DCIK细胞用于肺癌免疫治疗的初步临床研究

论文摘要

研究背景:肺癌是目前最常见的恶性肿瘤,5年生存率仍不到15%。近年来肿瘤过继免疫治疗成为肿瘤研究的热点之一,自上世纪80年代Rosenberg发现利用白细胞介素-2（IL-2）激活的杀伤细胞（Lymphokine Activated Killer,LAK）在治疗晚期肿瘤中取得疗效以来,已有多种细胞用于肿瘤的过继免疫治疗,主要包括T细胞、NK细胞、DC和CIK细胞。研究发现DC与CIK细胞共培养,诱导成树突状细胞调节的细胞因子诱导的杀伤细胞（DCIK细胞）直接杀伤肿瘤细胞,兼有T细胞强大的抗瘤活性与自然杀伤细胞的非主要组织相容性复合物（MHC）限制性杀瘤特点。在动物实验中已经证实DCIK细胞回输体内的过继免疫治疗具有较强的广谱的抗肿瘤活性,具有较高的安全性和有效性。研究目的:本实验旨在探索一种新的抗肿瘤的效应细胞。细胞因子诱导的杀伤细胞（CIK细胞）和同源树突状细胞（DC）共培养后,观察培养细胞树突状细胞调节的细胞因子诱导的杀伤细胞（DCIK细胞）细胞形态,测定DCIK细胞体外细胞毒活性,比较其与CIK细胞的细胞毒活性;并观察DCIK细胞治疗肺癌的近期临床疗效及副反应、免疫学活性。研究方法:收录12例确诊肺癌经标准方案治疗的患者,取50ml外周血分离单个核细胞（PBMC）,在体外诱导出DC和CIK细胞,分别培养1周后,电镜下观察DC形态。按1:5比例共培养10-14天后,流式细胞仪测细胞表型,相差显微镜下观察DCIK细胞形态,用MTT法测体外细胞毒活性,比较不同效靶比时,DCIK与CIK体外对A549人肺腺癌细胞的细胞毒活性。所有患者均接受一定剂量的DCIK细胞过继免疫治疗,静脉回输DCIK细胞,每次近似于1×109个,总体200 ml,每3次为1疗程,共使用3个疗程,观察其治疗前后的近期临床疗效及不良反应、免疫学活性。结果:1.培养14天,当效靶比（DCIK:A549或CIK:A549）分别为1.0:1、1.25:1、2.5:1、5:1、10:1时,DCIK细胞杀伤率分别为22.92±1.89%、30.91±2.13%、45±3.63%、52.83±2.29%、62.12±5.46%;CIK细胞杀伤率分别为17.98±0.31%、20.82±1.51%、34.50±2.50%、47.20±2.27%、50.11±4.32%;P＜0.05。2.在DCIK细胞治疗之前,CD3+T细胞百分率为75.25±9.56%,治疗之后百分率为75.50±9.79%,t=0.198,P＞0.05;在DCIK细胞治疗之前,CD3+CD4+T细胞百分率为24.44±10.89%,治疗之后平均百分率为35.87±12.38%,t=3.69,P＜0.05;在DCIK细胞治疗之前,CD3+CD8+T细胞百分率为30.69±14.05%,治疗之后百分率为41.68±15.98%,t=3.82,P＜0.05;在DCIK细胞治疗之前,CD3+CD56+T细胞百分率为10.96±4.85%,治疗之后百分率为24.89±4.27%,t=12.53,P＜0.05。与DCIK细胞回输前相比,治疗后患者CD3+CD4+、CD3+CD8+、CD3+CD56+均有明显的升高（P＜0.05）。3.12例患者中完全缓解1例,部分缓解4例,病情稳定1例,病情进展共6例,其中死亡2例,近期有效率为41.6%,疾病控制率为50%。4.除两例患者出现一过性的发热外,其余患者基本无不良反应。结论:1.在体外实验中,DCIK细胞杀伤活性要优于CIK的细胞杀伤活性。2.在过继免疫治疗中,DCIK细胞能提高肺癌患者的基础免疫水平,增强其抗肿瘤免疫功能,是新的杀伤肿瘤细胞的效应细胞。3.DCIK细胞有较好的临床疗效,可作为手术、化疗或放疗等常规治疗方案的新型的辅助治疗手段。4.DCIK细胞有较好的安全性。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 引言
• 参考文献
• 材料与方法
• 结果
• 讨论
• 参考文献
• 结论
• 附表
• 综述1
• 综述2
• 已发表文章
• 致谢