ACE、CYPllB2和HSP70基因与“沙漠人”高血压、动脉粥样硬化的关联研究

论文摘要

研究背景：新疆的塔克拉玛干大沙漠以“死亡之海”闻名于世,是中国第一、世界第二的大沙漠,极度干旱。夏季炎热,气温高达摄氏50℃-60℃。就在这死亡之海的腹地生活着一个几乎与世隔绝的游牧部落—“克里雅人”,1958年才被中国科学院治沙队和石油重力队发现。“克里雅人”居住在世界上少有的干极、热极之一,却仍然能维持正常的生理功能,且心血管疾病发病率低,其适应和代偿机制还不为人知。高血压病（Essential Hypertension, EH）是危害人类健康的主要心血管疾病,研究发现高血压病是一种多基因遗传病。随着分子生物学的发展,有关高血压相关基因的研究已成为研究热点。肾素-血管紧张素-醛固酮系统（RAAS）调节机体水盐代谢、血管张力和交感神经系统活性,在高血压发病机理中起重要作用,因此编码该系统的各个基因就成为研究EH遗传基础的很有吸引力的侯选基因。动脉粥样硬化性疾病已成为全球和中国人口的主要死亡原因。由于动脉粥样硬化引起的心血管疾病目前缺乏有效的治疗,因此针对动脉粥样硬化性疾病的防治是人们亟待解决的问题。近年来研究发现,炎性机制参与动脉粥样硬化性疾病的发生及发展。也有许多研究认为HSP70基因多态性可能与动脉粥样硬化有关。目的：本研究旨在探讨新疆塔克拉玛干“沙漠人”特殊生理特征及膳食、水质等因素与其高血压低发病的相关性。探讨塔克拉玛干“沙漠人”高血压病与血管紧张素转换酶（ACE）基因插入/缺失（I/D）和醛固酮合成酶基因（CYP11B2）启动子区C-344T、外显子3 K173R位点多态性的关系。探讨塔克拉玛干“沙漠人”动脉粥样硬化危险因素与热休克蛋白70（HSP70）基因三种常见遗传变异包括HSP70-1 （+190G/C）, HSP70-2 （+1267A/G）和HSP70-hom （+2437T/C）位点多态性的关系。方法：采取随机抽样方法在“沙漠人”群中随机选取503人和新疆于田县先拜巴扎镇随机选取维吾尔族237人作为对照人群进行流行病学调查,同时进行体格检查、膳食调查、血液生化检测及当地水质检测。比较两组人群体质、静态心电图和生化指标的差别。采用多聚酶链式反应/限制性片段长度多态性（PCR.RFLP）及直接测序技术检测ACE、CYP11B2（C-344T、K173R）和HSP70基因（HSP70-1,HSP70-2和HSP70-hom）的基因型,比较两组人群基因型的差别,并进行单倍型分析。采用病例一对照研究的方法将“沙漠人"503人分为高血压病组（EH）50人和正常血压对照组（NT）453人,采用多聚酶链式反应/限制性片段长度多态性（PCR.RFLP）及直接测序技术检测ACE和CYP11B2 （C-344T、K173R）的基因型,比较两组人群基因型的差别。结果：“沙漠人”男、女身高都明显高于对照组人群,“沙漠人”腰围小于对照组人群,“沙漠人”体重指数小于对照组人群,有统计学差异。“沙漠人”平均舒张压、收缩压水平均低于对照组人群,血脂、血糖水平低于对照组人群,有统计学差异。“沙漠人”成人高血压检出率（9.94%）,明显低于对照组人群的成人高血压检出率（29.11%）,（X2=42.476,P=0.000）。“沙漠人”组左室高电压检出率（33.04%）,明显高于对照组左室高电压检出率（12.16%）,（X2=32.443,P=0.000）。“沙漠人”膳食中摄盐量、钠摄入量均低于对照组,有统计学差异。经logistic回归分析可知年龄、体重指数、HDL-C、LDL-C、摄盐量与沙漠人组高血压有关联,回归系数β均有统计学意义。ACE基因I/D多态性,CYP11B2基因-344C/T和K173R多态性与塔克拉玛干“沙漠人"EH无关联。“沙漠人”可能有为适应干热环境而发生CYP11B2基因C-344T位点向携带T等位基因基因型增多的趋势突变。“沙漠人”体重指数较低、肥胖少而胸壁较薄、CYP11B2基因（C-344T）携带T等位基因与塔克拉玛干“沙漠人”心电图左室高电压相关联。单倍型分析CYP11B2基因-344C/T和K173R两位点构成的4个单倍型在“沙漠人”组和于田对照组间总体上无统计学差异（P>0.05）。但在所有单倍型中,包含CYP11B2（-344T和173K）等位基因的单倍型在“沙漠人”组高于于田对照组,且有统计学差异（X2=4.898,P=0.027）。“沙漠人”常见动脉粥样硬化危险因素高血压、高血糖、高血脂及代谢综合征都显著低于对照组人群,有统计学差异（P<0.001）。“沙漠人’血清IgM水平低于对照组人群,有统计学差异（t=4.781,P=0.000）。“沙漠人”低IgM水平可能与他们动脉粥样硬化发生率低有关。HSP70-hom（+2437T/C）多态性与塔克拉玛干“沙漠人”动脉粥样硬化相关联,该位点携带TT基因型可能是“沙漠人”动脉粥样硬化的保护因素。HSP70基因（+190G/C,+1267A/G,+2437T/C）三个位点构成的8个单倍型在“沙漠人”组和于田对照组间总体上无统计学差异（P>0.05）。但在所有单倍型中,包含HSP70基因（190C-1267G-2437C）的单倍型在于田对照组高于“沙漠人”组,有统计学差异（P<0.05）。结论：“沙漠人”低体重指数、肥胖少见,血压、血脂、血糖水平低,及心电图左室高电压是其重要生理特征。“沙漠人”少肥胖、低BMI,低血脂、血糖的生理特征和少吸烟、饮酒,饮食低盐摄入,饮水低钙高镁的生活习惯,可能是他们高血压患病率低的重要因素。ACE基因I/D多态性,CYP11B2基因-344C/T和K173R多态性与塔克拉玛干“沙漠人”高血压无关联。“沙漠人”可能有为适应干热环境而发生CYP11B2基因C-344T位点向携带T等位基因基因型增多的趋势突变。“沙漠人”常见动脉粥样硬化危险因素高血压、高血糖、高血脂及代谢综合征都显著低于对照组人群；HSP70-hom （+2437T/C）多态性与塔克拉玛干“沙漠人”动脉粥样硬化相关联,该位点携带TT基因型可能是“沙漠人”动脉粥样硬化的保护因素。

论文目录

• 中文摘要
• Abstract
• 前言
• 第一部分 塔克拉玛干"沙漠人"生理特征与其高血压低发病率的相关性研究
• 1. 资料与方法
• 1.1 研究对象
• 1.2 研究方法
• 1.3 诊断标准
• 1.4 质量控制
• 1.5 统计学方法
• 2. 结果
• 3. 讨论
• 4. 小结
• 第二部分 塔克拉玛干"沙漠人"高血压病与ACE和CYP11B2基因多态性的关联研究
• 1. 资料与方法
• 1.1 研究对象
• 1.2 实验材料
• 1.3 分析软件
• 1.4 实验方法
• 1.5 直接测序技术
• 1.6 基因型鉴定
• 1.7 统计学分析
• 2. 实验结果
• 3. 讨论
• 4. 小结
• 第三部分 塔克拉玛干"沙漠人"动脉粥样硬化危险因素与HSP70基因多态性的关联研究
• 1. 资料与方法
• 1.1 研究对象
• 1.2 体格检查及样本收集
• 1.3 实验材料
• 1.4 实验方法
• 1.5 直接测序技术
• 1.6 基因型鉴定
• 1.7 统计学分析
• 2. 实验结果
• 3. 讨论
• 4. 小结
• 研究的优势与限制
• 展望
• 结论
• 致谢
• 参考文献
• 综述1 热应激蛋白70与热适应
• 参考文献
• 综述2 醛固酮合成酶基因多态性与心血管疾病关系的研究进展
• 参考文献
• 攻读博士学位期间发表的学术论文
• 个人简历
• 导师评阅表