论文摘要
目的：通过阿司匹林对人结肠癌细胞系HT-29、SW-480中肿瘤干细胞相关标记物CD133、CD44、Lgr5影响的研究,探讨阿司匹林预防结肠癌发生的可能机制。方法：采用激光共聚焦免疫荧光双标染色法检测CD44、Lgr5在结肠癌细胞株HT-29、SW-480中的表达,流式细胞仪检测结肠癌细胞株HT-29、SW-480在不同浓度阿司匹林（0、2.5、5.0、10.0 mmol/L即：对照组、低浓度组、中浓度组和高浓度组）干预下CD133的表达,蛋白印迹法（Western blot）检测在不同浓度阿司匹林（0、2.5、5.0、10.0mmol/L即：对照组、低浓度组、中浓度组和高浓度组）干预下CD44蛋白和Lgr5蛋白在HT-29细胞及SW-480细胞中的表达情况。结果：1、激光共聚焦免疫荧光结果显示：在HT-29和SW480结肠癌细胞系中确实存在CD44+和Lgr5+细胞。CD44蛋白定位于细胞膜,呈红色；两种细胞系表达的CD44荧光值比较差异有统计学意义（P<0.05）,Lgr5少量细胞膜表达,大部分细胞质表达,呈绿色；两种细胞系表达的Lgr5荧光值比较差异无统计学意义（P>0.05）；CD44和Lgr5在HT-29和SW480结肠癌细胞系中都有少量共表达部分,呈黄色。2、流式细胞检测结果显示CD133+细胞在HT-29细胞系中的比例为88.3650±0.997%,在SW480细胞系中的比例为65.2233±1.523%。用阿司匹林干预后,随着阿司匹林浓度的增加,CD133在结肠癌细胞系HT-29和SW480中的表达呈减低趋势,对照组和不同浓度组比较差异有统计学意义（P<0.05）。3、Western blot结果显示：在低浓度、中浓度和高浓度作用下,CD44蛋白的表达呈降低趋势,条带颜色由深到浅,对照组和不同浓度组比较差异有统计学意义（P<0.05）。Lgr5蛋白的表达,随着阿司匹林浓度的增加,也呈现递减趋势,对照组和不同浓度组比较差异有统计学意义（P<0.05）。结论：1、结肠癌细胞株HT-29和SW480中确实存在表达CD44+和Lgr5+细胞；2、阿司匹林能抑制结肠癌细胞株HT-29和SW480中CD133的表达,其抑制作用随浓度增加而增大；3、阿司匹林能抑制结肠癌细胞株HT-29和SW480中CD44蛋白和Lgr5蛋白的表达,其抑制作用随浓度增加而增大,并具有良好的量-效关系。
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