MG132联合顺铂对人宫颈癌Hela细胞裸鼠移植瘤和细胞内p65表达的影响

论文摘要

目的观察蛋白酶体抑制剂MG132联合顺铂对人宫颈癌Hela细胞的裸鼠移植瘤和对Hela细胞中p65的表达的影响。方法:1人宫颈癌裸鼠移植瘤模型的建立（1）复苏Hela细胞,传代培养两代后,取对数生长期细胞,0.25%胰酶消化,用不含血清的1640培养基悬浮细胞,计数后定容至细胞浓度约为4×107/ml。（2）将制备好的细胞悬液接种于20只裸鼠右前肢背侧皮下,每只0.1ml。2荷瘤鼠的分组及干预（1）待肿瘤长至40至70mm3,用随机区组的分组方法将荷瘤鼠分成4组,每组5只。分别给予腹腔注射,对照组:生理盐水0.2ml,第1天至第7天,每天一次。MG132组:MG132,5mg/kg小鼠体重,0.2ml,第1天至第7天,每天一次。顺铂组:顺铂3mg/kg小鼠体重,0.2ml,第3,5,7天,每天一次。MG132联合顺铂组:MG132,5mg/kg小鼠体重,0.2ml,第1天至第7天,每天一次,顺铂3mg/kg小鼠体重,0.2ml,第3,5,7天,每天一次。（2）移植瘤的观察及指标的测定以给药的当天记第1天,以后每三天测量瘤体长,短径,计算瘤体积。绘制瘤体生长曲线,第22天断颈处死小鼠,剥出瘤体,称瘤重。计算抑瘤率及瘤体抑制率。比较各组荷瘤鼠瘤体积和瘤重的差异。瘤体HE染色,行病理学检查。2 Western blot分析测定Hela细胞中p65的变化。（1）分组。对照组:1640培养基+DMSO;顺铂组:终浓度2.5μg/ml的顺铂;MG132组:终浓度5μmol/L的MG132;MG132联合顺铂组:5μmol/L的MG132终浓度2.5μg/ml的顺铂。各组作用时间均为48h。结果1接种的20只裸鼠全部成瘤,成瘤率100%。瘤体组织病理学检查符合低分化的腺癌。2各干预组荷瘤鼠的瘤体积的变化接种的20只裸鼠全部成瘤,在接种的第7天接种部位可见粟粒大小结节,接种的第10天裸鼠瘤体体积大小为约40至70mm3。接种的第10天开始给药,记为给药的第1天.第22天时断颈处死小鼠,结束时荷瘤鼠仍为20只,无死亡。第1,4,7,10,13,16,19,22天测量各组荷瘤鼠瘤体体积,自第7天开始各组荷瘤鼠瘤体积两两比较均有显著性差异（P＜0.001）。MG132组,顺铂组以及MG132联合顺铂组的瘤体生长较对照组明显缓慢。3处死荷瘤鼠时各干预组瘤体积和瘤重的比较给药后第22天,断颈处死荷瘤鼠。剥出瘤体,称重。荷瘤鼠瘤重分别为:对照组:0.86±0.12g,MG132组:0.74±0.13g,顺铂组:0.49±0.08g,MG132联合顺铂组:0.27±0.04g。各组间两两比较均有显著性差异（P＜0.001）。各干预组的荷瘤鼠瘤重比对照组明显较轻。荷瘤鼠瘤体积:对照组:1004.79±239.83mm3,MG132组:855.75±192.52mm3,顺铂组:551.76±143.60mm.3,MG132联合顺铂组:281.72±71.64mm3。各组间两两比较均有显著性差异（P＜0.001）。各干预组的荷瘤鼠瘤体积比对照组明显较小。4处死荷瘤鼠时抑瘤率及瘤重抑制率MG132组,顺铂组,MG132联合顺铂组荷瘤鼠抑瘤率为:15%,48%,81%。MG132组,顺铂组,MG132联合顺铂组荷瘤鼠瘤重抑制率为:9%,43%,69%。5 Western blotting分析测定Hela细胞中p65的变化:与对照组相比,顺铂组的p65表达增高,MG132组以及MG132联合顺铂组表达明显降低。各组相对灰度值进行q检验,MG132组以及MG132联合顺铂组p65的表达没有统计学差异。其他各组两两比较均有统计学差异（p＜0.05）。结论:1 MG132能抑制裸鼠体内Hela细胞移植瘤的生长,并增强顺铂对裸鼠Hela细胞移植瘤生长的抑制作用。2 MG132对Hela细胞的抑制增殖和增强顺铂对Hela细胞的抑制作用可能与阻断NF-κB（p65）的激活有关。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 缩略语表
• 论文正文
• 第一章 前言
• 第二章 材料与方法
• 2.1 材料与仪器
• 2.2 实验方法
• 2.3 统计学方法
• 第三章 结果
• 第四章 讨论
• 第五章 结论
• 参考文献
• 综述
• 综述参考文献
• 致谢