论文摘要
目的:白花蛇舌草为茜草科一年生草本植物,具有清热解毒、活血化瘀、利尿通淋等功能。现代研究表明,白花蛇舌草主要化学成分有熊果酸、免疫多糖、乌索酸、白花蛇舌草素等,这些主要的有效成分具有增强免疫活性和抗肿瘤活性。临床观察发现白花砣舌草对肺癌疗效显著。原癌基因bcl-2 是最重要的抑制凋亡基因,其基因表达产物是一种相对分子量为26x10 的蛋白,存在于线粒体膜、核膜和内质网膜上。该基因能抑制细胞凋亡,使细胞长期存活,促使细胞内某些癌基因活化,产生恶性细胞克隆。本研究探讨中药白花蛇舌草提取液诱导人肺癌SPC-A-1 细胞凋亡的作用及初步作用机制。方法:1.细胞增殖实验:测定细胞吸光值,观察白花蛇舌草提取液对SPC-A-1 细胞增殖的影响。2.倒置显微镜观察:经白花蛇舌草提取液和顺铂处理48 小时的SPC-A-1 细胞直接置于倒置镜下观察细胞形态。3.荧光显微镜观察:观察在25mg/ml、50mg/ml 白花蛇舌草提取液和DDP 作用SPC-A-1 细胞48 小时后细胞核染色后的形态。4.DNA 琼脂糖凝胶电泳:用DNA 琼脂糖凝胶电泳检测经不同浓度白花蛇舌草提取液和DDP 作用SPC-A-1 细胞48 小时后,细胞DNA 断裂的情况（DNA 梯状条带）。5.流式细胞仪检测:用流式细胞仪检测细胞凋亡率。6.免疫组化:以不同浓度（12.5、25、50 mg/ml）白花蛇舌草提取液和DDP 作用于SPC-A-1 细胞48 小时后,检测bcl-2 基因的表达。结果:1.白花蛇舌草提取液能抑制SPC-A-1 细胞的生长,其效果与白花蛇舌草的浓度和作用时间相关。2.倒置镜下, SPC-A-1 细胞出现细胞凋亡早期形态学改变。3.荧光显微镜观察到染色质凝聚或断裂等凋亡细胞
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