电项针对大鼠睡眠剥夺及其诱发氧化应激反应影响机制的实验研究

论文摘要

本论文是在以往对电项针临床应用和研究的基础上,对电项针治疗失眠的作用作了系统全面的总结、归纳后,通过睡眠剥夺大鼠动物模型,观察其脑干网状结构中单胺类神经递质、脑肠肽、NO和SOD含量的变化,从分子水平对电项针治疗失眠及其氧化应激反应进行深入研究。目的:1通过电项针干预睡眠剥夺大鼠的实验研究探讨电项针对失眠及其诱发氧化应激反应影响机制。方法:将大鼠随机分为空白组、模型组、电项针组、甜梦胶囊组、黄芪注射液组,除空白组外,其余组通过腹腔注射PCPA复制睡眠剥夺大鼠模型。1观察对比睡眠剥夺5天后各组大鼠体重变化。2通过电镜观察大鼠神经细胞的变化情况。3通过荧光分光光度计观察大鼠脑中5-HT、5-HIAA、NE含量的变化。4通过光栅分光光度计观察脑干中SOD及NO含量的变化。5通过免疫组化染色法观察CCK8、GABA在睡眠剥夺大鼠脑干组织中阳性表达情况。结果:1模型组大鼠脑干网状结构中5-HT、5-HIAA、GABA、CCK8含量降低,NO、SOD、NE含量升高,与空白组对比有显著差异（P＜0.01）,理论上造模成功。2睡眠剥夺5天后,模型组大鼠体重减轻,与空白组比较有明显差异（P＜0.01）,电项针组大鼠体重无明显变化,与空白组无明显差异（P＞0.05）。3电镜下观察可见,睡眠剥夺后,模型组与甜梦胶囊组大鼠脑干细胞膜边界不清晰,细胞浑浊,细胞内有空泡变性,线粒体空泡变性,肿胀明显粗面内质网含量减少,突触融合。而电项针组未见明显变化。4荧光分光光度计法证实,睡眠剥夺后,电项针可以提高脑干网状组织内5-HT、5-HIAA的含量,降低NE的含量,与模型组比较有显著差异（P＜0.01）,甜梦胶囊组NE的含量降低,同模型组相比有显著性差异（P＜0.01）,与电项针组比较无显著性差异（P＞0.05）。甜梦胶囊组5-HT、5-HIAA的含量降低,同模型组相比无显著性差异（P＞0.05）。与电项针比较有显著性差异（P＜0.05）。5光栅分光光度计法证实,睡眠剥夺后,电项针组和黄芪注射液组大鼠脑干网状组织内NO、SOD的含量降低,与模型组比较均有显著差异（P＜0.01）。两组比较无显著性差异（P＞0.05）。6免疫组织化学染色法证实,睡眠剥夺后,电项针组和甜梦胶囊组大鼠脑干网状组织内CCK8的含量升高,与模型组比较有显著差异（P＜0.01）,两组比较无显著性差异（P＞0.05）。电项针组和甜梦胶囊组大鼠脑干网状组织内GABA的含量升高,与模型组比较,电项针组有显著差异（P＜0.01）,甜梦胶囊组无明显差异（P＞0.05）,两组比较有显著性差异（P＜0.05）。结论:1睡眠剥夺可以破坏大鼠脑干中的神经细胞,而电项针对神经细胞具有保护作用,抑制睡眠剥夺对大鼠脑干神经细胞的损害。2电项针可以通过恢复5-HT通路与NE通路之间的相互平衡和制约,进而恢复正常的睡眠一觉醒节律,从而纠正失眠。3电项针可通过增强GABA的抑制作用,从而实现治疗失眠的目的。4电项针可通过恢复CCK8与NO通路之间的平衡减轻睡眠剥夺大鼠的氧化应激反应,减少睡眠剥夺大鼠神经毒性作用。通过增加CCK8减轻大鼠由睡眠剥夺诱发氧化应激引起进食增多,体重减轻的高度能量消耗的营养不良状态。

论文目录

• 缩略语表
• 中文摘要
• 英文摘要
• 前言
• 文献综述
• 1 中医关于失眠的认识
• 1.1 内经关于失眠的认识
• 1.2 失眠的病因病机
• 1.3 中医其它著作中关于不寐的认识
• 2 现代医学对失眠症认识
• 2.1 睡眠的作用
• 2.2 与睡眠调节机制有关的神经结构
• 2.3 睡眠的体液调节机制
• 2.4 睡眠的分期
• 2.5 失眠症的病因及其生理病理
• 2.6 失眠对人体的影响
• 2.7 失眠的现代药物治疗
• 2.8 失眠与氧化应激
• 3 针灸治疗失眠的近况
• 3.1.古代失眠的针灸取穴特点
• 3.2 现代临床治疗失眠取穴特点
• 3.3 不同针法治疗失眠的研究进展
• 3.4 针灸治疗失眠前景展望
• 实验研究
• 实验一 电项针对睡眠剥夺大鼠的调控机制研究
• 1 实验材料
• 1.1 实验动物
• 1.2 主要仪器
• 1.3 主要试剂
• 2 实验方法
• 3 检测指标方法
• 3.1 电项针对5-HT、5-HIAA的含量的影响
• 3.2 电项针对SD大鼠NE含量的影响
• 3.3 电项针对SD大鼠脑干GABA阳性表达的影响
• 3.4 大鼠营养状态观察
• 3.5 电项针对SD大鼠脑干CCK8阳性表达的影响
• 3.6 电项针对SD大鼠脑干内神经细胞影响的形态学观察
• 4 统计分析
• 5 实验结果
• 5.1 各组大鼠脑干网状结构内5-HT,5-HIAA的比较
• 5.2 各组大鼠脑干网状结构内NE的比较
• 5.3 各组大鼠脑干内GABA的比较
• 5.4 各组大鼠脑干内CCK8的比较
• 5.5 各组大鼠体重变化的比较
• 5.6 电项针对SD大鼠脑干内神经细胞影响的形态学观察
• 实验二 电项针对睡眠剥夺诱发氧化应激反应大鼠调控机制的研究
• 1 实验材料
• 1.1 实验动物
• 1.2 主要仪器
• 1.3 主要试剂
• 2 实验方法
• 3 检测指标方法
• 3.1 电项针对SD大鼠脑干NO含量的影响
• 3.2 电项针对SD大鼠脑干SOD含量的影响
• 4 统计分析
• 5 实验结果
• 5.1 各组大鼠脑干NO含量的比较
• 5.2 各组大鼠脑干内SOD的比较
• 讨论
• 1 电项针治疗失眠的特色
• 2 失眠大鼠模型的选择
• 3 风池穴的现代研究进展
• 4 电针治疗失眠的机理
• 5 电项针对SD大鼠单胺类神经递质含量的影响
• 5.1 电项针对SD大鼠5-HT 5-HIAA和NE的影响
• 5.2 电项针对SD大鼠GABA含量的影响
• 6 电项针对SD大鼠CCK8,NO,SOD含量的影响
• 7 电项针对大鼠睡眠剥夺及其氧化应激反应的影响机制
• 结论
• 致谢
• 参考文献
• 附录（附图）
• 攻读博士学位期间发表论文
• 个人简历