苜蓿种子萌发期耐盐性及遗传多样性研究

论文摘要

本论文以12份苜蓿材料为研究对象，对其进行了种子萌发期耐盐性及遗传多样性分析，旨为苜蓿新品种培育和种质资源开发利用提供理论依据。种子萌发期耐盐性研究采用NaCl胁迫法，遗传多样性以简单重复序列区间扩增多态性（ISSR）进行分析。主要研究结果如下：（1）种子萌发期耐盐性鉴定选取7项指标即相对发芽率、相对发芽势、相对发芽指数、相对活力指数、耐盐指数、发芽动态及半致死浓度。随着NaCl胁迫浓度的增加，耐盐指数呈上升趋势，其他指标呈下降趋势。其中相对发芽率、相对发芽势、耐盐指数及发芽动态4项指标的结果几乎一致，说明这些指标可以作为苜蓿种子萌发期的耐盐性鉴定指标。（2）对不同NaCl浓度处理下各苜蓿材料的相对发芽率与胁迫浓度进行曲线回归分析，发现三次多项式模型（Y=b0+blx+b2x2+b3x3）的拟合效果最好。根据此方程计算出各苜蓿材料的半致死浓度，由半致死浓度排列各苜蓿材料耐盐性强弱顺序与相对发芽率和耐盐指数的排列结果几乎一致。（3）采用模糊数学隶属函数法对苜蓿材料种子萌发期耐盐性进行综合评价，把12份苜蓿材料按耐盐性强弱可分为四个等级，其中保丰和金皇后苜蓿的耐盐性最强，杂交4号和敖汉苜蓿的耐盐性最弱。（4）用ISSR分子标记对12份苜蓿材料进行遗传多样性分析。结果表明：苜蓿材料的多态性条带百分率为95.66%，Shannon信息指数（I*）为0.2698，Nei’s基因多样性指数（H*）为0.1599，因此具有较高的遗传多样性。材料间遗传分化系数（Gst）为0.3114，说明苜蓿材料的遗传分化主要发生在材料内。聚类结果显示，杂交8号和杂交6号材料优先聚到一起，说明这两个材料的遗传组成大致相同。从遗传距离和遗传一致度来分析，杂交8号和杂交6号苜蓿的遗传一致度最大，为0.9827，遗传距离最小，为0.0174，说明其亲缘关系最近；黄花苜蓿优选组培苗和杂交7号苜蓿的遗传一致度最小，为0.8431，遗传距离最大，为0.1707，说明其亲缘关系最远。

论文目录

• 中文摘要
• ABSTRACT
• 1 前言
• 1.1 牧草耐盐性研究概述
• 1.1.1 牧草耐盐性机理
• 1.1.2 耐盐性鉴定方法
• 1.1.3 耐盐性鉴定指标
• 1.1.4 植物耐盐性综合评价法
• 1.2 植物遗传多样性研究概述
• 1.2.1 遗传多样性的研究方法
• 1.3 苜蓿种质资源及其研究现状
• 1.3.1 苜蓿的地位和作用
• 1.3.2 苜蓿耐盐性研究
• 1.3.3 苜蓿遗传多样性研究
• 1.4 本研究的目的和意义
• 2 苜蓿材料种子萌发期耐盐性研究
• 2.1 试验材料与方法
• 2.1.1 试验材料
• 2.1.2 种子萌发期耐盐性
• 2.1.3 数据统计与分析
• 2.2 结果与分析
• 2.2.1 不同 NaCl 胁迫浓度对种子发芽动态的影响
• 2.2.2 不同 NaCl 胁迫浓度对种子相对发芽率的影响
• 2.2.3 不同 NaCl 胁迫浓度下半致死浓度
• 2.2.4 不同 NaCl 胁迫浓度对种子相对发芽指数的影响
• 2.2.5 不同 NaCl 胁迫浓度对种子相对活力指数的影响
• 2.2.6 不同 NaCl 胁迫浓度对种子萌发期盐害指数的影响
• 2.2.7 供试苜蓿材料种子萌发期耐盐性综合分析
• 2.2.8 不同 NaCl 胁迫浓度下苜蓿材料种子萌发期适宜指标的筛选
• 2.3 小结
• 3 苜蓿材料的 ISSR 研究
• 3.1 实验材料
• 3.2 研究内容与方法
• 3.2.1 取样
• 3.2.2 基因组 DNA 提取
• 3.2.3 基因组 DNA 浓度和质量的检测
• 3.2.4 引物的筛选
• 3.2.5 PCR 扩增与检测
• 3.2.6 数据处理
• 3.3 结果与分析
• 3.3.1 ISSR 引物多态性分析
• 3.3.2 苜蓿材料遗传多样性的 ISSR 分析
• 3.3.3 苜蓿材料间的遗传分化
• 3.3.4 苜蓿材料间遗传距离和聚类分析
• 3.4 小结
• 4 讨论与结论
• 4.1 讨论
• 4.1.1 苜蓿材料种子萌发期耐盐性研究
• 4.1.2 12 份苜蓿材料遗传多样性分析
• 4.2 结论
• 参考文献
• 致谢
• 攻读硕士期间发表的论文
• 附图