CHRM3基因多态性与中国汉族人2型糖尿病发病、糖脂代谢的关联研究

论文摘要

目的:探讨毒蕈碱乙酰胆碱受体亚型3（Muscarinic Acetylcholine Receptor Subtype M3,Cholinergic Receptor, Muscarinic 3,CHRM3）基因rs3738435多态性与上海地区汉族人群糖尿病发病风险及体重和糖脂代谢的相关性。方法:收集足够数量且符合分子病因学研究要求的初发2型糖尿病患者及正常糖耐量人群标本,并测定研究对象的身高、体重、腰围、臀围、股围,总胆固醇、甘油三脂、高密度脂蛋白-胆固醇、低密度脂蛋白-胆固醇,75G葡萄糖负荷前后血胰岛素、C肽、血浆葡萄糖,计算体重指数（BMI）、腰臀比（WHR）、腰股比（WFR）,胰岛素分泌指数、胰岛素抵抗指数等。应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism PCR-RFLP）技术结合直接测序方法在573例上海地区汉族人（糖耐量正常353名,T2DM患者220例）中检测毒蕈碱乙酰胆碱受体亚型3（CHRM3）基因rs3738435多态性,测算基因频率分布及比较不同基因型亚组间的各种临床代谢参数。结果:1、本组上海地区中国人中,SNP rs3738435有3种基因型TT,TC及CC,NGT组人群基因型频率分别为0.380（134例）,0.462（163例）及0.159（56例）。与文献报道Pima印第安人非糖尿病者基因型TT,TC及CC频率0.253（99例）,0.480（188例）及0.268（105例）之间有明显差异（χ2=19.964,P=0.000）,中国人中T等位基因较Pima印第安人中显著多见。2、本组上海地区中国人中,基因型分布频率在T2DM （ TT:0.373,TC:0.486,CC:0.141 ）和NGT （ TT: 0.380,TC:0.462, CC:0.159）两组人群中无统计学差异（χ2=0.472,P=0.790）。以糖尿病为因变量,以CHRM3 rs3738435的基因型、年龄、性别等为自变量进行logistic回归分析,其结果显示该多态不参与2型糖尿病发病（χ2= 0.002,P=0.960）。3、T2DM组TT基因型人群与携带等位基因C（TC基因型+CC基因型）人群相比,体重、BMI、腰围和臀围均升高,差异有显著统计学意义, P值分别为0.015,0.001,0.004和0.009。经年龄、性别校正后P值分别为0.003,0.001,0.005和0.006。其中在T2DM组中TT基因型人群BMI显著高于含C基因型（（26.99±3.59 ）kg/m2对（25.34±3.48）kg/m2,P=0.001）。4、NGT组携带等位基因C人群和非携带C人群、携带等位基因T人群和非携带T人群以及各个基因型间空腹血脂谱、BMI、WHR、WFR等差异均无统计学意义,经年龄、性别校正后仍无统计学差异显著性。5、将NGT及T2DM组分别按BMI水平分成亚组进行分层分析,T2DM BMI≥25 kg/m2,BMI<25 kg/m2两亚组间基因型TT与TC+CC的分布频率差异有极显著意义（TT基因型的频率0.492对0.224,OR=3.343,95%CI 1.848～6.046,χ2=16.610,P=0.000）。以BMI为因变量（BMI<25 kg/m2为0,BMI≥25 kg/m2者为1）,以CHRM3 rs3738435位点的基因型、年龄、性别等为自变量进行logistic回归分析,显示该多态可能是参与体重调节的独立危险因子（OR=3.615,χ2=17.162, P=0.000）。NGT组内BMI≥25 kg/m2,BMI<25 kg/m2两亚组间基因型分布频率差异无显著意义。6、进一步比较T2DM BMI≥25 kg/m2,BMI<25 kg/m2两亚组组内各基因型间相关临床指标发现,BMI≥25 kg/m2亚组中TT基因型人群血浆TC水平与携带等位基因C（TC基因型+CC基因型）人群相比明显升高,有统计学意义（（5.75±1.26）mmol/L对（5.27±1.14）mmol/L,t=2.197,P=0.030,性别年龄校正后P=0.025）;TT基因型人群的LDL水平与携带等位基因C人群相比亦明显升高（（3.51±1.36）mmol/L对（3.04±1.11）mmol/L,t=2.059,P=0.042,性别年龄校正后P=0.038）。BMI<25 kg/m2亚组组内TT基因型人群TC水平与携带等位基因C人群相比降低（（4.86±1.03）mmol/L对（5.55±1.29）mmol/L,t=-2.303,P=0.023,性别年龄校正后P=0.027）。亦发现LDL与TC水平有相同趋势。7、无论是NGT组还是T2DM组,各基因型间空腹和葡萄糖负荷后2h血糖,胰岛素,C肽,HOMA– IR,HOMA– IS水平差异均无统计学意义,经性别,年龄和体重指数校正后仍无统计学差异。结论:CHRM3基因rs3738435多态位点可能参与2型糖尿病患者体重和脂代谢调节,但不参与糖代谢调节,不是中国人2型糖尿病的致病基因。本研究为进一步阐明2型糖尿病的分子病因奠定基础,提供理论依据和指导。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 第一章 引言
• 第二章 研究对象与方法
• 第三章 结果
• 第四章 讨论
• 第五章 结论
• 第六章 参考文献
• 第七章 附录
• 致谢
• 攻读硕士学位期间参与的实验和工作
• 已收录文章目录及会议摘要目录