本文主要研究内容
作者胡沛然（2019）在《六堡茶多酚氧化酶及其产生菌对茶叶品质的应用》一文中研究指出：六堡茶是以梧州大叶毛茶为原料,按特定的初制和精制工艺进行加工,具有“六堡香”及红、浓、陈、醇等独特品质特征的黑茶。发酵(渥堆)是六堡茶品质形成的关键,在高温、高湿度的条件下,微生物生长繁殖,以茶叶为底物发生如催化氧化茶多酚的系列反应。目前,关于六堡茶多酚氧化酶及渥堆微生物的研究很少,本文将茶叶多酚氧化酶、茶叶理化成分变化及微生物数量联系起来,深入理解渥堆时期六堡茶品质形成的过程;从六堡茶发酵样品中分离纯化得到多酚氧化酶同工酶,对其酶学特性进行研究,为后续酶促合成茶色素优化反应体系建立、酶固定化等领域提供理论指导;除此之外,从六堡茶渥堆样品中分离鉴定出的产多酚氧化酶嗜热菌,被应用于茶叶固体发酵模拟实验,对比无菌、传统及单菌株发酵对茶叶成分的转化效果,进一步说明了六堡茶渥堆时期色、香、味等品质成分形成的机理。本研究得到的实验结果如下:1、水浸出物是茶汤的主要呈味、呈色物质,它的含量与多酚氧化酶酶活高度正相关(r=0.8776)。渥堆时期茶叶茶多酚含量从16.6%降至8.2%,随着后期多酚氧化酶酶活升高,茶多酚下降速度加快,而游离氨基酸从40.1mg/g下降至9.9mg/g。在六堡茶渥堆过程中,茶黄素和茶红素均呈现下降趋势,分别从0.12%下降至0.05%和从5.24%下降至0.74%,茶褐素从2.53%上升至5.77%,分析出现这种变化的原因是多酚氧化酶酶活升高,催化了茶黄素、茶红素的进一步氧化。另外,六堡茶渥堆过程中的多酚氧化酶酶活与霉菌的数量同样呈高度正相关(r=0.9192)。多酚氧化酶酶活总体呈上升趋势,但渥堆前毛茶的多酚氧化酶经过杀青工艺已经钝化或失活,推测新的多酚氧化酶可能是由微生物产生。综上,多酚氧化酶对六堡茶品质形成起着重要作用。2、对六堡茶多酚氧化酶的提取进行优化,然后将渥堆前后两种茶样的粗酶液进行硫酸铵分级沉淀、选择合适的盐析饱和度、浓缩、经凝胶过滤层析将制得的样品进行SDS-PAGE分析。渥堆前毛茶PPO分子量在59kDa左右,而渥堆结束的茶叶样品出现了分别约为59kDa和70kDa的条带。分析这是因为渥堆过程中微生物作用产生了新的PPO,且该种PPO可能是真菌产生的漆酶。分子量为70kDa的PPO1的最适pH值为6.5、最适温度40℃、最适底物(邻苯二酚)浓度为0.5mol/L。分子量为59kDa的PP02的最适pH值为6.0、最适温度35℃、最适底物(邻苯二酚)浓度为0.5mol/L。3、利用传统培养法首次从渥堆茶样分离鉴定出嗜热菌,其中细菌5个属,14个种;霉菌5个属,9个种。通过选择性培养基颜色变化和液态培养酶活测定筛选出三株产多酚氧化酶嗜热菌,分别为Lichtheimia corymbifera(伞状毛霉菌)、Aspergillus tubingensis(塔宾曲霉)和Aspergillus fumigatus(烟曲霉)。此外,还通过液态发酵基础培养和茶汁培养绘制出目前课题组已从六堡茶中分离出的5种活性最强的多酚氧化酶产生菌的产酶曲线图。4、选择 Penicillium griseofulvum(灰黄青霉)、Aspergillus niger(黑曲霉)、Aspergillus fumigatus(烟曲霉)进行茶叶固体发酵实验,对多酚氧化酶产生菌在茶叶生物转化效果的应用进行研究。实验样品分为无菌、传统和三种单菌株发酵组,对40天内它们的茶色素、茶多酚及多酚氧化酶酶活变化进行测定。从生长情况上看,黑曲霉、烟曲霉比灰黄青霉和未灭菌的毛茶微生物更能在高温高湿的固体茶叶环境下良好生长。三种菌株发酵组的酶活均高于传统发酵和无菌发酵组。随着模拟发酵时间的增加,每组的茶多酚含量均出现不同程度的降低,其中烟曲霉发酵组对茶多酚的转化效果最为明显,传统发酵组次之。各发酵组的茶黄素含量均随着时间的增长而下降。传统发酵组、无菌组、灰黄青霉发酵组的茶红素、茶褐素呈现出明显的增长趋势。而烟曲霉组和黑曲霉组的茶红素下降,茶褐素上升。
Abstract
liu bao cha shi yi wu zhou da xie mao cha wei yuan liao ,an te ding de chu zhi he jing zhi gong yi jin hang jia gong ,ju you “liu bao xiang ”ji gong 、nong 、chen 、chun deng du te pin zhi te zheng de hei cha 。fa jiao (wo dui )shi liu bao cha pin zhi xing cheng de guan jian ,zai gao wen 、gao shi du de tiao jian xia ,wei sheng wu sheng chang fan shi ,yi cha xie wei de wu fa sheng ru cui hua yang hua cha duo fen de ji lie fan ying 。mu qian ,guan yu liu bao cha duo fen yang hua mei ji wo dui wei sheng wu de yan jiu hen shao ,ben wen jiang cha xie duo fen yang hua mei 、cha xie li hua cheng fen bian hua ji wei sheng wu shu liang lian ji qi lai ,shen ru li jie wo dui shi ji liu bao cha pin zhi xing cheng de guo cheng ;cong liu bao cha fa jiao yang pin zhong fen li chun hua de dao duo fen yang hua mei tong gong mei ,dui ji mei xue te xing jin hang yan jiu ,wei hou xu mei cu ge cheng cha se su you hua fan ying ti ji jian li 、mei gu ding hua deng ling yu di gong li lun zhi dao ;chu ci zhi wai ,cong liu bao cha wo dui yang pin zhong fen li jian ding chu de chan duo fen yang hua mei shi re jun ,bei ying yong yu cha xie gu ti fa jiao mo ni shi yan ,dui bi mo jun 、chuan tong ji chan jun zhu fa jiao dui cha xie cheng fen de zhuai hua xiao guo ,jin yi bu shui ming le liu bao cha wo dui shi ji se 、xiang 、wei deng pin zhi cheng fen xing cheng de ji li 。ben yan jiu de dao de shi yan jie guo ru xia :1、shui jin chu wu shi cha shang de zhu yao cheng wei 、cheng se wu zhi ,ta de han liang yu duo fen yang hua mei mei huo gao du zheng xiang guan (r=0.8776)。wo dui shi ji cha xie cha duo fen han liang cong 16.6%jiang zhi 8.2%,sui zhao hou ji duo fen yang hua mei mei huo sheng gao ,cha duo fen xia jiang su du jia kuai ,er you li an ji suan cong 40.1mg/gxia jiang zhi 9.9mg/g。zai liu bao cha wo dui guo cheng zhong ,cha huang su he cha gong su jun cheng xian xia jiang qu shi ,fen bie cong 0.12%xia jiang zhi 0.05%he cong 5.24%xia jiang zhi 0.74%,cha he su cong 2.53%shang sheng zhi 5.77%,fen xi chu xian zhe chong bian hua de yuan yin shi duo fen yang hua mei mei huo sheng gao ,cui hua le cha huang su 、cha gong su de jin yi bu yang hua 。ling wai ,liu bao cha wo dui guo cheng zhong de duo fen yang hua mei mei huo yu mei jun de shu liang tong yang cheng gao du zheng xiang guan (r=0.9192)。duo fen yang hua mei mei huo zong ti cheng shang sheng qu shi ,dan wo dui qian mao cha de duo fen yang hua mei jing guo sha qing gong yi yi jing dun hua huo shi huo ,tui ce xin de duo fen yang hua mei ke neng shi you wei sheng wu chan sheng 。zeng shang ,duo fen yang hua mei dui liu bao cha pin zhi xing cheng qi zhao chong yao zuo yong 。2、dui liu bao cha duo fen yang hua mei de di qu jin hang you hua ,ran hou jiang wo dui qian hou liang chong cha yang de cu mei ye jin hang liu suan an fen ji chen dian 、shua ze ge kuo de yan xi bao he du 、nong su 、jing ning jiao guo lv ceng xi jiang zhi de de yang pin jin hang SDS-PAGEfen xi 。wo dui qian mao cha PPOfen zi liang zai 59kDazuo you ,er wo dui jie shu de cha xie yang pin chu xian le fen bie yao wei 59kDahe 70kDade tiao dai 。fen xi zhe shi yin wei wo dui guo cheng zhong wei sheng wu zuo yong chan sheng le xin de PPO,ju gai chong PPOke neng shi zhen jun chan sheng de qi mei 。fen zi liang wei 70kDade PPO1de zui kuo pHzhi wei 6.5、zui kuo wen du 40℃、zui kuo de wu (lin ben er fen )nong du wei 0.5mol/L。fen zi liang wei 59kDade PP02de zui kuo pHzhi wei 6.0、zui kuo wen du 35℃、zui kuo de wu (lin ben er fen )nong du wei 0.5mol/L。3、li yong chuan tong pei yang fa shou ci cong wo dui cha yang fen li jian ding chu shi re jun ,ji zhong xi jun 5ge shu ,14ge chong ;mei jun 5ge shu ,9ge chong 。tong guo shua ze xing pei yang ji yan se bian hua he ye tai pei yang mei huo ce ding shai shua chu san zhu chan duo fen yang hua mei shi re jun ,fen bie wei Lichtheimia corymbifera(san zhuang mao mei jun )、Aspergillus tubingensis(da bin qu mei )he Aspergillus fumigatus(yan qu mei )。ci wai ,hai tong guo ye tai fa jiao ji chu pei yang he cha zhi pei yang hui zhi chu mu qian ke ti zu yi cong liu bao cha zhong fen li chu de 5chong huo xing zui jiang de duo fen yang hua mei chan sheng jun de chan mei qu xian tu 。4、shua ze Penicillium griseofulvum(hui huang qing mei )、Aspergillus niger(hei qu mei )、Aspergillus fumigatus(yan qu mei )jin hang cha xie gu ti fa jiao shi yan ,dui duo fen yang hua mei chan sheng jun zai cha xie sheng wu zhuai hua xiao guo de ying yong jin hang yan jiu 。shi yan yang pin fen wei mo jun 、chuan tong he san chong chan jun zhu fa jiao zu ,dui 40tian nei ta men de cha se su 、cha duo fen ji duo fen yang hua mei mei huo bian hua jin hang ce ding 。cong sheng chang qing kuang shang kan ,hei qu mei 、yan qu mei bi hui huang qing mei he wei mie jun de mao cha wei sheng wu geng neng zai gao wen gao shi de gu ti cha xie huan jing xia liang hao sheng chang 。san chong jun zhu fa jiao zu de mei huo jun gao yu chuan tong fa jiao he mo jun fa jiao zu 。sui zhao mo ni fa jiao shi jian de zeng jia ,mei zu de cha duo fen han liang jun chu xian bu tong cheng du de jiang di ,ji zhong yan qu mei fa jiao zu dui cha duo fen de zhuai hua xiao guo zui wei ming xian ,chuan tong fa jiao zu ci zhi 。ge fa jiao zu de cha huang su han liang jun sui zhao shi jian de zeng chang er xia jiang 。chuan tong fa jiao zu 、mo jun zu 、hui huang qing mei fa jiao zu de cha gong su 、cha he su cheng xian chu ming xian de zeng chang qu shi 。er yan qu mei zu he hei qu mei zu de cha gong su xia jiang ,cha he su shang sheng 。
论文参考文献
论文详细介绍
论文作者分别是来自广西大学的胡沛然，发表于刊物广西大学2019-05-23论文，是一篇关于六堡茶论文,多酚氧化酶论文,茶叶品质成分论文,产多酚氧化酶微生物论文,广西大学2019-05-23论文的文章。本文可供学术参考使用，各位学者可以免费参考阅读下载，文章观点不代表本站观点，资料来自广西大学2019-05-23论文网站，若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权，请联系我们删除。
标签：六堡茶论文; 多酚氧化酶论文; 茶叶品质成分论文; 产多酚氧化酶微生物论文; 广西大学2019-05-23论文;