用时表现协同抑菌作用;二者联用时对金黄色葡萄球菌的MIC分别是单用时的1/4和1/8倍,对无乳链球菌的MIC均是单用时的1/4倍,对大肠杆菌的MIC分别是1/4和1/16倍;二者联用对3种病原菌的部分抑菌浓度指数（FIC）均不大于0.5;TMS-TMPL-NE对3种病原菌的抑菌直径与对照组相比,差异显著（P<0.05）,与其他组相比差异极显著（P<0.01）。结果表明TMS-TMPL-NE对3种病原菌的体外联合抑菌性强。5. TMS-TMPL-NE的临床治疗试验对自然感染慢性呼吸道疾病的鸡分别自由饮水高、中、低剂量的TMS-TMPL-NE进行治疗,并与对照组药物泰克星比较。高、中、低3个剂量组的治愈率分别为98%、88%和72%,有效率分别为100%、98%和89%;泰克星组治愈率为74%,有效率为91%。表明高、中剂量的TMS-TMPL-NE对鸡慢性呼吸道疾病的治疗效果均显著优于低剂量TMS-TMPL-NE和泰克星组（P<0.05）。因此在临床治疗鸡慢性呼吸道疾病的推荐剂量为中剂量,对于重症病例,可以适当提高用药量。制备的TMS-TMPL-NE安全性高、药效强、稳定性好,将为兽医临床用药提供一种新型纳米级抗菌药物。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 第一章 文献综述
• 1.1 处方药物研究进展
• 1.1.1 替米考星的研究概况
• 1.1.2 乳酸甲氧苄啶的研究概况
• 1.1.3 小结
• 1.2 纳米乳的研究进展
• 1.2.1 纳米乳的形成机理
• 1.2.2 纳米乳的结构类型
• 1.2.3 纳米乳与普通乳状液、胶束溶液的区别
• 1.2.4 纳米乳的处方组成
• 1.2.5 纳米乳的制备方法
• 1.2.6 纳米乳在药剂学领域中的应用
• 1.2.7 小结
• 1.3 本研究的目的与意义
• 1.4 本研究的主要内容
• 第二章 复方替米考星纳米乳制剂分析方法的建立
• 2.1 材料与方法
• 2.1.1 材料
• 2.1.2 方法
• 2.2 结果与分析
• 2.2.1 TMS-TMPL-NE 中TMS 含量测定的方法
• 2.2.2 TMS-TMPL-NE 中TMPL 含量测定的方法
• 2.3 讨论
• 2.4 小结
• 第三章 复方替米考星纳米乳的制备及其质量评价
• 3.1 材料与方法
• 3.1.1 材料
• 3.1.2 方法
• 3.2 结果与分析
• 3.2.1 TMS-TMPL-NE 处方组成的初步筛选
• 3.2.2 TMS 和TMPL 最佳配比的确定
• 3.2.3 TMS-TMPL-NE 配方的确定
• 3.2.4 TMS-TMPL-NE 的制备
• 3.2.5 TMS-TMPL-NE 的质量评价
• 3.3 讨论
• 3.3.1 影响纳米乳形成的因素
• 3.3.2 TMS 与TMPL 的联合用药
• 3.3.3 纳米乳的质量评价
• 3.4 小结
• 第四章 复方替米考星纳米乳的安全性评价
• 4.1 材料与方法
• 4.1.1 材料
• 4.1.2 方法
• 4.2 结果与分析
• 4.2.1 急性毒性试验
• 4.2.2 皮肤刺激性试验
• 4.3 小结
• 第五章 复方替米考星纳米乳的体外联合抗菌效应研究
• 5.1 材料与方法
• 5.1.1 材料
• 5.1.2 方法
• 5.2 结果与分析
• 5.2.1 TMS-NE 和TMPL-NE 的MIC
• 5.2.2 联合药敏试验
• 5.2.3 TMS-TMPL-NE 对3 种病原菌的抑菌效果
• 5.3 讨论
• 5.4 小结
• 第六章 复方替米考星纳米乳的临床治疗试验
• 6.1 材料与方法
• 6.1.1 材料
• 6.1.2 方法
• 6.2 结果与分析
• 6.2.1 TMS-TMPL-NE 对鸡呼吸道疾病的治疗效果
• 6.2.2 各组试验鸡增重情况
• 6.3 讨论
• 6.4 小结
• 结论
• 参考文献
• 致谢
• 个人简介