三丁基锡对褐菖鲉性腺发育影响及其机制的初步研究

论文摘要

有机锡化合物,特别是三丁基锡（TBT）,被广泛用于海洋船只防污（antifouling）涂料。有机锡致使软体动物性畸变已开展了较多的研究,但有机锡对鱼类生殖机能影响的研究还较少。本实验以我国沿海常见的鱼类褐菖鲉（Sebastiscus marmoratus）为主要研究对象,在生态条件下,在环境污染的浓度范围内,通过TBT（1、10、100 ng/L）的暴露实验,对有关的生理生化指标进行观察测定,以分析TBT的对其性腺发育的影响及作用机理。1 TBT对精巢发育的影响及其机制。TBT暴露50 d后,雄性褐菖鲉性腺指数被显著抑制。和对照组比较,尽管暴露组精巢睾酮水平升高,17β-雌二醇水平降低,但精巢发育却受到抑制。运用免疫组织化学和western-blotting的方法对精巢内雌激素受体（ER）进行研究,发现随着TBT浓度的增加,精巢内ER水平降低。这表明ER在TBT诱导的精巢发育抑制中具有重要的作用。2 TBT对卵巢发育的影响及其机制。TBT暴露50 d后褐菖鲉卵巢睾酮水平升高, 17β-雌二醇水平与睾酮:17β-雌二醇比值降低。和对照组比较,TBT暴露组卵巢发育受到显著性抑制。运用TUNEL技术检测TBT暴露50 d对褐菖鲉卵巢生殖细胞凋亡的影响,发现TBT可诱导卵巢生殖细胞凋亡。结果表明,除了性激素水平的变化外,细胞凋亡也可能是TBT抑制卵巢发育的一种原因。3 TBT对脑组织的影响。运用TUNEL技术检测TBT暴露50 d对褐菖鲉脑细胞凋亡的影响,发现TBT可诱导脑细胞凋亡。结果表明,脑细胞凋亡可能是TBT抑制性腺发育的一种原因。综上所述,本实验结果表明TBT暴露能够抑制精巢和卵巢的发育,提高睾酮水平,降低17β-雌二醇水平。TBT诱导的激素水平的变化是其抑制性腺发育的机制之一。另外,卵巢生殖细胞与脑细胞的凋亡以及精巢ER水平的降低也是TBT抑制性腺发育的原因。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第一章 前言
• 一、有机锡污染现状
• 二、有机锡的生殖毒性
• 三、鱼类性腺发育调控机制
• 1 鱼类性腺的功能形态学
• 2 性激素
• 3 下丘脑－垂体
• 四、研究的目的、意义和主要内容
• 第二章 材料和方法
• 一、实验材料
• 二、仪器和试剂
• 1 实验仪器
• 2 常用试剂
• 三、污染实验
• 四、组织学
• 1 H.E.染色
• 2 性腺组织学分析
• 3 免疫组织化学
• 4 TUNEL 检测细胞凋亡
• 五、SDS–聚丙烯酰胺凝胶电泳与 Western bolt
• 1 样品预处理
• 2 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳与 Western boltting 试剂配方
• 3 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳与 Western bolt 分析
• 六、褐菖鲉血清及性腺性激素水平的测定
• 1 性腺预处理
• 2 测定方法
• 七、数据处理
• 第三章 结果
• 一、TBT 暴露对雄性褐菖鲉精巢发育的影响
• 1 TBT 暴露对雄性褐菖鲉丰满系数（CF）和性腺指数（GSI）的影响
• 2 TBT 暴露对雄性褐菖鲉精巢的组织学影响
• 3 TBT 暴露对雄性褐菖鲉精巢激素水平的影响
• 4 TBT 暴露对雄性褐菖鲉血清激素水平的影响
• 5 TBT暴露对褐菖鲉精巢ER的影响
• 6 TBT暴露对褐菖鲉精巢AR的影响
• 二、TBT 暴露对雌性褐菖鲉卵巢发育的影响
• 1 TBT 暴露对雌性褐菖鲉丰满系数和性腺指数的影响
• 2 TBT 暴露对雌性褐菖鲉卵巢的组织学影响
• 3 TBT 暴露对雌性褐菖鲉卵巢激素水平的影响
• 4 TBT 暴露对雌性褐菖鲉血清激素水平的影响
• 5 TBT暴露对雌性褐菖鲉卵巢ER受体的影响
• 6 TBT 暴露对雌性褐菖鲉卵巢细胞凋亡的影响
• 三、TBT 暴露对褐菖鲉脑组织的影响
• 第四章 讨论
• 一、TBT 暴露对褐菖鲉丰满系数和性腺指数的影响
• 二、TBT 暴露对褐菖鲉性腺发育的影响
• 三、TBT 暴露对褐菖鲉性腺和血清激素水平的影响
• 四、TBT 暴露对褐菖鲉激素受体的影响
• 五、TBT 暴露对褐菖鲉卵巢细胞凋亡和闭锁的影响
• 六、TBT 暴露对褐菖鲉脑组织病理学影响
• 结论
• 参考文献
• 攻读硕士阶段发表的论文和参加的课题
• 致谢