RNA干扰表达载体抑制宫颈癌HPV16-E6基因表达的研究

RNA干扰表达载体抑制宫颈癌HPV16-E6基因表达的研究

论文题目: RNA干扰表达载体抑制宫颈癌HPV16-E6基因表达的研究

论文类型: 博士论文

论文专业: 妇产科

作者: 李大可

导师: 彭芝兰

关键词: 干扰,人乳头状瘤样病毒,表达载体

文献来源: 四川大学

发表年度: 2005

论文摘要: 目的: 探讨RNA干扰表达载体(small interference RNA expression vector)对宫颈癌细胞中HPV16-E6基因的抑制作用,通过体外实验和雌性裸鼠体内实验了解我们构建的载体能否特异性的沉寂宫颈癌细胞中的HPV16-E6基因及其时效性。 方法: 1.利用计算机辅助设计软件,设计合成含有针对HPV16-E6基因特定序列的56nt寡核苷酸片段,并将其定向克隆入真核表达载体,得到重组质粒E6-1、E6-2、E6-3。 2.脂质体法转染宫颈癌caski和siha细胞株,经G418筛选获得阳性克隆株。应用荧光定量PCR(fluorescence quantitative PCR)技术及流式细胞仪(flow cytomety)检测转染前后及不同时间点HPV16-E6mRNA的变化、HPV16-E6蛋白表达及细胞凋亡的情况。 3.通过细胞生长曲线及克隆形成试验了解转染前后细胞生物学行为的变化。 4.裸鼠皮下接种肿瘤细胞成瘤,不同时间点测定肿瘤体积的差异,肿

论文目录:

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论文: RNA干扰表达载体抑制宫颈癌HPV16-E6基因表达的研究

前言

第一部分: RNAi表达载体的构建

材料与方法

结果

讨论

第二部分: RNAi表达载体抑制宫颈癌细胞株HPV16-E6基因表达的体外实验研究

材料与方法

结果

讨论

第三部分: RNA干扰表达载体抑制宫颈癌HPV16-E6基因的体内实验研究

材料与方法

结果

讨论

全文小结

参考文献

综述: RNA干扰技术及其在妇科肿瘤领域的应用进展

参考文献

致谢

发布时间: 2005-11-09

参考文献

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