论文摘要
目的:葡萄糖-6-磷酸酶（glucose-6-phosphatase,G-6-Pase）是糖代谢过程中一个重要的酶,由于它是糖异生和糖原分解的最后一步反应的限速酶,因此其基因表达水平的变化可影响到内生性糖的输出。事实上,2型糖尿病的高血糖同肝脏胰岛素抵抗所致肝糖过度输出有关。胰淀素作为胰岛β细胞重要的活性激素,参与血糖调节。目前研究表明,其异常分泌参与了胰岛素抵抗。本实验旨在研究胰淀素对该酶基因表达的影响,从而进一步探讨胰淀素与肝糖输出及与胰岛素抵抗的相关性。方法:1引进人肝细胞系L-02,参照文献进行体外培养。2在不同浓度的血糖、胰岛素及不同浓度胰淀素的培养基下培养肝细胞,然后提取细胞总RNA,应用半定量逆转录聚合酶链反应（SQ-RT-PCR）法,检测G-6-Pase的表达水平。结果1经相差显微镜观察人肝细胞生长良好。2人肝细胞在高糖（15mM）高胰岛素（100IU/L）培养液中培养24小时后,G-6-Pase mRNA丰度比对照组（低糖低胰岛素组）增高,具有统计学意义。3加入不同浓度的胰淀素与高糖高胰岛素联合培养2小时后,0.1μM、1μM胰淀素组G-6-Pase mRNA水平无明显变化,10μM胰淀素会使G-6-Pase mRNA丰度较高糖高胰岛素组明显增高,具有统计学意义。结论:1人肝细胞L-02体外培养良好。2在高糖高胰岛素的培养基培养24小时后,与对照组（低糖低胰岛素组）相比,G-6-Pase的表达水平增高,提示了高浓度葡萄糖降低了胰岛素对G-6-Pase mRNA的抑制作用;加入不同浓度的胰淀素后,与高糖高胰岛素组相比,0.1μM、1μM胰淀素组G-6-PasemRNA水平无明显变化;10μM的胰淀素会使G-6-PasemRNA的表达水平明显增高,（P＜0.01）,显示高浓度胰淀素、高浓度葡萄糖条件使胰岛素对G-6-PasemRNA的抑制作用进一步降低。提示糖尿病患者异常分泌的胰淀素干扰了肝糖输出,参与了胰岛素抵抗。
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