多烯紫杉醇纳米结构脂质载体的研究

论文摘要

本文采用高压热乳匀法和溶剂扩散法制备多烯紫杉醇纳米结构脂质载体（Nanostructured Lipid Carrier Loaded with Docetaxel,DCT-NLC）,考察其各项物理化学性质,通过冷冻干燥将其制备成冻干粉针,研究大鼠尾静脉注射纳米粒混悬液后的药代动力学特征,以及纳米粒在大鼠各组织器官中的靶向作用。本文建立了DCT-NLC的体外分析方法,经方法学验证,适用于该品体外控制。测定了DCT在水中和不同比例大豆油/中链脂肪酸甘油酯中的溶解度及其在不同pH缓冲液溶液的表观油/水分配系数。建立了超滤法和透析法两种NLC包封率的测定方法,结果表明两种方法均有较高的方法回收率,可用于DCT-NLC包封率的测定。考察了DCT-NLC的两种制备方法:高压热乳匀法和溶剂扩散法。在单因素实验的基础上,以制得的纳米粒混悬液的稳定性和包封率为指标,采用正交设计进行优化,分别确定了这两种方法的最佳处方组成和制备工艺条件。为了提高制剂的稳定性,本文对DCT-NLC混悬液的冷冻干燥工艺进行了初步探讨,并对冻干前后的混悬液进行了制剂学评价,以高压热乳匀法制备的NLC混悬液冻干前后的平均粒径分别为156 nm和245 nm,均为单峰分布,ζ电位分别为-43.6 mv和-38.8 mv;溶剂扩散法制备的DCT-NLC混悬液冻干前后的平均粒径分别为129 nm和165 nm,均为单峰分布,ζ电位分别为-29.2 mv和-24.1 mv。用X射线粉末衍射法和DSC扫描研究了药物在NLC中的分散状态,表明制成NLC后,药物以分子状态或无定形状态分散在脂质材料中。两种方法制备的冻干复溶液24小时累积释药百分率分别为12.90%和13.43%。冻干制剂室温放置3个月稳定性良好。建立了生物样品中DCT的HPLC分析方法,通过大鼠尾静脉注射DCT注射液和DCT-NLC混悬液,测定不同时间的血药浓度,研究DCT-NLC在体内的释放过程,数据利用统计矩进行分析,结果表明该DCT-NLC具有一定的缓释作用。比较了DCT注射液和DCT-NLC混悬液在大鼠体内各组织的分布性质,测定了两种制剂尾静脉给药后不同时间点大鼠心,肝,脾,肺,肾及脑中的药物浓度。结果表明制备成NLC后药物在心和肾组织中分布降低,肝、脾和肺组织中分布显著增加,脑组织中变化不明显。值得一提的是在肺组织中药物浓度比DCT注射液组显著提高,具有治疗意义。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 前言
• 一.多烯紫杉醇简介
• 二.纳米结构脂质载体给药系统简介
• 三.纳米结构脂质载体制备方法简介
• 四.纳米结构脂质载体冷冻干燥方法简介
• 五.纳米粒的体内行为及给药途径
• 六.立题依据、目的和意义
• 第一章 多烯紫杉醇纳米结构脂质载体处方前考察
• 1 仪器和试药
• 1.1 仪器
• 1.2 材料
• 2 方法和结果
• 2.1 HPLC分析方法的确立
• 2.1.1 测定波长的选择
• 2.1.2 色谱条件
• 2.1.3 方法专属性试验
• 2.1.4 线性关系考察
• 2.1.5 精密度试验
• 2.1.6 回收率试验
• 2.1.7 最低定量限的确定
• 2.1.8 样品含量测定方法
• 2.2 DCT在不同油相中的表观溶解度的测定
• 2.3 油/水分配系数的测定
• 2.4 DCT-NLC包封率测定方法的建立
• 2.4.1 超滤法
• 2.4.2 透析法
• 3 讨论
• 3.1 样品的含量测定
• 3.2 溶解度的测定
• 3.3 油水分配系数的测定
• 3.4 包封率的测定
• 4 本章小结
• 第二章 多烯紫杉醇纳米结构脂质载体的制备
• 1 仪器和材料
• 1.1 仪器
• 1.2 材料
• 2 方法和结果
• 2.1 高压乳匀法制备DCT-NLC
• 2.1.1 初乳的制备
• 2.1.2 高压乳匀的压力和次数
• 2.1.3 脂质材料与乳化剂的考察
• 2.1.4 药脂比（w/w）对稳定性和包封率的影响
• 2.1.5 正交实验设计
• 2.1.6 高压热乳匀法制备DCT-NLC的方法确定
• 2.2 溶剂扩散法制备DCT-NLC
• 2.2.1 脂质材料的筛选
• 2.2.2 有机溶剂的选择
• 2.2.3 有机溶剂与水相的比例
• 2.2.4 搅拌温度
• 2.2.5 搅拌时间
• 2.3.6 正交实验
• 2.3.7 溶剂乳化法制备DCT-NLC的方法确定
• 3. 讨论
• 3.1 NLC的制备方法
• 3.2 脂质材料
• 3.3 乳化剂的种类
• 3.4 脂质浓度及药脂比
• 4. 本章小结
• 第三章 多烯紫杉醇纳米结构脂质载体冻干制剂的研究及制剂学性质考察
• 1 仪器和材料
• 1.1 仪器
• 1.2 材料
• 2 方法和结果
• 2.1 冻干工艺的考察
• 2.1.1 预冻温度的考察
• 2.1.2 预冻时间
• 2.1.3 干燥时间的考察
• 2.1.5 冻干保护剂的选择
• 2.2 DCT-NLC制剂学性质考察
• 2.2.1 DCT-NLC含量的测定
• 2.2.2 包封率的测定
• 2.2.3 粒径的测定
• 2.2.4 Zeta电位的测定
• 2.2.5 药物在NLC中的存在状态
• 2.2.6 体外释放考察
• 2.2.7 冻干制剂加速稳定性考察
• 3 讨论
• 3.1 DCT-NLC的粒径分布及Zeta电位
• 3.2 X射线衍射法和差示扫描量热法对冻干后的纳米粒状态的考察
• 3.3 体外释放
• 4 本章小结
• 第四章 多烯紫杉醇纳米结构脂质载体溶血性试验及大鼠体内药物动力学研究
• 1 仪器、材料与动物
• 1.1 仪器
• 1.2 材料与动物
• 2 方法与结果
• 2.1 溶血性试验
• 2.2 大鼠体内药动学
• 2.2.1 生物样品中DCT的含量测定方法
• 2.2.2 大鼠尾静脉注射DCT-NLC的药动学研究
• 3 讨论
• 3.1 溶血性实验
• 3.2 DCT-NLC的药动学分析
• 3.3 DCT-NLC的血管刺激性
• 4 本章小结
• 第五章 多烯紫杉醇纳米结构脂质载体在大鼠体内组织分布的初步研究
• 1 仪器、材料与动物
• 1.1 仪器
• 1.2 材料与动物
• 2 方法与结果
• 2.1 组织样品中DCT的含量测定方法
• 2.1.1 色谱条件
• 2.1.2 溶液的配制
• 2.1.3 组织样品的处理
• 2.1.4 标准曲线的制备
• 2.1.5 精密度实验
• 2.1.6 方法回收率实验
• 2.2 给药方案与样品采集
• 2.3 样品测定结果
• 3 讨论
• 4. 小结
• 全文结论
• 参考文献
• 发表论文
• 致谢