论文摘要
试验采用普通PCR反应,对PCR反应因子进行优化,在丙烯酰胺凝胶中进行PCR产物检测,银染方法染色,建立了适合本研究SSR-PCR扩增、检测体系。利用在29对SSR引物中筛选出5对特异性引物对46份白菜型油菜材料进行了PCR扩增,通过UPGMA聚类分析,对我们所收集的白菜型油菜种质材料的遗传多样性进行了研究;同时对目前甘肃冬油菜生产、育种工作中主要的11份白菜型油菜品种(系)的亲缘关系、SSR指纹图谱进行了研究,旨在为我们品种选育中亲本选配、品种鉴定、资源保护提供依据。结果如下:1.筛选出的5对特异性SSR引物可将绝大多数试验材料区分开。5对引物在46份材料中共检测出19个等位基因,变幅为2.0-6.0个;遗传遗传多样性指数的变幅为0.6303-0.8609,平均为0.7162。2. 46份材料间的遗传距离在0.7742至0.0323之间,利用PowerMarker(v3.25)软件,以非加权类平均法(UPGMA)进行聚类,在聚类阈值0.2300处可分为3大类群,聚类结果与材料的类型有极大的关系。第一类为和政蔓菁、漳县蔓菁;15份春性材材聚为第二类,在阈值为0.09处又可分为4亚类:陇油3号、G-1分别单独成为一亚类,青油3号、皖油11-1为一亚类;北油1号、门油1号、门源、陇油4号、青油241、两当张家、武威春油菜、南丰油菜、武都春油菜、湘Ⅰ041、湘Ⅰ058为一亚类。29份冬性材料聚为第三类,它们可进一步分为两亚类:一亚类由大冬根、清水野油菜、网8、岷县冬油菜、D89-1、宁7-2、826-8-9-7-0、97选-1-1、975-1组成;另一亚类为S03-512443、9852、天油1号、8728-1-1-2、东泉油菜、延油2号、74-1、986、陈家咀、上党、813-1-2-1-3、964、9889、天油4号、02C杂9、876、陇油6号、天油2号、MXW、WYW,该亚类中S03-512443表现出与其他材料的亲缘关系较远;9852、天油1号、8728-1-1-2、东泉油菜、延油2号、74-1、986聚为一组;陈家咀、上党、813-1-2-1-3、964、9889、天油4号、02C杂9、876、陇油6号、天油2号、MXW、WYW为一组。3.通过与参试材料系谱对比发现,SSR分析结果与品种的系谱基本吻合。4.对目前甘肃生产、育种中利用较多的11份冬油菜品种的分析结果可看出,供试材料间的遗传距离在0.0323与0.4516之间,可分为两大类:第一类为S03-512443;第二类为除S03-512443外的10个品种。第二类可进一步分为两亚类:74-1、9852、延油2号为一亚类,陇油6号、MXW、WYW、天油2号、02C杂9、9889、上党为一亚类。说明目前生产、育种工作中使用的品种(系)的亲缘关系较近。5.根据6对多态性SSR引物对11份冬油菜品种(系)的扩增结果,绘制了11个品种(系)的SSR指纹图谱,为我们今后对品种的鉴定、资源的保护提供了一定的依据。
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