眼镜蛇毒膜毒素体内抗膀胱肿瘤及体外诱导膀胱癌细胞凋亡的实验研究

论文摘要

目的:探讨眼镜蛇毒膜毒素-12（membrane toxin-12, MT-12）体内局部用药对膀胱肿瘤的抑制作用,并对MT-12能否诱导体外培养的膀胱癌细胞凋亡进行研究。方法:Balb/c裸小鼠肩背部皮下注射人膀胱癌细胞（E-J）悬液,建立皮下移植瘤动物模型。皮下肿瘤直径达6mm时,根据MT-12用药量的大小,将24只动物随机分为高剂量组（0.8mg/kg）、中剂量组（0.4mg/kg）、低剂量组（0.2mg/kg）和对照组4组,每组6只动物。实验组分别按不同剂量在瘤周皮下注射MT-12,隔日注射一次,共注射10次,对照组瘤周皮下注射等量生理盐水,绘制肿瘤生长曲线。停药后次日杀死所有动物,计算抑瘤率。体外培养人膀胱移行细胞癌细胞株E-J和BIU-87,终浓度为3μg/ml的MT-12分别与贴壁生长的两细胞株作用一定时间后,HE染色、Hoechst33342染色、透射电镜观察凋亡细胞的形态学改变,Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测凋亡率,琼脂糖凝胶电泳观察细胞凋亡的DNA片段。结果:MT-12的抑瘤作用明显,高、中、低剂量组的抑瘤率分别为93.2%、36.9%、13.6%,抑瘤作用与剂量相关,高、中剂量组瘤重均较对照组低（P<0.001）,低剂量组瘤重和对照组差异无显著性（P>0.05）。光镜和透射电镜下均能观察到凋亡细胞的核固缩、染色质边集、核碎裂、凋亡小体形成等形态学特征。MT-12与两株细胞分别作用12h、24h和36h,流式细胞术检测的E-J细胞早期凋亡率分别为0.51%、1.49%和2.29%,BIU-87细胞早期凋亡率分别为59%、32.78%和5.19%,两株细胞的阴性对照组早期凋亡率分别为0.03%和0.77%。DNA电泳未能检测到典型的E-J和BIU-87细胞凋亡的DNA ladder。结论:MT-12局部用药能抑制Balb/c裸小鼠皮下膀胱肿瘤的生长,且抑制作用与用药剂量相关。MT-12能诱导体外培养的E-J和BIU-87细胞凋亡,诱导凋亡可

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 正文
• 前言
• 材料和方法
• 实验结果
• 讨论
• 结论
• 参考文献
• 致谢
• 综述
• 已刊文章目录