日本囊对虾血蓝蛋白的基因结构及抗病毒机制的初步研究

日本囊对虾血蓝蛋白的基因结构及抗病毒机制的初步研究

论文摘要

血蓝蛋白主要存在于甲壳纲,多足纲,肢口纲和蛛形纲动物体内。作为血淋巴的主要组成成分,血蓝蛋白大概占血淋巴总蛋白含量的95%以上。血蓝蛋白在对虾肝胰腺内被合成,并以六聚体为一单位的形式游离在血淋巴中,负责氧气的运输起着"分子肺"(即呼吸蛋白)的作用。另外,血蓝蛋白作为一种多功能蛋白还被证实参与一些生理过程,如渗透压的调节、能量的贮藏和酶的活力。而最受我们关注的是血蓝蛋白已被发现在节肢动物和软体动物的天然免疫系统起着重要的作用,但主要集中在抗菌防御体系,而但对血蓝蛋白在抗病毒防御体系中的作用人们却知之甚少。我们的研究中发现纯化的天然状态的血蓝蛋白在体内能够显著地减缓白斑杆状病毒对对虾的感染。因此,我们从日本囊对虾中克隆得到了两个血蓝蛋白亚基的基因(PjHcL和PjHcY)。有趣的是我们发现病毒感染对这两个亚基的表达产生了不同的影响。病毒的侵染诱导了大量PjHcL基因mRNA的转录,但PjHcY基因却无明显变化。而且,在抗病对虾体内我们也发现血蓝蛋白的表达量显著升高,同时在转录水平,相比于PjHcY基因,PjHcL基因明显上调。这些发现不但揭示了对虾血蓝蛋白在抗病毒防御系统中的重要作用,还提示我们血蓝蛋白这两个不同亚基可能在对虾天然免疫系统中发挥着不同的作用。

论文目录

  • 中文摘要
  • 英文摘要
  • 1 前言
  • 1.1 我国对虾的养殖现状
  • 1.2 对虾的免疫系统
  • 1.3 血蓝蛋白的基本特征与研究进展
  • 1.4 本论文研究的目的及意义
  • 2 材料与方法
  • 2.1 材料
  • 2.2 实验方法
  • 3 结果与分析
  • 3.1 日本囊对虾血蓝蛋白抗病毒活性实验
  • 3.2 血蓝蛋白cDNA 序列的扩增
  • 3.3 PjHcL 和PjHcY 在抗病虾和普通虾体内的转录表达差异
  • 3.4 PjHcL 和PjHcY 在病毒胁迫后的转录表达差异
  • 3.5 血蓝蛋白的基因结构和启动子的扩增
  • 3.6 PjHcL 和PjHcY 启动子转录因子结合位点分析及功能验证
  • 3.7 血蓝蛋白亚基的分段表达及各段抗病毒活性检测
  • 4 讨论
  • 5 小结与展望
  • 参考文献
  • 致谢
  • 相关论文文献

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