论文摘要
目的基因启动子区甲基化是最重要的表观遗传修饰,通过结合甲基化结合域（MBD）和组蛋白乙酰化能引起基因的表达沉默,尤其是抑癌基因启动子区的甲基化在多种肿瘤的发生发展的过程中有着非常重要的作用;肝癌中多基因启动子区的同时甲基化形成的CpG岛的甲基化表型被证实与肝癌病理,如甲胎蛋白的升高有密切关系。本实验通过检测肝癌中多基因启动子区的甲基化,观察肿瘤相关基因甲基化在肝癌发生情况,建立与肝癌预后相关CpG岛甲基化表型;分析CpG岛甲基化表型与临床病理资料之间的联系。方法收集2004年1-6月手术切除的标本于液氮中冻存备用,分别抽提冻存的肝癌、癌旁及正常肝组织的DNA,利用亚硫酸氢钠具有使未甲、非甲基化引物,然后进行PCR反应。我们分别检测了肿瘤相关基因P15,SYK,TIMP-3,E-cadherin,RASSAF1,P53,RB1,WT1,P14及P16启动子区在60个肝癌、癌旁及6个正常肝组织的甲基化情况,根据甲基化不同对60例病人进行CpG岛的甲基化表型分类;另一方面对手术切除的病人进行临床病理资料的收集,对病人进行随访,了解病人三年生存期,比较不同CpG岛甲基化表型的病人的临床病理资料和三年生存期。结果60个肝癌标本中十个基因的甲基化情况各不相同:从P53的8%到90%的RASSAF1;肝癌组织比癌旁组织的甲基化平均水平高,二者在统计学上有显著差异（P＜0.05）。CpG岛的甲基化表型状态与转移和TNM分期有关系（p＜0.01）;CpG岛的甲基化表型高的病人易转移,TNM分期更晚。随后我们运用K-M生存曲线分析CpG岛的甲基化表型与生存期关系时发现CpG岛的甲基化表型高组的病人的三年生存期比CpG岛的甲基化表型中间组和低组的病人要短,具有显著差异（p＜0.00）。结论一、该组CpG岛的甲基化表型与转移关系提示该CpG岛的甲基化表型可以作为肝癌进展的分子标记物,二、该组CpG岛的甲基化表型可以作为肝癌的预后指标。
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