生长激素对围着床期子宫内膜容受性及免疫调节的影响的动物实验研究

生长激素对围着床期子宫内膜容受性及免疫调节的影响的动物实验研究

论文摘要

研究背景:近几十年来人类辅助生殖技术(ART)有了很大的发展,但临床妊娠率却不尽人意[1],原因有多方面,其中胚胎能否成功着床是问题的关键,而子宫内膜容受性又是着床与否的关键性因素,所以如何改善子宫内膜容受性成为生殖医学领域研究的热点之一。生长激素(GH)是由脑垂体前叶分泌的一种重要的肽类激素,作用于性腺靶组织上的受体(GHR)或诱导IGF-I的生成直接或间接调节生殖功能[2]。有研究发现在体外授精-胚胎移植(IVF-ET)时,GH辅助用于GnRH控制性促排卵,可明显改善卵巢反应性,使获卵数,受精率及优质胚胎数增加,提高妊娠率[3,4]。应用GH提高妊娠率一方面是由于卵子质量的改善,国内外已有大量相关实验可证实;另一方面可能是改善了子宫内膜的容受性,其机制鲜有文献报道。此外,胚胎着床是一个母胎间免疫耐受的过程,Th l/Th 2型细胞因子与免疫耐受机制的建立密切相关[5,6]。在外科领域有学者发现GH具有免疫调理功能[7,8]。因而探究GH能否调节着床期的免疫耐受机制及是否改善子宫内膜容受性可为临床上某些棘手之症如不明原因反复种植失败的治疗用药提供一定的理论基础。(一)探讨生长激素对围着床期SD大鼠子宫内膜容受性的影响目的:观察生长激素对围着床期SD大鼠子宫内膜组织Itgαvβ3及OPN表达的影响,探讨生长激素对子宫内膜容受性的作用及作用机制。方法:随机将50只雌性SD大鼠平均分成两组,对照组为生理盐水(NS)组,实验组为生长激素(GH)组,取发现阴栓后(交配后)第4天子宫内膜,用免疫组化技术检测子宫内膜整合素αvβ3(Itgαvβ3)及骨桥蛋白(OPN)的表达,同时首次通过SYBR Green︱嵌合荧光实时定量PCR技术检测子宫内膜上述两种因子mRNA的表达。结果:1、两组子宫内膜Itgαvβ3及OPN均阳性表达于子宫内膜腔上皮和腺上皮细胞的胞浆及胞膜表面;2、GH组子宫内膜Itgαvβ3及OPN的表达呈强阳性,NS组表达弱于GH组,两组差异有显著性(P<0.05)。3、GH组子宫内膜mRNA(Itgαvβ3)及mRNA(OPN)的表达相比NS组明显增强,两组差异有显著性(P<0.01)。结论:生长激素可以增强围着床期子宫内膜Itgαvβ3及OPN的表达,从而改善子宫内膜容受性。(二)探讨生长激素对围着床期SD大鼠免疫调节的影响目的:观察生长激素对围着床期SD大鼠血清中Th l型细胞因子IL-2和Th 2型细胞因子IL-4表达的影响,探究GH能否调节围着床期的免疫耐受机制。方法:实验(-)中两组雌性SD大鼠,于交配前的动情间期及交配后(发现阴栓后)第4天上午9:00-10:00各取尾静脉血,用ELISA法检测血清中IL-2和IL-4的表达。结果:1、两组间交配前后IL-2和IL-4的表达均无统计学差异;2、各组交配后血清中IL-2的表达较交配前下降,而IL-4的表达增高,差异有显著性(P<0.05)。结论:Th l/Th 2型细胞因子的平衡向Th 2型细胞因子的转换与围着床期免疫耐受机制的建立有关,生长激素不能调节健康SD大鼠围着床期的免疫耐受机制。

论文目录

  • 中文摘要
  • 英文摘要
  • 中英文词汇对照表
  • 前言
  • 第一部分 探讨生长激素对围着床期 SD 大鼠子宫内膜容受性的影响
  • 一、材料和方法
  • 讨论
  • 第二部分 探讨生长激素对围着床期 SD 大鼠免疫调节的影响
  • 一、材料和方法
  • 二、结果
  • 讨论
  • 结论
  • 参考文献
  • 附图
  • 综述(一)
  • 参考文献
  • 综述(二)
  • 参考文献
  • 致谢
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