强极性中药组分的亲水作用色谱保留行为研究

论文摘要

反相色谱是目前应用最为广泛的一种液相色谱模式,它能分析分离大多数有机化合物,但对于强极性化合物,反相色谱并不能提供很好的分离。与反相色谱不同,亲水色谱使用极性固定相、水/有机溶剂作为流动相,能对强极性化合物提供很好的分离,已广泛应用于糖类、氨基酸、多肽、蛋白质、核苷、药物等的分析分离。本论文采用二醇基、氨基、δ-葡萄糖酸内酯三种键合固定相,通过改变流动相中有机溶剂、盐和有机酸的种类及其浓度、柱温等条件,系统研究了强极性中药组分在亲水作用色谱中的保留行为,期望为中药有效成分的分离提取奠定基础。具体工作如下：1.通过改变流动相中乙腈、甲醇和四氢呋喃的浓度,研究了有机溶剂种类及其浓度对溶质保留行为的影响。一般地,流动相中水比例在0-100%（v/v）变化时,溶质的保留随水浓度变化呈“U”型曲线,证明所用溶质的保留属于亲水色谱和反相色谱的混合保留机理,而“U”型曲线形状与有机溶剂、固定相性质和溶质分子结构有关。在同一固定相上,采用乙腈时,溶质的保留最强。2.流动相水相中缓冲盐分别选择甲酸铵、甲酸钠、乙酸钠、乙酸铵,通过改变盐浓度研究了溶质在三种固定相上的保留行为。在二醇硅胶中,溶质保留均随盐浓度增加而增强,而在氨丙基硅胶和δ-葡萄糖酸内酯键合硅胶中,酸性溶质保留随盐浓度增加而减弱,分析了产生该现象的原因。还发现,盐种类对溶质保留的影响不符合Hofmeister效应,没有规律可循。3.研究了流动相中添加的乙酸、甲酸、三氟乙酸对溶质在固定相上保留行为的影响。结果发现,在二醇、氨丙基和δ-葡萄糖酸内酯键合固定相上,外加酸对中性溶质保留影响较小,而对酸性溶质保留影响较大。提出在中药组分的分析中,流动相中乙酸、甲酸添加量应控制在0-0.5%,三氟乙酸应控制在0-0.1%为宜。4.在10-50℃范围内研究了柱温对溶质保留的影响。随着温度的升高,在二醇硅胶中,溶质保留均降低；而在氨丙基硅胶和δ-葡萄糖酸内酯键合硅胶中,各个溶质表现出不同的变化趋势。用Van’t Hoff作图法,分析了溶质在三种固定相上的驱动力。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第一章 绪论
• 1.1 引言
• 1.2 亲水作用色谱中的保留机理
• 1.3 亲水作用色谱中的固定相
• 1.3.1 纯硅胶固定相
• 1.3.2 二醇基键合相
• 1.3.3 腈基键合相
• 1.3.4 环糊精键合相
• 1.3.5 氨基键合相
• 1.3.6 酰胺基键合相
• 1.3.7 聚琥珀酰亚胺键合相及它的衍生物
• 1.3.8 两性离子固定相
• 1.3.9 专门用于亲水色谱的固定相
• 1.4 应用
• 1.4.1 小分子化合物
• 1.4.2 农业和食品化学
• 1.4.3 毒素
• 1.4.4 聚合物合成
• 1.4.5 糖类
• 1.4.6 氨基酸和多肽
• 1.4.7 蛋白质组学——二维液相色谱
• 1.5 本研究所选中药组分的性质
• 1.6 本文的研究目的和内容
• 参考文献
• 第二章 强极性中药组分的亲水作用色谱保留行为研究
• 2.1 引言
• 2.2 实验
• 2.2.1 仪器
• 2.2.2 试剂
• 2.2.3 固定相的制备
• 2.2.4 色谱柱的装填
• 2.2.5 色谱条件
• 2.2.6 实验方法
• 2.3 结果与讨论
• 2.3.1 有机溶剂对溶质保留和选择性的影响
• 2.3.2 盐种类及其浓度对溶质保留的影响
• 2.3.3 有机酸对溶质保留的影响
• 2.3.4 柱温对溶质保留的影响
• 2.4 结论
• 参考文献
• 攻读硕士学位期间取得的学术成果
• 致谢