论文摘要
前言幽门螺杆菌（Helicobacter pylori，H．pylori）感染与慢性胃炎、消化性溃疡、胃粘膜相关性淋巴样组织淋巴瘤（MALT）以及胃癌的发生密切相关，全世界成年人口中有50％左右携带该菌。目前，病理组织学检查、快速尿素酶实验（RUT）和细菌培养是诊断H．pylori感染的常用方法，但病理组织学检查与观察者经验和观察准确性密切相关，当粘膜上定植的H．pylori过少时，容易产生假阴性结果；RUT则要求所检粘膜含有足量细菌，同时它的敏感性受抗生素，质子泵抑制剂等药物影响；细菌培养虽然是诊断H．pylori感染最特异的方法，但培养时间长，价格昂贵，敏感性低等缺点不利于其广泛应用。此外，研究发现，个体感染H．pylori后表现出的不同临床结局，可能与H．pylori基因亚型的多样性存在某种联系。因此，快速、准确检测H．pylori感染及其致病基因亚型，有助于胃肠疾病的诊治、H．pylori感染预后的判断及根除H．pylori治疗方案的选择。近年来，有学者采用PCR方法直接从活检胃粘膜组织中检测H．pylori基因，用于探讨其与胃疾病关系。Gunn MC et al直接从胃粘膜中检测H．pylori cagA基因，发现其与消化性溃疡的发生无关。David Y．et al报道，利用无H．pylori感染的胃黏膜与H．pylori悬液共培养，提取定植于胃粘膜的菌体DNA后检测cagA和vacA基因，结果与直接检测的H．pylori菌株基因型相似。但是，上述研究并未把粘膜来源的H．pylori基因型与“金标准”菌种来源基因型作比较，因而，缺乏循证医学证据。另外，该方法是否容易受黏附在粘膜上的其它细菌或粘膜DNA模板等混杂因素影响，是否准确反映自然人群H．pylori感染真实状态，尚不知晓。目的本研究将同一例胃粘膜来源H．pylori-DNA基因亚型与菌种来源H．pylori-DNA基因亚型进行配对比较，以明确两者的符合程度，探讨直接从活检胃粘膜组织中检测幽门螺杆菌用于临床H．pyiori感染判定的可行性，同时探讨不同基因亚型H．pylori感染与胃疾病的相互关系。方法本实验共选取217例胃镜受检者（男124例，女93例，年龄19～87岁，平均51.75岁），每例取新鲜胃粘膜2块，其中1块用于组织病理学诊断，包括浅表性胃炎（GS）90例、糜烂溃疡（GEU）28例、萎缩性胃炎（GA）70例、胃癌（GC）29例。另1块用于H．pylori分离培养和胃黏膜DNA提取，同时对粘膜DNA和菌种DNA标本行聚合酶链反应及琼脂糖凝胶电泳对ureB，cagA，vacA，iceA和baba2基因亚型进行检测。结果胃粘膜来源H．pylori-DNA与菌种来源H．pylori-DNA检测ureB、cagA、vacAs1、vacAm1b、vacAm2、iceA1、iceA2和baba2亚型，两者符合率分别为74.23％，73.39％，93.69％，62.16％，78.16％，89.13％，88.37％和75％，差异均无统计学意义（p＞0.05）。各疾病组间，幽门螺杆菌ureB、csgA、vncAs1、vacAm1b、iceA1、iceA2和baba2亚型分布频率差异均无统计学意义（p＞0.05）；vacA s1m1基因型在浅表性胃炎组（22.22％）分布频率最高，与萎缩性胃炎组（5.71％）相比差异有统计学意义(x2=8.415 p=0.004；vacA s1m2基因型在萎缩性胃炎组（47.14％）分布频率最高，与浅表性胃炎组（18.89％）相比差异有统计学意义（x2=13.336 p=0.000）。结论胃粘膜直接提取DNA检测幽门螺杆菌基因型可以用于H．pylori感染的快速诊断。VacA s1m1基因型与浅表性胃炎相关，VacA s1m2基因型与萎缩性胃炎相关。