艾力沙坦的降压作用和器官保护作用

论文摘要

高血压病是常见的心血管疾病,不仅发病率高,且常常引起心、肾、脑等重要脏器受损而发生致死性并发症,如不加以治疗可导致严重的后果。高血压病的治疗主要从三方面:降低血压、减少并发症、改善预后。这三点中,降低血压为一硬性指标,而在后两项中,其主要途径就是减少器官损伤。由于高血压病人需要终生服用药物治疗,因此抗高血压药物还要生物利用度高、毒性小,才能持久稳定的发挥出它的作用,以达到防止高致死、致残率的心脑血管疾病的目的。目前有多种类型的抗高血压药物,血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）受体（AT1）拮抗剂的出现代表高血压治疗的一个重要进展,使在受体水平拮抗循环和局部的AngⅡ作用成为当前抗高血压药物治疗的新观念和新方法。沙坦类药物（AT1拮抗剂）是抗高血压一线治疗用药,其代表药物氯沙坦（losartan）为新型的非肽类AT1拮抗剂,具有良好的抗高血压作用和保护心、肾、脑,逆转心肌和血管壁肥厚,排钠利尿以及促进尿酸排泄等作用,不良反应发生率低,病人耐受良好,用于各型高血压、慢性心功能不全。氯沙坦口服吸收迅速,0.5-1h达到血药峰值浓度（Cmax）80ng/ml,pKa为4.9,肝脏首过效应显著,生物利用度为33%-37%,血浆蛋白结合率为98.7%,很难通过血脑屏障,消除半衰期（t1/2β）为1.5h-3.2h。氯沙坦在肝脏经细胞色素P450酶代谢形成有药理活性的产物EXP3174,其活性比母体约强10-40倍,pKa为2.8,蛋白结合率大于99%,半衰期约为6-9h,且无任何激动AT1其它受体活性,因此较氯沙坦降压作用进一步加强和持久。然而EXP3174因其结构中的双羧酸结构,导致水溶性很小,因此直接制作口服给药剂型不易吸收。探索治疗高血压病的脚步从未停止过,目前治疗高血压的主要方法仍是依靠抗高血压药物,新的药物不断走出实验室,应用于临床。艾力沙坦（Allisartan）是由上海艾力斯医药科技有限公司研制开发的一种口服抗高血压新药,属于AT1拮抗剂。氯沙坦口服吸收后需经肝内2C9、3A4酶代谢,而艾力沙坦则在胃肠道经酯酶水解,不需肝药酶代谢,因此可很大程度减轻高血压病人的肝负担。氯沙坦经代谢转化后仅14%可转化为EXP3174,其它成份虽也具有一定的降压效力,但活性仅为EXP3174的3%,艾力沙坦则全部转化为单一成份EXP3174,由于大大减少了非活性成份,从安全性角度讲,具有更好的临床利用价值。为验证艾力沙坦的药理作用,本研究以氯沙坦钾作为阳性对照药、CMC作为阴性对照药,设计七部分实验,首先进行安全性评价,接着从药效学角度研究艾力沙坦单次给药对三种高血压模型动物的降压作用以及对麻醉开胸犬血流动力学影响,最后通过长期给药实验,研究其对SHR血压、反射功能和器官保护作用的影响。方法1、首先进行最大耐受量实验,对艾力沙坦进行安全性评价。采用昆明种小白鼠,雌雄各半,以小鼠灌胃器灌胃给药。实验采用KORBOR氏法,首先探索剂量范围,再分析结果。结果显示:艾力沙坦经用最高溶解度和最大容积（10 g/kg）一次灌胃给药,未见小鼠死亡情况,和阳性对照药物氯沙坦钾相比,沙坦类衍生物艾力沙坦的急性毒性远小于氯沙坦钾。2、采用雌性自发性高血压大鼠（SHR）,研究艾力沙坦单次给药对SHR的降压作用及量效关系。动物分为5个组:阴性对照组（CMC）、艾力沙坦低剂量组（7.5mg/Kg）、中剂量组（15 mg/Kg）、高剂量组（30mg/Kg）和阳性对照组（氯沙坦钾30mg/Kg）。均以胃瘘管给药。SHR麻醉状态下行股动脉插管并造胃瘘管,休息2天后,动物在清醒自由活动状态下,由计算机连续记录每博收缩压（SBP）,舒张压（DBP）和心动间期（HP）。记录一小时内血压和心动间期作为给药前正常对照。然后经胃瘘管给予受试药品并连续记录6小时SBP、DBP和HP的变化。结果显示:艾力沙坦低、中、高三个剂量组均有平稳降压作用,总体趋势低剂量组与中剂量组降压效果相近,高剂量组则呈现明显的降压效果,且与阳性药组（相同剂量）相比较,效果优于阳性药组;同时艾力沙坦对SHR的心率无明显影响。3、采用成年雄性SD大鼠,手术造成2K1C肾血管性高血压大鼠,研究艾力沙坦单次给药对其的降压作用。实验分为5个组:阴性对照组（CMC）、艾力沙坦低剂量组（7.5mg/kg）、中剂量组（15 mg/kg）、高剂量组（30mg/kg）和阳性对照组（氯沙坦钾30 mg/kg）。SD无菌条件下造成2K1C肾血管性高血压大鼠模型,饲养30天后,连入清醒自由活动大鼠测压系统,SBP≥140mmHg为模型成功标准,观察给药前后SBP、DBP和HP的变化。结果显示:艾力沙坦低中高三个剂量组均有显著平稳的逐步降压作用,降压效果明显,作用持久,其中以中剂量组降压最为明显;艾力沙坦对心率无影响。实验确定艾力沙坦对2K1C肾血管性高血压大鼠有显著的降压作用。4、采用雄性健康杂种犬,手术造成2K1C肾血管性高血压犬,观察麻醉状态下,单次给药对其的降压效应。动物随机分为4组:阳性对照组（氯沙坦钾16mg/kg）、艾力沙坦低剂量组（4mg/kg）、中剂量组（8mg/kg）和高剂量组（16mg/kg）。麻醉状态下造成2K1C肾血管性高血压犬。术后6周,麻醉状态下股动脉插管,并连入血压记录系统。SBP≥160mmHg为模型成功标准。稳定后记录半小时血压和心动间期作为给药前对照,给药后连续记录3小时,观察血压和心率的变化情况。结果显示:艾力沙坦低剂量组（4mg/Kg）对2K1C高血压模型犬血压、心率无明显影响;中剂量组（8mg/Kg）和高剂量组（16mg/Kg）对2K1C高血压模型犬有明显降压作用;高剂量组（16mg/Kg）有减慢2K1C高血压模型犬的心率作用。5、采用雄性Beagle犬,以AngII诱发为高血压Beagle犬,观察艾力沙坦单次给药对其血压的影响。动物分5组:阴性对照组（CMC）、艾力沙坦低剂量组（5mg/kg）、中剂量组（10mg/kg）、高剂量组（20mg/kg）和阳性对照组（氯沙坦钾20mg/kg）。Beagle犬静脉滴注AngII 2ug/kg,使血压升高达到180mmHg左右,当停止静脉滴注AngII血压稳定并维持30分钟以上不降低时开始采样作为给药前基础值,然后给药并记录给药后5,15,30min,1,2,3和4h各时间点血压和心率的变化情况。结果显示:用药前后比较发现,阴性对照组SBP和DBP变化不明显,而艾力沙坦低、中、高三个剂量组和阳性对照（氯沙坦钾）组血压显著降低,均呈现明显且平稳的逐步降压趋势。灌胃给药后5分钟血压开始逐步降低,2小时达最大降压效果,以SBP为例,与基础血压相比,低剂量组降低10mmHg ,中剂量组降低18mmHg,高剂量组降低26mmHg,且在给药剂量相同的情况下,高剂量组较阳性对照组（降低22mmHg）降压绝对值更大,统计意义更高。艾力沙坦低、中、高三个剂量组之间有较好的量-效关系。6、采用成年健康杂种犬,观察艾力沙坦对麻醉开胸犬血压及心率的影响。动物分4个组:阴性对照组（CMC）、艾力沙坦低剂量组（10mg/Kg）、高剂量组(20mg/Kg、阳性对照组（氯沙坦钾20mg/Kg）。犬用乌拉坦静脉注射麻醉,插入动脉导管,连接计算机生物信号分析系统显示血压波形,待导管进入左心室,固定并稳定30分钟采样做为给药前基础值,然后灌胃给受试药物并记录记录给药后30、60、90和120min个时间点SBP、心率（HR）、左室收缩压（LVSP）,左室舒张末压（LVEDP）和左室收缩与舒张压最大变化速率（+dp/dt max,-dp/dt max）值。结果显示:比较用药前后血压,阴性对照组和艾力沙坦低剂量组SBP变化不明显,而阳性对照（氯沙坦钾）组和艾力沙坦高剂量组用药后血压显著降低（P<0.05）,且给药30min内艾力沙坦高剂量组较阳性对照组SBP下降更明显,统计显著性亦更高;各实验组对麻醉犬的心率均无明显影响;艾力沙坦低、高两个剂量组对LVSP、LVEDP和±dp/dt max均无明显影响。7、采用雄性SHR,研究艾力沙坦长期给药对其血压、压力感受性反射敏感性（BRS）及终末器官损伤的影响。受试动物随机分为5组:阴性对照组（用正常鼠料喂养）、阳性对照组（氯沙坦钾30mg/kg）、艾力沙坦低剂量组（7.5mg/kg）、中剂量组（15mg/kg）和高剂量组（30mg/kg）。让大鼠随意摄取四种规格的鼠料,饲养4个月后,动物连入大鼠清醒自由活动血压记录系统,记录SBP、DBP和HP,并测定BRS,随后处死动物,取出心脏、胸主动脉与右肾,对终末器官损伤的大体观察指标进行分析。结果显示:艾力沙坦长期给药对SHR有明显降压作用,对心率无影响;可明显升高SHR的BRS,即对反射功能有增强作用;对SHR终末器官损伤大体观察发现,长期给药有逆转SHR左心室肥厚、减轻肾脏（皮质）萎缩和防止主动脉增厚的作用;且其降压作用及器官保护作用均明显优于氯沙坦。结论小鼠最大耐受量实验显示,艾力沙坦毒性远小于氯沙坦钾,且已达到最大给药浓度与给药容积,说明艾力沙坦毒性很小,有很高的安全性。药效学实验显示,艾力沙坦单次给药对SHR和2K1C肾血管性高血压模型（大鼠及犬）以及AngII诱发的高血压Beagle犬均有良好的降压作用;血流动力学实验证实,艾力沙坦对麻醉开胸犬的降压作用显著;长期给药对SHR有显著的降压作用,且明显改善ABR功能,对重要靶器官有很好的保护作用:逆转左心室肥厚、减轻肾脏（皮质）萎缩和防止主动脉增厚。与氯沙坦相比较,艾力沙坦单次给药对SHR、AngII诱发高血压Beagle犬及麻醉开胸犬的降压作用较氯沙坦显著,对2K1C肾血管性高血压大鼠及犬的降压作用与氯沙坦相当;长期给药对SHR的降压作用、改善ABR功能以及对重要靶器官的保护作用均较氯沙坦显著。

论文目录

• 英文缩写词
• 摘要
• ABSTRACT
• 前言
• 材料和方法
• 一：试验材料及仪器
• 二：实验方法和步骤
• 1. 肝素化溶液的配制
• 2. 大鼠股动脉插管及胃造瘘插管
• 3. 清醒自由活动大鼠血压监测方法
• 4. 给药途径及给药容积
• 5. 2K1C 肾血管性高血压大鼠手术
• 6. 2K1C 肾血管性高血压犬手术
• 7. 犬股动脉插管
• 8. 麻醉犬血压监测方法
• 9. AngII 诱发高血压 Beagle 犬造模
• 10. 麻醉开胸犬血流动力学手术方法
• 11. 动脉压力感受性反射敏感性（BRS）的测定
• 12. 终末器官大体标本观察
• 结果
• 一：艾力沙坦最大耐受量实验
• 二：艾力沙坦单次给药对SHR 血压的影响
• 三：艾力沙坦单次给药对2K1C 肾血管性高血压大鼠血压的影响
• 四：艾力沙坦单次给药对2K1C 肾血管性高血压犬血压的影响
• 五：艾力沙坦单次给药对AngII 诱发高血压Beagle 犬血压的影响
• 六：艾力沙坦单次给药对麻醉开胸犬血流动力学的影响
• 七：艾力沙坦长期给药对SHR 血压和终末器官损伤的影响
• 讨论
• 参考文献
• 综述
• 致谢